Wpływ ćwiczeń na tkankowy wychwyt beta-alaniny i tempo syntezy karnozyny

B-alanina jest nieistotnym, niebiałkowym aminokwasem występującym w niedoborowych stężeniach mięśni szkieletowych. Ten niedobór sprawia, że ​​B-alanina jest czynnikiem ograniczającym szybkość syntezy karnozyny. Suplementacja B-alaniną bardzo skutecznie zwiększa domięśniową zawartość karnozyny, prowadząc do poprawy wydolności fizycznej, zwłaszcza w ćwiczeniach o wysokiej intensywności (HIIE). Wydaje się, że ćwiczenia same w sobie mogą modulować zawartość karnozyny; pozostaje jednak niepewne, czy trening fizyczny lub status wytrenowania mogą wpływać na reakcje na suplementację B-alaniną. Dlatego ta praca ma na celu ocenę, czy HIIE może zwiększać wychwyt B-alaniny przez tkanki obwodowe, a dokładniej mięśnie szkieletowe i zwiększać domięśniową syntezę karnozyny. Przeprowadzone zostanie badanie z przeciwwagą krzyżową. Ochotnicy będą oceniani w dwóch warunkach: spożycie B-alaniny + ćwiczenia (B-EX) oraz spożycie samej B-alaniny (B-Ala). Dawka wyniesie 20 mg · kg-1 (proszek rozcieńczony w wodzie). Proces ten zostanie podzielony na dwa bloki po sześć dni (od czwartku do czwartku - bez weekendu) z 4-6 tygodniową przerwą. W bloku B-EX odbędzie się 20-minutowa sesja HIIE. Następnie zostanie podana suplementacja B-alaniną. Bezpośrednio po wysiłku, podczas 150-minutowego odpoczynku, zostaną wykonane pobranie krwi żylnej, biopsja mięśnia oraz pobranie moczu przed i po teście. W ciągu następnych trzech dni (od czwartku do środy) ten sam protokół zostanie powtórzony bez pobierania krwi, mięśni lub moczu. W tych dniach suplementacja B-alaniną będzie podawana przed i po protokole (B-EX i B-Ala), w tej samej dawce 20mg.kg-1. W dniu 6 (czwartek) zostanie przeprowadzony pełny protokół, w tym pobranie materiału biologicznego. W bloku B-Ala takie same procedury zostaną przyjęte dla bloku B-EX, z wymianą HIIE na 20 minut odpoczynku w pozycji siedzącej na ergometrze rowerowym. Parametry żywieniowe będą oceniane podczas dwóch bloków za pomocą dzienników dietetycznych w oprogramowaniu (Dietbox), które zawiera zdjęcia i opis wszystkich posiłków ochotników w ciągu dnia. Zostanie ustalone, że podczas bloków (B-EX i B-ala) spożycie Beta-alaniny z pożywieniem jest ograniczone do 300 mg dziennie. Analiza oznaczania B-alaniny mięśniowej, osocza i moczu, karnozyny mięśniowej zostanie przeprowadzona metodą HPLC-ESI+-MS/MS. Ekspresja genów enzymów i transporterów związanych z karnozyną będzie analizowana przy użyciu techniki PCR w czasie rzeczywistym. Enzymy CARNS1, CN2, TauT, PAT1 i fosforylowana Na + / K + / ATPaza będą analizowane przy użyciu techniki Western Blot. Aktywność syntazy karnozyny zostanie przeprowadzona przez włączenie kwasu [3H]B-alaniny do odpowiedniego dipeptydu. Analiza obecności i intensywności parestezji zostanie przeprowadzona za pomocą skali zaadaptowanej z LINGJÆRDE i in., 1987. Analiza statystyczna zostanie przeprowadzona w oprogramowaniu RStudio i SAS, przy użyciu modelu mieszanego do porównania zmiennych dotyczących mięśni, osocza i moczu. Stan (B-Ex vs. B-ala) i czas zbierania (czas) będą stałymi czynnikami, podczas gdy badani będą czynnikami losowymi. Zestawy danych zawierające wartości uzyskane tylko w 2 punktach w czasie (np. obszar poniżej krzywej B-alaniny w osoczu) zostaną przeanalizowane przy użyciu testu t-Studenta dla próbek zależnych, jeśli rozkład danych jest normalny. Jeśli rozkład danych nie jest normalny, użyjemy testu znaku Wilcoxona dla par. Normalność rozkładu danych zostanie oceniona jakościowo za pomocą Q-Q Plot. Dla każdego zestawu danych zostaną przetestowane cztery różne struktury macierzy kowariancji. Kryterium Schwarza-Bayesa (najniższa wartość BIC) zostanie użyte do wybrania macierzy, która najlepiej pasuje do każdego zestawu danych. Oparta na hipotezach analiza kontrastowa pojedynczego stopnia swobody przetestuje określone efekty w ramach warunków i pomiędzy nimi. Wielkość efektu Cohena (D) zostanie obliczona dla wszystkich zmiennych. Istotność zostanie przyjęta, jeśli p<0,05.