Påvirkningen av trening på vevsbeta-alaninopptak og karnosinsyntesehastigheter

B-alanin er en ikke-essensiell, ikke-proteinogen aminosyre som finnes i mangelfulle skjelettmuskelkonsentrasjoner. Denne mangelen gjør B-alanin til en hastighetsbegrensende faktor for karnosinsyntese. B-alanintilskudd er svært effektivt for å øke intramuskulært karnosininnhold, noe som fører til forbedret fysisk ytelse, spesielt ved høyintensive øvelser (HIIE). Det ser ut til at trening i seg selv kan modulere karnosininnholdet; Det er imidlertid fortsatt usikkert om fysisk trening eller treningsstatus kan påvirke responsen på B-alanin-tilskudd. Dette arbeidet tar således sikte på å vurdere om HIIE kan øke B-alaninopptaket i perifert vev og mer spesifikt skjelettmuskulatur og øke intramuskulær karnosinsyntese. En crossover-motbalansert studie vil bli utført. De frivillige vil bli evaluert under to forhold: inntak av B-alanin + trening (B-EX) og kun B-alanin inntak (B-Ala). Doseringen vil være 20 mg · kg-1 (pulver fortynnet i vann). Denne prosessen vil bli delt inn i to blokker på seks dager (torsdag til torsdag - uten helg) med 4-6 ukers utvasking. I B-EX-blokken vil det bli holdt en 20-minutters HIIE-økt. Deretter vil B-alanin-tilskudd gis. Umiddelbart etter trening, i en 150-minutters hvile, vil det utføres innsamlinger av venøse blodprøver, og muskelbiopsi og urinsamling vil bli tatt før- og etterprøve. I løpet av de neste tre dagene (torsdag til onsdag) vil den samme protokollen gjentas uten blod-, muskel- eller urinsamlinger. På disse dagene vil B-alanin-tilskuddet administreres før og etter protokollen (B-EX og B-Ala), i samme dose på 20mg.kg-1. Den 6. dagen (torsdag) vil den fullstendige protokollen bli utført, inkludert innsamling av biologisk materiale. I B-Ala-blokken vil de samme prosedyrene bli tatt i bruk for B-EX-blokken, med utskifting av HIIE for 20 minutters hvile sittende på sykkelergometeret. Ernæringsparametrene vil bli evaluert i løpet av de to blokkene av kostholdsdagbøker i programvare (Dietbox) som inkluderer bilder og beskrivelse av all frivillig mat i løpet av dagen. Det vil bli bestemt at under blokkeringene (B-EX og B-ala), er Beta-alanininntaket i mat begrenset til 300 mg per dag. Analysen av bestemmelsen av muskel B-alanin, plasma og urin, muskel karnosin vil bli utført av HPLC-ESI + -MS / MS. Genuttrykket av karnosin-relaterte enzymer og transportører vil bli analysert ved bruk av sanntids PCR-teknikk. Enzymene CARNS1, CN2, TauT, PAT1 og fosforylert Na + / K + / ATPase vil bli analysert med Western Blot-teknikken. Karnosinsyntaseaktivitet vil bli utført ved å inkorporere [3H] B-alaninsyre i det tilsvarende dipeptidet. Analysen av parestesiens tilstedeværelse og intensitet vil skje gjennom en skala tilpasset fra LINGJÆRDE et al., 1987. Den statistiske analysen vil bli utført i RStudio-programvaren og SAS-programvaren, ved å bruke den blandede modellen for å sammenligne muskel-, plasma- og urinvariabler. Tilstand (B-Ex vs. B-ala) og tidspunkt for innsamling (tidspunkt) vil være faste faktorer, mens forsøkspersonene vil være tilfeldige faktorer. Datasett som inneholder verdier oppnådd på bare 2 tidspunkter (f.eks. område under plasma B-alanin-kurven) vil bli analysert ved å bruke Students t-test for avhengige prøver hvis datafordelingen er normal. Hvis datafordelingen ikke er normal, vil vi bruke Wilcoxon-tegntesten for par. Normaliteten til datadistribusjon vil bli vurdert kvalitativt ved hjelp av Q-Q Plot. Fire forskjellige kovariansmatrisestrukturer vil bli testet for hvert datasett. Det Schwarz-Bayesianske kriteriet (laveste BIC-verdi) vil bli brukt for å velge matrisen som passer best til hvert datasett. Hypoteseveiledet kontrastanalyse av en enkelt frihetsgrad vil teste spesifikke effekter innenfor og mellom forhold. Størrelsen på Cohen-effekten (D) vil bli beregnet for alle variabler. Signifikans vil bli akseptert hvis p<0,05.