De invloed van lichaamsbeweging op de opname van bèta-alanine in het weefsel en de snelheid van carnosinesynthese

B-alanine is een niet-essentieel, niet-proteïnogeen aminozuur dat wordt aangetroffen in deficiënte skeletspierconcentraties. Dit tekort maakt B-alanine tot een snelheidsbeperkende factor voor de synthese van carnosine. Suppletie met B-alanine is zeer efficiënt bij het verhogen van het intramusculaire carnosinegehalte, wat leidt tot verbeterde fysieke prestaties, vooral bij oefeningen met hoge intensiteit (HIIE). Het lijkt erop dat lichaamsbeweging op zichzelf het carnosinegehalte kan moduleren; het blijft echter onzeker of fysieke training of trainingsstatus de reacties op suppletie met B-alanine kan beïnvloeden. Dit werk heeft dus tot doel te beoordelen of HIIE de opname van B-alanine door perifere weefsels en, meer specifiek, skeletspieren kan verhogen en de intramusculaire carnosinesynthese kan verhogen. Er zal een cross-over gecompenseerd onderzoek worden uitgevoerd. De vrijwilligers worden beoordeeld op twee voorwaarden: inname van B-alanine + lichaamsbeweging (B-EX) en alleen inname van B-alanine (B-Ala). De dosering is 20 mg · kg-1 (poeder verdund in water). Dit proces wordt verdeeld in twee blokken van zes dagen (donderdag tot en met donderdag - zonder het weekend) met een wash-out van 4-6 weken. In het B-EX blok wordt een HIIE sessie van 20 minuten gehouden. Vervolgens zal suppletie met B-alanine worden toegediend. Onmiddellijk na het sporten, in een rustperiode van 150 minuten, worden veneuze bloedmonsters afgenomen en worden de spierbiopten en urine verzameld vóór en na de test. In de komende drie dagen (donderdag tot en met woensdag) wordt hetzelfde protocol herhaald zonder bloed-, spier- of urinecollecties. Op deze dagen wordt de B-alanine suppletie voor en na het protocol toegediend (B-EX en B-Ala), in dezelfde dosering van 20mg.kg-1. Op de 6e dag (donderdag) wordt het volledige protocol uitgevoerd, inclusief het verzamelen van biologisch materiaal. In het B-Ala-blok zullen dezelfde procedures worden gevolgd voor het B-EX-blok, met de vervanging van de HIIE voor 20 minuten rust zittend op de fietsergometer. De voedingsparameters worden tijdens de twee blokken geëvalueerd door middel van dieetdagboeken in software (Dietbox) met afbeeldingen en de beschrijving van al het vrijwilligersvoedsel van de dag. Vastgesteld zal worden dat tijdens de blokken (B-EX en B-ala) de inname van Beta-alanine via de voeding beperkt is tot 300mg per dag. De analyse van de bepaling van spier-B-alanine, plasma en urine, spiercarnosine zal worden uitgevoerd door middel van HPLC-ESI+-MS/MS. De genexpressie van carnosine-gerelateerde enzymen en transporters zal worden geanalyseerd met behulp van de real-time PCR-techniek. De enzymen CARNS1, CN2, TauT, PAT1 en gefosforyleerd Na+/K+/ATPase zullen worden geanalyseerd met behulp van de Western Blot-techniek. Carnosinesynthase-activiteit zal worden uitgevoerd door [3H]B-alaninezuur in het overeenkomstige dipeptide op te nemen. De analyse van de aanwezigheid en intensiteit van de paresthesie zal plaatsvinden via een schaal aangepast aan LINGJÆRDE et al., 1987. De statistische analyse wordt uitgevoerd in de RStudio-software en SAS-software, waarbij het gemengde model wordt gebruikt om spier-, plasma- en urinevariabelen te vergelijken. Conditie (B-Ex vs. B-ala) en tijdstip van verzameling (tijd) zijn vaste factoren, terwijl de onderwerpen willekeurige factoren zijn. Datasets die waarden bevatten die op slechts 2 tijdstippen zijn verkregen (bijv. oppervlakte onder de plasma-B-alaninecurve) zullen worden geanalyseerd met behulp van Student's t-test voor afhankelijke steekproeven als de gegevensverdeling normaal is. Als de gegevensverdeling niet normaal is, gebruiken we de Wilcoxon-tekentest voor paren. De normaliteit van de gegevensdistributie zal kwalitatief worden beoordeeld met behulp van Q-Q Plot. Voor elke dataset zullen vier verschillende covariantiematrixstructuren worden getest. Het Schwarz-Bayesiaanse criterium (laagste BIC-waarde) zal worden gebruikt om de matrix te selecteren die het beste bij elke dataset past. Hypothese-geleide contrastanalyse van een enkele vrijheidsgraad zal specifieke effecten binnen en tussen condities testen. De grootte van het Cohen-effect (D) wordt berekend voor alle variabelen. Significantie wordt geaccepteerd als p<0,05.