Nahrungscholesterin und Entzündung des Fettgewebes

Es wird eine auf der Wake Forest School of Medicine Clinical Research Unit basierende Pilotstudie durchgeführt, in der Probanden rekrutiert werden, die sich am Wake Forest Baptist Medical Center einer elektiven intraabdominalen Operation unterziehen sollen (z. B. Cholezystektomie, Nissen-Fundoplikatio, Hernienreparatur usw.). . Den Probanden wird nach dem Zufallsprinzip und blind zugewiesen, dass sie 3 Wochen vor der Operation täglich Leckereien (Kekse, Brownies oder Muffins) erhalten, die entweder kein zugesetztes Cholesterin (Kontrolle) oder 1 g Cholesterin/Tag (~0,4 mg/Kcal Cholesterin) enthalten. Als Dauer der Cholesterin-Supplementierung wurden drei Wochen gewählt, da dies innerhalb der Dauer von Studien zum menschlichen Eierkonsum liegt, in denen signifikante Erhöhungen der LDL-Plasmakonzentrationen auftraten. Eine Blutprobe wird von jedem Teilnehmer zu Studienbeginn vor Beginn der Nahrungsergänzungsperiode und nach 3 Wochen einer Cholesterin-Ergänzung mit 0 oder 1 g/Tag zum Zeitpunkt der geplanten Operation entnommen. Die Blutproben werden zur Messung des Lipidprofils, zur Ex-vivo-Monozyten-Chemotaxis und zur Monozyten-RNA-Isolierung verwendet. Während der Operation werden subkutane Fettgewebeproben aus der Bauchdecke und mesenteriales (viszerales) Fettgewebe entnommen. Aliquots von Fettgewebe werden über Nacht für die Histologie und Messung der Adipozytengrößenverteilung und CD68-Immunfärbung fixiert, schockgefroren und zur Cholesterinquantifizierung durch Gasflüssigkeitschromatographie gelagert, extrahiert, um RNA und Protein für quantitative Echtzeit-PCR und Immunoblotting von Entzündungsgenen und -proteinen zu isolieren Expression und Kollagenaseverdauung zur Isolierung von Adipozyten und Makrophagen der Stroma-Gefäßzellfraktion, die zur Extraktion und Speicherung von RNA für zukünftige Transkriptomanalysen verwendet werden.