Auswirkungen des Nasensprühens von LiveSpo Navax bei der Behandlung akuter Atemwegsinfektionen bei Kindern

Das Respiratory Syncytial Virus (RSV) ist das häufigste Virus, das bei Kleinkindern akute Atemwegsinfektionen (ARTIs) verursacht, mit einem hohen Risiko einer schweren Bronchiolitis. Die Symptome einer RSV-Infektion reichen von leichtem Fieber, Husten, laufender Nase und pfeifender Atmung bis hin zu schweren Symptomen wie Atembeschwerden und Atemversagen. Es wurde gezeigt, dass Zytokine in den Atemwegen von Kindern mit Bronchiolitis, wie Tumornekrosefaktor (TNF-alpha), Interleukin-6 (IL-6) und IL-8, bei einer primären RSV-Infektion sehr stark und extrem ansteigen Ein Anstieg von IL-6 ist bei Kindern mit einer RSV-Infektion mit einem plötzlichen Tod verbunden. Die Weltgesundheitsorganisation (WHO) schätzt, dass jedes Jahr 160.000 bis 600.000 Kinder unter fünf Jahren an den Folgen einer RSV-Infektion sterben oder ins Krankenhaus eingeliefert werden. Derzeit gibt es weder einen Impfstoff noch eine spezifische Behandlung für RSV-infizierte Kinder, da die Therapie mit dem monoklonalen Antikörper Palivizumab und das antivirale Nukleotidmedikament Ribavirin entweder zu teuer oder zu gefährlich für Kinder sind und nur für Hochrisikopatienten empfohlen werden.

In den letzten Jahren erfreuen sich präventive und unterstützende Therapien bei Atemwegsinfektionen wachsender Beliebtheit, wobei sich Probiotika als vielversprechende sichere Kandidaten für die therapeutische Unterstützung und Antibiotikareduktion erwiesen haben. Es wird vermutet, dass Probiotika durch direkte Wechselwirkungen Viren einfangen oder Sekundärwachstum erzeugen können, das das Viruswachstum hemmt oder das Immunsystem dazu anregt, eindringende Viren abzufangen. Allerdings entwickelt sich die Wirksamkeit oral verdauter Probiotika auf die Atemwege von Kindern nur langsam (normalerweise dauert es etwa 3–12 Monate) und wird in erster Linie zur Vorbeugung und nicht zur unterstützenden Behandlung von ARITs eingesetzt. Daher sind alternative Verabreichungswege für Probiotika bei der Behandlung von ARTIs erforderlich.

Ziel der Studie ist es, die Wirksamkeit von Nasenspray-Probiotika, die zwei Bakterienstämme, Bacillus subtilis und Bacillus clausii, enthalten, bei der Vorbeugung und Unterstützung der Behandlung von Kindern mit akuten Atemwegsbeschwerden aufgrund einer RSV-Infektion zu bewerten.

Methoden: Es wird eine randomisierte, blinde und kontrollierte klinische Studie durchgeführt. Die Eltern des Patienten müssen die folgenden Informationen über ihre Kinder angeben: vollständiger Name, Geschlecht, Alter, geburtshilfliche Vorgeschichte, Vorgeschichte von Impfungen, Vorgeschichte des Antibiotika-Einsatzes … Nach Einverständniserklärung werden 100 Patienten mit ARTIs aufgrund von RSV in zwei Gruppen randomisiert (Nr = 50/Gruppe): Die Kontrollgruppe (genannt „Kontrollgruppe“) verwendet physiologische Kochsalzlösung mit 0,9 % NaCl und eine Versuchsgruppe (genannt „Navax“-Gruppe) verwendet das Probiotikum LiveSpo Navax. Um die Objektivität der Studie sicherzustellen, erhält der Patient ein codiertes Spray in Form einer Blindprobe. Die klinische Nachbeobachtung dauert 6 Tage. An Tag 0 und Tag 3 werden nasopharyngeale Proben entnommen, um mögliche Reduzierungen der Viruslast und Koinfektionsbakterien sowie die Modulation der überreagierten Zytokinfreisetzung und des Vorhandenseins probiotischer Sporen im Blut zu bewerten Nasenschleimhaut des Patienten.

Echtzeit-PCR zum Nachweis von Mikroorganismen in nasopharyngealen Proben: Semiquantitative Tests zur Messung von Änderungen der RSV-Belastung und der Konzentration von Koinfektionsbakterien werden mit dem Echtzeit-RT-PCR/PCR-Routineprotokoll durchgeführt, das unter ISO 15189 standardisiert wurde: 2012-Kriterien und wird im Vietnam National Children's Hospital verwendet. Der Nachweis von B. subtilis ANA4 und B. clausii ANA39 wird auch durch Echtzeit-PCR SYBR Green durchgeführt, die gemäß der Norm ISO 17025:2017 standardisiert wurde und routinemäßig im Key Laboratory of Enzyme and Protein Technology der VNU University of Science durchgeführt wird.

ELISA-Tests für Zytokinspiegel: Proinflammatorische Zytokinspiegel (pg/ml), einschließlich Interleukin (IL-6, IL-8) und TNF-alpha, werden mit einem Enzyme-Linked-Immunosorbent-Assay-Kit (ELISA) gemäß den Anweisungen des Herstellers quantifiziert.

Während der Behandlung werden die Patienten täglich auf typische klinische Symptome von RSV-induzierten Atemwegsinfektionen überwacht, darunter laufende Nase, Brustdepression, Atembeschwerden, trockene Rasselgeräusche, feuchte Rasselgeräusche, Körpertemperatur (°C), Oxymetrie (SpO2) (%) und Puls (Schläge/Minute) und Atem (Schläge/Minute) bis zur Entladung. Der Gesundheitszustand der Patienten wird von Ärzten und Krankenschwestern beobachtet und ihre Informationen werden in die Krankenakten eingetragen. Während dieser Studie werden die Patienten der Eltern gebeten, für ihre Kinder auf den Verzehr anderer Probiotika zu verzichten, sei es über Nasenspray oder orale Verabreichung, und die Reinigung der Nase ihrer Kinder mit anderen physiologischen Kochsalzlösungssprays mit 0,9 % NaCl zu unterlassen.

Datenerfassung und statistische Analyse: Es werden individuelle Krankenakten erfasst und anschließend die Informationen des Patienten gesammelt und in einem Datensatz systematisiert. Die Wirksamkeit von LiveSpo Navax wird bewertet und mit 0,9 %iger NaCl-physiologischer Kochsalzlösung verglichen, basierend auf den folgenden klinischen und subklinischen Kriterien, die in Navax- und Kontrollgruppen ermittelt wurden: (i) der Tag der Symptomlinderung; (ii) die Reduktionsniveaus (2^△Ct) der RSV-Belastung und der Koinfektionsbakterienkonzentrationen. △Ct für Zielgene wird als Ct (Schwellenzyklus) am Tag 3 – Ct am Tag 0 berechnet, während der Ct der internen Kontrolle so angepasst wird, dass er bei allen Proben gleich ist; (iii) die Reduktionsniveaus der Zytokine IL-6, IL-8 und TNF-alpha. Die tabellarische Analyse wird für dichotome Variablen mithilfe des χ2-Tests oder des exakten Fisher-Tests durchgeführt, wenn der erwartete Wert einer Zelle unter fünf liegt. Kontinuierliche Variablen werden entweder mit dem Wilcoxon-Test, dem T-Test oder dem Mann-Whitney-Test verglichen, wenn die Daten nicht normalverteilt sind. Die Korrelationen zwischen den Variablen werden durch die Korrelationsanalyse nach Spearman bewertet. Statistische und grafische Analysen werden mit der Software GraphPad Prism v8.4.3 (GraphPad Software, CA, USA) durchgeführt. Das Signifikanzniveau aller Analysen wird auf p < 0,05 festgelegt. P-Werte.

Erwartete Ergebnisse: (i) LiveSpo Navax lindert RSV-Infektionssymptome um etwa 25 % wirksamer, wie 90 % der Patienten, die LiveSpo Navax verwenden (Navax-Gruppe), am 3. bis 6. Tag der Intervention je nach Symptomen beschwerdefrei sind, im Vergleich zu 65 % der Patienten in der Kontrollgruppe; (ii) Bei Patienten in der Navax-Gruppe ist die RSV-Belastung am dritten Tag der Intervention deutlicher verringert (>10-fach) als bei Patienten in der Kontrollgruppe.