Harjoituksen vaikutus kudosten beeta-alaniinin imeytymiseen ja karnosiinin synteesiin

B-alaniini on ei-välttämätön, ei-proteinogeeninen aminohappo, jota löytyy puutteellisista luustolihaspitoisuuksista. Tämä puute tekee B-alaniinista karnosiinin synteesin nopeutta rajoittavan tekijän. B-alaniinilisä on erittäin tehokas lihaksensisäisen karnosiinipitoisuuden lisäämisessä, mikä parantaa fyysistä suorituskykyä, erityisesti korkean intensiteetin harjoituksissa (HIIE). Näyttää siltä, ​​että liikunta sinänsä voi muuttaa karnosiinipitoisuutta; on kuitenkin edelleen epävarmaa, voiko fyysinen koulutus tai harjoittelun tila vaikuttaa B-alaniinin lisäravinteisiin. Näin ollen tämän työn tavoitteena on arvioida, voiko HIIE lisätä B-alaniinin ottoa ääreiskudoksissa ja tarkemmin luustolihaksessa ja lisätä lihaksensisäistä karnosiinin synteesiä. Tehdään ristikkäinen vastapainotutkimus. Vapaaehtoiset arvioidaan kahdessa tilanteessa: B-alaniinin saanti + harjoitus (B-EX) ja vain B-alaniinin saanti (B-Ala). Annostus on 20 mg · kg-1 (jauhe laimennettuna veteen). Tämä prosessi jaetaan kahteen kuuden päivän lohkoon (torstaista torstaihin - ilman viikonloppua) 4-6 viikon huuhtoutumisella. B-EX-lohkossa pidetään 20 minuutin HIIE-istunto. Seuraavaksi annetaan B-alaniinilisä. Välittömästi harjoituksen jälkeen, 150 minuutin levon aikana, otetaan laskimoverinäytteet ja kerätään lihasbiopsia ja virtsan keräys ennen testiä ja testin jälkeen. Seuraavien kolmen päivän aikana (torstaista keskiviikkoon) tämä sama protokolla toistetaan ilman veren, lihaksen tai virtsan keräämistä. Näinä päivinä B-alaniinilisä annetaan ennen protokollaa ja sen jälkeen (B-EX ja B-Ala), samassa annoksessa 20 mg.kg-1. 6. päivänä (torstai) suoritetaan täydellinen protokolla, mukaan lukien biologisten materiaalien kerääminen. B-Ala-lohkossa samat menettelyt otetaan käyttöön B-EX-lohkossa, jolloin HIIE korvataan 20 minuutin lepoa varten pyöräergometrin päällä. Ravitsemusparametreja arvioidaan kahden lohkon aikana ruokavaliopäiväkirjoilla ohjelmistossa (Dietbox), joka sisältää kuvia ja kuvauksen kaikista päivän vapaaehtoisruoista. Selvitetään, että lohkojen (B-EX ja B-ala) aikana beeta-alaniinin saanti ruuan kautta rajoitetaan 300 mg:aan päivässä. Lihaksen B-alaniinin, plasman ja virtsan sekä lihaskarnosiinin määrityksen analyysi suoritetaan HPLC-ESI + -MS/MS:llä. Karnosiiniin liittyvien entsyymien ja kuljettajien geeniekspressiota analysoidaan reaaliaikaisella PCR-tekniikalla. Entsyymit CARNS1, CN2, TauT, PAT1 ja fosforyloitu Na+/K+/ATPaasi analysoidaan Western Blot -tekniikalla. Karnosiinisyntaasiaktiivisuus suoritetaan sisällyttämällä [3H]B-alaniinihappo vastaavaan dipeptidiin. Parestesian esiintyminen ja voimakkuus analysoidaan asteikolla, joka on mukautettu julkaisusta LINGJÆRDE et al., 1987. Tilastollinen analyysi suoritetaan RStudio- ja SAS-ohjelmistolla käyttämällä sekamallia vertaamaan lihaksen, plasman ja virtsan muuttujia. Kunto (B-Ex vs. B-ala) ja keräysaika (aika) ovat kiinteitä tekijöitä, kun taas kohteet ovat satunnaisia ​​tekijöitä. Datasarjat, jotka sisältävät vain 2 ajankohdassa saadut arvot (esim. alue plasman B-alaniinikäyrän alapuolella), analysoidaan Studentin t-testillä riippuville näytteille, jos datan jakautuminen on normaali. Jos tiedon jakauma ei ole normaali, käytämme Wilcoxonin merkkitestiä pareille. Tietojen jakautumisen normaalillisuus arvioidaan kvalitatiivisesti Q-Q Plot -käyrällä. Jokaiselle tietojoukolle testataan neljä erilaista kovarianssimatriisirakennetta. Schwarz-Bayesian kriteeriä (pienin BIC-arvo) käytetään valitsemaan matriisi, joka sopii parhaiten kullekin tietojoukolle. Yhden vapausasteen hypoteesiohjattu kontrastianalyysi testaa erityisiä vaikutuksia olosuhteissa ja niiden välillä. Cohen-ilmiön (D) koko lasketaan kaikille muuttujille. Merkitys hyväksytään, jos p < 0,05.