Fortschrittliche Therapien für Lebermetastasen (LiMeT)

Hintergrund und Begründung – CRC und PDAC sind die zweit- bzw. vierthäufigste Todesursache durch Krebs. Patienten, die von diesen Krebsarten betroffen sind, sterben an Leber-MTS. Herkömmliche Therapien sind bei beiden Primärtumoren wirksam, versagen jedoch bei metastasierender Erkrankung. Die Wirksamkeit der Immuntherapie durch Immun-Checkpoint-Blockade und adoptive Zelltherapie mit tumorspezifischen T-Zellen ist bei MTS aus soliden Tumoren aufgrund lokaler immunsuppressiver Mechanismen nur teilweise oder vorübergehend. Dies ist besonders relevant für hepatisches MTS, bei dem ein natürliches tolerogenes Milieu die durch Krebszellen und infiltrierende Immunzellen wie tumorassoziierte Makrophagen (TAMs), myeloische Suppressorzellen (MDSCs), Neutrophile und regulatorische T oder B-Zellen.

In dieser Hinsicht deuten Hinweise darauf hin, dass das Fortschreiten von primärem oder metastasiertem CRC mit einer schwachen Immuninfiltration und Entzündung korreliert. Darüber hinaus unterstützen unsere veröffentlichten Ergebnisse bei primärem PDAC eine Korrelation zwischen Tumorprogression und einer starken entzündungshemmenden/immunsuppressiven Typ-2-Signatur. Es ist bekannt, dass die Wirksamkeit der Chemotherapie auch auf der Reaktivierung und/oder Repolarisation von auf den Tumor gerichteten Immunantworten beruht. Eine präoperative Chemotherapie kann vorteilhafte Wirkungen und potenziell zielgerichtete Veränderungen im Immunprofil von CRC oder PDAC MTS hervorrufen.

Die Forscher vermuten, dass eine Kombination aus: i) direkter Krebszellabtötung durch adoptiv übertragene tumorspezifische T-Zellen und ii) indirekter Kontrolle der Tumorprogression durch Neuprogrammierung der Tumormikroumgebung hepatische MTS von CRC und PDAC kontrollieren würde.

Daher schlagen die Forscher eine gründliche Charakterisierung des metastatischen Milieus bei diesen beiden Krebsarten vor, um auf der Grundlage von Ähnlichkeiten und Unterschieden innovative ATMPs rational zu gestalten.

Aus biologischen Proben gewonnene experimentelle Ergebnisse werden korreliert: i) mit klinischen Daten von Patienten zum Zeitpunkt der Aufnahme und während ihrer Nachsorge; und ii) für eine Untergruppe von Patienten mit biochemischen und immunologischen Daten aus peripheren Blutproben, die routinemäßig als Teil ihrer klinischen Nachsorge entnommen werden, mit dem zusätzlichen Ziel, neue biologische Parameter und/oder Signaturen zu identifizieren, um die Stratifizierung von Patienten zu unterstützen und die Anpassung von Behandlungen.

Ziele - Die Ermittler wollen Folgendes untersuchen:

1. die Tumormutationslast und die Zusammensetzung der metastatischen Tumormikroumgebung in der Leber;
2. die Hemmungswege, die die Immunität bei Leber-MTS einschränken;
3. die antigene und klonale Breite der Anti-Tumor-T-Zell-Antworten;
4. die räumlich-zeitlichen Variationen von Effektor- und regulatorischen Immunzellen während der Therapie;
5. die Eigenschaften von Tumorzellen und ihrer Mikroumgebung in Leber-MTS versus (vs) Primärtumor;
6. die Längsvariationen klinischer Parameter sowie aus dem Blut stammender biologischer und immunologischer Marker während der medizinischen Nachsorge von Patienten.
7. Darüber hinaus wollen sie Patientenproben sammeln und biobanken, um die Validierung und Auswahl der neuen ATMPs zu unterstützen, die von den anderen Partnern des Translationsprogramms entwickelt wurden.

Die Hauptziele werden sein:

1. um immunsuppressive/Erschöpfungswege zu identifizieren
2. Entwicklung einer Bibliothek tumorspezifischer TCR (N≥5/Tumortyp) und Identifizierung neuer CAR-Targets (N≥1/Tumortyp) bei CRC- und PDAC-MTS

Studiendesign – Dieses klinische Protokoll zielt darauf ab, MTS-Tumorzellen und ihre Mikroumgebung umfassend zu charakterisieren, einschließlich möglicherweise informativer dynamischer Modifikationen von Pro-Tumor- zu Anti-Tumor-Profilen, die einer Chemotherapie folgen können, die präoperativ (neo-adjuvant) verabreicht wird Bruchteil der Patienten. PDAC- und CRC-MTS-Patienten werden daher entweder durch Querschnitts- oder Längsschnittuntersuchungen an Chemotherapie-naiven vs. -behandelten Patienten charakterisiert.

Darüber hinaus zielen die Forscher darauf ab, hepatisches MTS mit Primärtumor zu vergleichen, um dynamische qualitative Veränderungen in Krebszellen, Immuninfiltraten und nicht-immuner Mikroumgebung hervorzuheben, die das Fortschreiten der Krankheit in Richtung Metastasierung erleichtern könnten. Diese Modifikationen können ein Zeitfenster für die optimale Anwendung unserer ATMPs bieten. Zu diesem Zweck werden primäre nicht-metastasierende PDAC-Patienten, die sich einer chirurgischen Resektion unterziehen, in diese Studie aufgenommen und zur Überwachung der Entwicklung von metachronem Leber-MTS nachuntersucht, die, wann immer möglich, charakterisiert und mit ihren zuvor übereinstimmenden/nicht übereinstimmenden Patienten verglichen werden gesammelte, primäre Tumorproben. Periphere Blutproben zum Zeitpunkt der Leber-MTS-Diagnose werden ebenfalls gesammelt und analysiert. Außerdem werden bei CRC-MTS-Patienten, die sich einer synchronen Resektion von primärem CRC und hepatischem MTS unterziehen, Vergleichsanalysen an Tumoren von beiden Stellen durchgeführt, was eine Intra- und Inter-Patienten-Profilierung beider Tumornischen ermöglicht.

Darüber hinaus werden Ergebnisse aus mehrstufigen Forschungsanalysen mit klinischen Daten korreliert, die von allen Patienten zum Zeitpunkt der Aufnahme in die Studie und während ihrer klinischen Nachsorge gesammelt wurden, wann immer möglich für bis zu 2 Jahre, unter Berücksichtigung von PDAC-Patienten, und 3 Jahren , unter Berücksichtigung von CRC.

Insbesondere bei Patienten mit metastasiertem CRC wird die klinische Nachsorge mit der gleichzeitigen Entnahme von Blutproben zu seriellen Zeitpunkten verbunden sein, die prospektiv für weitere Analysen in Biobanken aufbewahrt werden, die darauf abzielen: i) biologische und immunologische Korrelate des klinischen Status des Patienten zu untersuchen; ii) Bewertung von Schlüsseldiskriminanten, die zuvor in Blutproben identifiziert wurden, die zum Zeitpunkt der Leber-MTS-Operation analysiert wurden, um als frühe Prädiktoren für Leberprogression oder -rezidiv und möglicherweise als Indikatoren für eine therapeutische Stratifizierung zu dienen.

Die Ermittler erwarten Gewebe-/Blutproben und klinische Daten von mindestens:

• 200 Patienten mit metastasiertem CRC (entweder synchron oder metachron);
• 150 nicht metastasierte PDAC-Patienten;
• 75 synchrone PDAC-MTS-Patienten und etwa 20 metachrone PDAC-MTS-Patienten, wobei letztere ursprünglich als primäre nicht metastasierte Patienten für die Längsschnittstudie aufgenommen wurden, für insgesamt 95 metastasierte PDAC-Patienten;
• 30 gesunde Probanden als Negativkontrollen.

Im Rahmen der diagnostischen und therapeutischen Standardversorgung dieser Patienten werden verschiedene biologische Proben (peripheres Blut, primäres und/oder metastasiertes Tumorgewebe, Pfortaderblut) entnommen und teils direkt analysiert und teils für weitere Studien biobankiert . Parallel dazu werden klinische Daten von Patienten zum Zeitpunkt der Aufnahme in die Studie und, wann immer möglich, für einen Nachbeobachtungszeitraum von bis zu 2 Jahren bei PDAC-Patienten und 3 Jahren bei CRC-Patienten erhoben.

Die statistische Analyse der gesammelten Daten wird während der gesamten klinischen Studie durchgeführt, beginnend 6 Monate nach der Aufnahme des ersten Patienten bis 6 Monate nach dem Ende der Nachsorge der Patienten für insgesamt 7 Jahre. Das Studium dauert 7 Jahre.

Im Rahmen der diagnostischen und therapeutischen Standardversorgung dieser Patienten werden verschiedene biologische Proben (peripheres Blut, primäres und/oder metastasiertes Tumorgewebe, Pfortaderblut) entnommen und teils direkt analysiert und teils für weitere Studien biobankiert . Parallel dazu werden klinische Daten von Patienten seit dem Zeitpunkt der Aufnahme in die Studie für einen Nachbeobachtungszeitraum von 2 Jahren für PDAC-Patienten und von 3 Jahren für CRC-Patienten gesammelt.

Die statistische Analyse der gesammelten klinischen und experimentellen Daten wird während der gesamten Dauer der klinischen Studie durchgeführt, beginnend 6 Monate nach der Aufnahme des ersten Patienten bis zum Ende der Nachsorge der Patienten für insgesamt 7 Jahre. Das Studium dauert 7 Jahre.

Die Forschungsaktivitäten werden in 6 Arbeitspakete (WPs) organisiert und integriert:

1. Sammlung und Biobanking des Materials von Patienten mit CRC und PDAC MTS in der Leber und mit primärem, nicht metastasiertem, resektablem PDAC.
2. Definition der Tumormutationslast, des epigenetischen und Genexpressionsprofils der metastasierten CRC- und PDAC-Leber auf Bulk- und Einzelzellebene.
3. Bewertung der molekularen und zellulären Zusammensetzung von CRC und, wenn möglich, PDAC-Leber-MTS durch räumliche Transkriptomik-Technologien (NICHE-seq und Visium).
4. Charakterisierung der Immunlandschaften von CRC und, falls möglich, PDAC-Leber-MTS durch hochdimensionale Durchflusszytometrie.
5. Validierung der in 2) und 4) erhaltenen molekularen Ergebnisse.
6. Definition der antigenen Landschaft und des TCR-Repertoires von CRC- und PDAC-Leber-MTS.

Die Ergebnisse der oben genannten WPs werden mit klinischen Follow-up-Daten gekreuzt und dienen dazu, die Programmaktivitäten zu kalibrieren, die sich auf die Entwicklung neuartiger ATMPs konzentrieren.