Träningens inverkan på vävnadsbeta-alaninupptag och karnosinsynteshastigheter

B-alanin är en icke-essentiell, icke-proteinogen aminosyra som finns i bristfälliga skelettmuskelkoncentrationer. Denna brist gör B-alanin till en hastighetsbegränsande faktor för karnosinsyntes. B-alanintillskott är mycket effektivt för att öka intramuskulärt karnosininnehåll, vilket leder till förbättrad fysisk prestation, särskilt vid högintensiva övningar (HIIE). Det verkar som om träning i sig kan modulera karnosinhalten; det är dock fortfarande osäkert om fysisk träning eller träningsstatus kan påverka svaren på B-alanintillskott. Detta arbete syftar alltså till att bedöma om HIIE kan öka B-alaninupptaget i perifera vävnader och mer specifikt skelettmuskulaturen och öka den intramuskulära karnosinsyntesen. En crossover motviktsstudie kommer att genomföras. Volontärerna kommer att utvärderas under två förhållanden: intag av B-alanin + träning (B-EX) och endast B-alanin intag (B-Ala). Doseringen kommer att vara 20 mg · kg-1 (pulver utspätt i vatten). Denna process kommer att delas upp i två block om sex dagar (torsdag till torsdag - utan helg) med en 4-6 veckors tvättning. I B-EX-blocket kommer en 20-minuters HIIE-session att hållas. Därefter kommer B-alanintillskott att administreras. Omedelbart efter träningen, i 150 minuters vila, kommer insamlingar av venösa blodprover att utföras, och muskelbiopsi och urininsamling kommer att samlas in före och efter test. Under de kommande tre dagarna (torsdag till onsdag) kommer samma protokoll att upprepas utan blod-, muskel- eller urinsamlingar. Dessa dagar kommer B-alanin-tillskottet att administreras före och efter protokollet (B-EX och B-Ala), i samma dos på 20mg.kg-1. Den 6:e dagen (torsdag) kommer det fullständiga protokollet att genomföras, inklusive insamling av biologiskt material. I B-Ala-blocket kommer samma procedurer att användas för B-EX-blocket, med byte av HIIE för 20 minuters vila sittande på cykelergometern. Näringsparametrarna kommer att utvärderas under de två blocken av kostdagböcker i mjukvara (Dietbox) som inkluderar bilder och beskrivningen av all volontärmat under dagen. Det kommer att fastställas att under blocken (B-EX och B-ala) är beta-alaninintaget genom mat begränsat till 300 mg per dag. Analysen av bestämning av muskel B-alanin, plasma och urin, muskelkarnosin kommer att utföras med HPLC-ESI + -MS / MS. Genuttrycket av karnosinrelaterade enzymer och transportörer kommer att analyseras med hjälp av realtids-PCR-teknik. Enzymerna CARNS1, CN2, TauT, PAT1 och fosforylerad Na+/K+/ATPas kommer att analyseras med Western Blot-tekniken. Karnosinsyntasaktivitet kommer att utföras genom att införliva [3H] B-alaninsyra i motsvarande dipeptid. Analysen av parestesiers närvaro och intensitet kommer att ske genom en skala anpassad från LINGJÆRDE et al., 1987. Den statistiska analysen kommer att utföras i RStudio-programvaran och SAS-mjukvaran, med hjälp av den blandade modellen för att jämföra muskel-, plasma- och urinvariabler. Tillstånd (B-Ex vs. B-ala) och tidpunkt för insamling (tid) kommer att vara fasta faktorer, medan försökspersonerna kommer att vara slumpmässiga faktorer. Datauppsättningar som innehåller värden erhållna vid endast 2 tidpunkter (t.ex. area under plasma B-alaninkurvan) kommer att analyseras med Students t-test för beroende prover om datafördelningen är normal. Om datafördelningen inte är normal kommer vi att använda Wilcoxons teckentest för par. Normaliteten för datadistributionen kommer att bedömas kvalitativt med Q-Q Plot. Fyra olika kovariansmatrisstrukturer kommer att testas för varje datamängd. Det Schwarz-Bayesianska kriteriet (lägsta BIC-värdet) kommer att användas för att välja den matris som bäst passar varje datamängd. Hypotesstyrd kontrastanalys av en enda frihetsgrad kommer att testa specifika effekter inom och mellan förhållanden. Storleken på Cohen-effekten (D) kommer att beräknas för alla variabler. Signifikans kommer att accepteras om p<0,05.