組織のベータアラニン取り込みとカルノシン合成速度に対する運動の影響

B-アラニンは、欠乏した骨格筋濃度に見られる非必須、非タンパク質生成性アミノ酸です。 この欠乏により、B-アラニンはカルノシン合成の律速因子となります。 B-アラニンの補給は、筋肉内のカルノシン含有量を増加させるのに非常に効果的で、特に高強度の運動（HIIE）における身体パフォーマンスの向上につながります。 運動自体がカルノシン含有量を調節できるようです。しかし、身体的トレーニングやトレーニング状況が B-アラニン補給の反応に影響を与えるかどうかは依然として不明です。 したがって、この研究は、HIIE が末梢組織、より具体的には骨格筋による B-アラニンの取り込みを増加させ、筋肉内カルノシン合成を増加させることができるかどうかを評価することを目的としています。 クロスオーバーのカウンターバランスの研究が行われます。 ボランティアは、B-アラニンの摂取 + 運動 (B-EX) と B-アラニンの摂取のみ (B-Ala) の 2 つの条件で評価されます。 投与量は20mg・kg-1（粉末を水で希釈）となります。 このプロセスは、4 ～ 6 週間のウォッシュアウトを含む 6 日間 (木曜日から木曜日 - 週末なし) の 2 つのブロックに分割されます。 B-EXブロックでは20分間のHIIEセッションが開催されます。 次に、B-アラニンの補給が行われます。 運動直後、150 分間の安静時に静脈血サンプルの採取が行われ、検査前と検査後に筋生検と尿の採取が行われます。 次の 3 日間 (木曜から水曜) に、血液、筋肉、尿の採取を行わずに、この同じプロトコルが繰り返されます。 これらの日には、プロトコール (B-EX および B-Ala) の前後に、同じ用量 20mg.kg-1 の B-アラニン サプリメントが投与されます。 6 日目 (木曜日) に、生物学的材料の収集を含む完全なプロトコルが実行されます。 B-Ala ブロックでは、B-EX ブロックと同じ手順が採用され、HIIE を交換してサイクル エルゴメーターに座って 20 分間休息します。 栄養パラメータは、画像とその日のすべてのボランティアの食事の説明を含むソフトウェア (Dietbox) の食事日記によって 2 つのブロック中に評価されます。 ブロック（B-EX および B-ala）中、食物によるベータアラニンの摂取は 1 日あたり 300mg に制限されることが決定されます。 筋肉 B-アラニン、血漿、尿、筋肉カルノシンの測定の分析は、HPLC-ESI + -MS / MS によって実行されます。 カルノシン関連酵素およびトランスポーターの遺伝子発現は、リアルタイム PCR 技術を使用して解析されます。 酵素 CARNS1、CN2、TauT、PAT1、およびリン酸化 Na + /K + /ATPase は、ウェスタンブロット技術を使用して分析されます。 カルノシン シンターゼ活性は、[3H] B-アラニン酸を対応するジペプチドに組み込むことによって実行されます。 感覚異常の存在と強度の分析は、LINGJÆRDE et al., 1987 から適応されたスケールによって行われます。 統計分析は、RStudio ソフトウェアと SAS ソフトウェアで実行され、混合モデルを使用して筋肉、血漿、尿の変数を比較します。 条件（B-Ex vs. B-ala）と採取時期（時間）は固定因子となり、被験者はランダム因子となります。 2 つの時点のみで取得された値を含むデータセット (血漿 B-アラニン曲線の下の領域など) は、データ分布が正規であれば、依存サンプルのスチューデントの t 検定を使用して分析されます。 データ分布が正規でない場合は、ペアのウィルコクソン符号検定を使用します。 データ分布の正規性は、Q-Q プロットを使用して定性的に評価されます。 4 つの異なる共分散行列構造がデータセットごとにテストされます。 シュワルツ ベイジアン基準 (最小 BIC 値) を使用して、各データ セットに最もよく適合する行列が選択されます。 単一自由度の仮説に基づくコントラスト分析では、条件内および条件間の特定の効果をテストします。 コーエン効果のサイズ (D) はすべての変数に対して計算されます。 p<0.05の場合、有意性が認められます。