La influencia del ejercicio en la absorción tisular de beta-alanina y las tasas de síntesis de carnosina

La B-alanina es un aminoácido no esencial y no proteinogénico que se encuentra en concentraciones deficientes en el músculo esquelético. Esta deficiencia hace que la B-alanina sea un factor limitante de la síntesis de carnosina. La suplementación con b-alanina es altamente eficaz para aumentar el contenido de carnosina intramuscular, lo que conduce a un mejor rendimiento físico, especialmente en ejercicios de alta intensidad (HIIE). Parece que el ejercicio per se puede modular el contenido de carnosina; sin embargo, sigue sin estar claro si el entrenamiento físico o el estado de entrenamiento pueden influir en las respuestas a la suplementación con b-alanina. Por lo tanto, este trabajo tiene como objetivo evaluar si HIIE puede aumentar la absorción de B-alanina por los tejidos periféricos y, más específicamente, el músculo esquelético y aumentar la síntesis de carnosina intramuscular. Se llevará a cabo un estudio cruzado contrabalanceado. Los voluntarios serán evaluados en dos condiciones: ingesta de B-alanina + ejercicio (B-EX) y solo ingesta de B-alanina (B-Ala). La dosificación será de 20 mg · kg-1 (polvo diluido en agua). Este proceso se dividirá en dos bloques de seis días (de jueves a jueves, sin el fin de semana) con un lavado de 4 a 6 semanas. En el bloque B-EX se realizará una sesión de HIIE de 20 minutos. A continuación, se administrará la suplementación con B-alanina. Inmediatamente después del ejercicio, en un descanso de 150 minutos, se realizarán tomas de muestras de sangre venosa, y se tomará la biopsia muscular y la toma de orina pretest y postest. En los próximos tres días (jueves a miércoles) se repetirá este mismo protocolo sin colectas de sangre, músculo u orina. En estos días se administrará la suplementación de B-alanina antes y después del protocolo (B-EX y B-Ala), en la misma dosis de 20mg.kg-1. El día 6 (jueves) se realizará el protocolo completo, incluyendo la recolección de material biológico. En el bloque B-Ala se adoptarán los mismos procedimientos para el bloque B-EX, con la sustitución del HIIE por 20 minutos de descanso sentado en el cicloergómetro. Los parámetros nutricionales serán evaluados durante los dos bloques mediante diarios dietéticos en software (Dietbox) que incluye imágenes y la descripción de todos los alimentos voluntarios del día. Se determinará que durante los bloques (B-EX y B-ala), la ingesta de Beta-alanina por alimentos se limite a 300 mg por día. El análisis de la determinación de B-alanina muscular, plasma y orina, carnosina muscular se realizará mediante HPLC-ESI+-MS/MS. La expresión génica de enzimas y transportadores relacionados con la carnosina se analizará mediante la técnica de PCR en tiempo real. Las enzimas CARNS1, CN2, TauT, PAT1, y Na+/K+/ATPasa fosforiladas serán analizadas mediante la técnica de Western Blot. La actividad de carnosina sintasa se llevará a cabo incorporando ácido [3H] B-alanina en el dipéptido correspondiente. El análisis de la presencia e intensidad de las parestesias se hará mediante una escala adaptada de LINGJÆRDE et al., 1987. El análisis estadístico se realizará en el software RStudio y el software SAS, utilizando el modelo mixto para comparar variables musculares, plasmáticas y urinarias. La condición (B-Ex vs. B-ala) y el tiempo de recolección (tiempo) serán factores fijos, mientras que los sujetos serán factores aleatorios. Los conjuntos de datos que contienen valores obtenidos en solo 2 puntos en el tiempo (p. ej., el área por debajo de la curva de B-alanina en plasma) se analizarán mediante la prueba t de Student para muestras dependientes si la distribución de datos es normal. Si la distribución de datos no es normal, utilizaremos la prueba del signo de Wilcoxon para pares. La normalidad de la distribución de datos se evaluará cualitativamente utilizando Q-Q Plot. Se probarán cuatro estructuras de matriz de covarianza diferentes para cada conjunto de datos. Se utilizará el criterio de Schwarz-Bayesian (valor BIC más bajo) para seleccionar la matriz que mejor se ajuste a cada conjunto de datos. El análisis de contraste guiado por hipótesis de un solo grado de libertad probará efectos específicos dentro y entre condiciones. Se calculará el tamaño del efecto Cohen (D) para todas las variables. Se aceptará significación si p<0,05.