Terapias Avanzadas para Metástasis Hepáticas (LiMeT)

Antecedentes y justificación - CRC y PDAC son la segunda y cuarta causa más común de muerte por cáncer, respectivamente. Los pacientes afectados por estos cánceres mueren de MTS hepático. Las terapias convencionales son activas en cualquiera de los tumores primarios pero fallan en la enfermedad metastásica. La eficacia de la inmunoterapia por bloqueo del punto de control inmunitario y la terapia celular adoptiva con linfocitos T tumor-específicos es sólo parcial o temporal en SMT de tumores sólidos, debido a los mecanismos inmunosupresores locales. Esto es particularmente relevante para el MTS hepático, en el que un entorno tolerogénico natural puede sostener aún más la inmunosupresión inducida por las células cancerosas y las células inmunitarias infiltrantes, como los macrófagos asociados a tumores (TAM), las células supresoras derivadas de mieloides (MDSC), los neutrófilos y las células T reguladoras. o células B.

En este sentido, la evidencia sugiere que la progresión del CCR primario o metastásico se correlaciona con una pobre infiltración inmune e inflamación. Además, nuestros resultados publicados en PDAC primario respaldan una correlación entre la progresión del tumor y una fuerte firma antiinflamatoria/inmunosupresora de tipo 2. Se sabe que la eficacia de la quimioterapia depende también de la reactivación y/o repolarización de las respuestas inmunitarias dirigidas al tumor. La quimioterapia prequirúrgica puede inducir efectos beneficiosos y cambios potencialmente objetivos en el perfil inmunológico de CRC o PDAC MTS.

Los investigadores plantean la hipótesis de que una combinación de: i) eliminación directa de células cancerosas mediante células T específicas del tumor transferidas de forma adoptiva y ii) control indirecto de la progresión tumoral a través de la reprogramación del microambiente tumoral controlaría el MTS hepático de CRC y PDAC.

Por lo tanto, los investigadores proponen una caracterización exhaustiva del entorno metastásico en estos dos tipos de cáncer para dar forma racional, sobre la base de similitudes y diferencias, ATMP innovadores.

Los resultados experimentales obtenidos a partir de muestras biológicas se correlacionarán: i) con los datos clínicos de los pacientes en el momento del enrolamiento ya lo largo de su seguimiento; y ii) para un subgrupo de pacientes, con datos bioquímicos e inmunológicos de muestras de sangre periférica recolectadas de forma rutinaria como parte de su seguimiento clínico, con el objetivo adicional de identificar nuevos parámetros biológicos y/o firmas para ayudar a la estratificación de los pacientes y la personalización de los tratamientos.

Objetivos - Los investigadores quieren estudiar:

1. la carga mutacional del tumor y la composición del microambiente del tumor metastásico en el hígado;
2. las vías inhibitorias que restringen la inmunidad en el MTS hepático;
3. la amplitud antigénica y clonal de las respuestas de células T antitumorales;
4. las variaciones espacio-temporales de las células inmunitarias reguladoras y efectoras tras la terapia;
5. las características de las células tumorales y su microambiente en MTS hepático versus (vs) tumor primario;
6. las variaciones longitudinales de parámetros clínicos y marcadores biológicos e inmunológicos derivados de la sangre durante el seguimiento médico de los pacientes.
7. Además, quieren recolectar y biobancar muestras de pacientes para respaldar la validación y selección de los nuevos ATMP desarrollados por los otros socios del programa traslacional.

Los objetivos principales serán:

1. para identificar vías inmunosupresoras/de agotamiento
2. desarrollar una biblioteca de TCR específicos de tumor (N≥5/tipo de tumor) e identificar nuevos objetivos CAR (N≥1/tipo de tumor) en CRC y PDAC MTS

Diseño del estudio: este protocolo clínico tiene como objetivo la caracterización profunda de las células tumorales MTS y su microambiente, incluidas las modificaciones dinámicas posiblemente informativas de los perfiles protumorales a los antitumorales que pueden seguir a la quimioterapia, que se administra antes de la cirugía (neoadyuvante) a una cantidad considerable. fracción de pacientes. Por lo tanto, los pacientes con PDAC y CRC MTS se caracterizarán por investigaciones transversales o longitudinales en pacientes que no han recibido quimioterapia frente a pacientes tratados.

Además, los investigadores pretenden comparar el MTS hepático con el tumor primario, para resaltar las modificaciones cualitativas dinámicas en las células cancerosas, los infiltrados inmunitarios y el microambiente no inmunitario que podrían facilitar la progresión de la enfermedad hacia la diseminación metastásica. Estas modificaciones pueden ofrecer una ventana de oportunidad para la aplicación óptima de nuestros ATMP. Con este propósito, los pacientes con PDAC primario no metastásico sometidos a resección quirúrgica se incluirán en este estudio y se les dará seguimiento para monitorear el desarrollo de MTS hepático metacrónico, que, siempre que sea posible, se caracterizará y comparará con su emparejado / no emparejado, previamente. recogidas, muestras de tumores primarios. También se recolectarán y analizarán muestras de sangre periférica en el momento del diagnóstico de MTS hepático. Además, en aquellos pacientes con CCR MTS sometidos a resección sincrónica de CCR primario y MTS hepático, se llevarán a cabo análisis comparativos en el tumor de ambos sitios, lo que permitirá el perfil intra e interpaciente de ambos nichos tumorales.

Además, los resultados de los análisis de investigación multinivel se correlacionarán con los datos clínicos recopilados de todos los pacientes en el momento de la inscripción en el estudio y durante su seguimiento clínico, siempre que sea posible hasta 2 años, considerando pacientes con PDAC, y 3 años , considerando CRC.

En particular, para los pacientes con CCR metastásico, el seguimiento clínico se asociará con la recolección simultánea de muestras de sangre en puntos de tiempo en serie, que se almacenarán prospectivamente en un biobanco para análisis adicionales destinados a: i) estudiar los correlatos biológicos e inmunológicos del estado clínico del paciente; ii) evaluar discriminantes clave previamente identificados en muestras de sangre analizadas en el momento de la cirugía de MTS hepático, para servir como predictores tempranos de progresión o recurrencia hepática y posiblemente como indicadores para la estratificación terapéutica.

Los investigadores esperan recolectar muestras de tejido/sangre y datos clínicos de al menos:

• 200 pacientes con CCR metastásico (ya sea sincrónico o metacrónico);
• 150 pacientes con PDAC no metastásico;
• 75 pacientes con PDAC MTS sincrónicos y alrededor de 20 pacientes con PDAC MTS metacrónicos, estos últimos originalmente inscritos como pacientes primarios no metastásicos para el estudio longitudinal, para un total de 95 pacientes con PDAC metastásico;
• 30 voluntarios sanos, como controles negativos.

Se recolectarán diferentes muestras biológicas (sangre periférica, tejido tumoral primario y/o metastásico, sangre portal), en el curso de la atención diagnóstica y terapéutica estándar de esos pacientes, y se analizarán en parte directamente y en parte en biobanco para estudios posteriores. . Paralelamente, se recopilarán datos clínicos de los pacientes en el momento de la inscripción en el estudio y, siempre que sea posible, durante un período de seguimiento de hasta 2 años, para pacientes con PDAC, y 3 años, para pacientes con CRC.

El análisis estadístico de los datos recopilados se realizará a lo largo del estudio clínico, comenzando 6 meses después de la inscripción del primer paciente hasta 6 meses después del final del seguimiento de los pacientes, para un total de 7 años. El estudio tendrá una duración de 7 años.

Se recolectarán diferentes muestras biológicas (sangre periférica, tejido tumoral primario y/o metastásico, sangre portal), en el curso de la atención diagnóstica y terapéutica estándar de esos pacientes, y se analizarán en parte directamente y en parte en biobanco para estudios posteriores. . Paralelamente, se recopilarán datos clínicos de los pacientes desde el momento de la inscripción en el estudio durante un período de seguimiento de 2 años, para pacientes con PDAC, y de 3 años, para pacientes con CRC.

El análisis estadístico de los datos clínicos y experimentales recopilados se realizará a lo largo de la duración del estudio clínico, comenzando 6 meses después de la inscripción del primer paciente hasta el final del seguimiento de los pacientes, por un total de 7 años. El estudio tendrá una duración de 7 años.

Las actividades de investigación se organizarán e integrarán en 6 paquetes de trabajo (WP):

1. Recolección y biobanco del material de pacientes con CCR y PDAC MTS al hígado y con PDAC primario no metastásico resecable.
2. Definición de la carga mutacional tumoral, el perfil epigenético y de expresión génica del hígado metastásico de CCR y PDAC a granel y a nivel de células individuales.
3. Evaluación de la composición molecular y celular del CCR y, si es posible, del MTS hepático PDAC mediante tecnologías de transcriptómica espacial (NICHE-seq y Visium).
4. Caracterización de los paisajes inmunes de CCR y, si es posible, MTS hepáticos PDAC mediante citometría de flujo de alta dimensión.
5. Validación de los resultados moleculares obtenidos en 2) y 4).
6. Definición del paisaje antigénico y repertorio TCR de MTS hepáticos CCR y PDAC.

Los resultados obtenidos por los WP mencionados anteriormente se cruzarán con datos de seguimiento clínico y servirán para calibrar las actividades del programa enfocadas en el desarrollo de nuevos ATMP.