Beeinflusst die Kryofixierung von Hautproben die Qualität der nachfolgenden formalinfixierten, in Paraffin eingebetteten H- und E-Histologie?

Die Herstellung von mit Formalin fixiertem, in Paraffin eingebettetem (FFPE), Hämatoxylin und Eosin (H&E) gefärbten Dauerschnitten aus zuvor kryofixiertem Gewebe ist eine gängige Praxis zur Bestätigung der Diagnose der Histologie von Gefrierschnitten. In der Dermatologie kann diese Praxis zur Untersuchung von Mohs-Schichten und deren Debulk sowie zur routinemäßigen Biopsie von Nicht-Melanom-Hautkrebs (NMSC) nach der ersten histologischen Diagnose mit Gefrierschnitten eingesetzt werden. Obwohl das Einfrieren von Gewebe zu histologischen Artefakten führen kann, gibt es keine Studien, die dokumentieren, ob dies speziell bei kryofixierten Geweben auftritt, die anschließend für die permanente FFPE-H&E-Histologie aufgetaut werden. Der Zweck unserer Studie besteht darin, festzustellen, ob der Gefrier-Tau-Prozess, der zur Erzeugung permanenter Schnitte nach der Kryofixierung verwendet wird, zu signifikant erkennbaren histologischen Unterschieden im Vergleich zu permanenten Schnitten führt, die zuvor nicht kryofixiert wurden. Prospektiv werden 30 Debulk-Proben von Basalzell- und Plattenepithelkarzinomen gesammelt. Jede Probe wird geteilt, sodass die Hälfte als kryofixierte Dauerproben und die andere Hälfte als nicht kryofixierte Dauerproben verarbeitet wird. Der Prüfer zeigt jedes Objektträger in zufälliger Reihenfolge einer Gruppe von vier verblindeten Teilnehmern (zwei Dermatopathologen und zwei Mohs-Chirurgen). Jeder Teilnehmer muss zunächst die Gesamtqualität der Histologie bewerten. Anschließend bewertet jeder Teilnehmer jedes Objektträger hinsichtlich der Qualität der Zellmorphologie, der Kernmorphologie, der Farbe und des Kontrasts der Flecken, der Unversehrtheit der Probe und anderer verschiedener Artefakte. Diese Daten werden dann auf statistische Signifikanz analysiert.