Endometriose und Peritonealdysbiose

Das Hauptziel des Projekts ist die Analyse des Darm-, Peritoneal- und Uterusmikrobioms bei Frauen, die sich aufgrund von Endometriose (Arm 1) oder idiopathischer Unfruchtbarkeit (Arm 2) einer Laparoskopie unterziehen. Detaillierte Ziele sind: i) Analyse der Korrelation zwischen der Zusammensetzung des intestinalen, peritonealen und uterinen Mikrobioms mit dem Stadium der Endometriose nach ASRM, ii) qualitativer Vergleich des intestinalen und peritonealen Mikrobioms mit dem Mikrobiom der Gebärmutterhöhle bei Frauen mit Endometriose vs B. idiopathische Infertilität, iii) Analyse der Korrelation zwischen der Zusammensetzung des intestinalen, peritonealen und uterinen Mikrobioms mit der Schmerzintensität und Infertilität, iv) Vergleich der Lebensqualität in beiden Armen und Bewertung ihrer Korrelation mit dem lokalen Mikrobiom. Die Lebensqualität wird in beiden Armen mit dem SF-36-Fragebogen bewertet und dann verglichen. Der SF-36-Fragebogen zur Selbstauskunft deckt acht Gesundheitsbereiche ab: körperliche Funktionsfähigkeit (10 Items), körperliche Schmerzen (2 Items), Rolleneinschränkungen aufgrund körperlicher Gesundheitsprobleme (4 Items), Rolleneinschränkungen aufgrund persönlicher oder emotionaler Probleme (4 Items). ), emotionales Wohlbefinden (5 Items), soziales Funktionieren (2 Items), Energie/Müdigkeit (4 Items) und allgemeine Gesundheitswahrnehmung (5 Items). Die Punktzahlen für jede Domäne reichen von 0 bis 100, wobei eine höhere Punktzahl einen günstigeren Gesundheitszustand definiert. Die Studiengruppe besteht aus Frauen im gebärfähigen Alter, die sich einer chirurgischen Behandlung aufgrund von Beckenendometriose oder idiopathischer Unfruchtbarkeit unterziehen. Vor der Operation wird eine Stuhlprobe zur Untersuchung des Darmmikrobioms entnommen. Während der geplanten Laparoskopie wird zusätzlich zum geplanten Eingriff, der dem Zweck der Krankenhauseinweisung dient, eine Aspirationsbiopsie des Endometriums durchgeführt und Flüssigkeit aus der Bauchhöhle und/oder Flüssigkeit aus der Ovarialzyste zur Analyse des lokalen Mikrobioms gesammelt. Biologische Materialien (Stuhl, Peritoneal-/Ovarialzystenflüssigkeit, Endometriumaspirat) werden gesichert und anschließend einer molekularen Analyse mit der Next Generation Sequencing (NGS)-Methode unterzogen. Die Stufen umfassen: i) Isolierung bakterieller DNA aus biologischem Material, ii) Vorbereitung von Bibliotheken für die Sequenzierung, einschließlich der Durchführung der PCR- und Nested-PCR-Methoden an bakteriellen DNA-Isolaten aus den getesteten Proben biologischen Materials, iii) Reinigung von Amplifikationsprodukte, Indexierung, Validierung der Konzentration von Amplikons, Pooling und Denaturierung von Bibliotheken, iv) Standardisierung und Optimierung des Verfahrens zur Isolierung bakterieller metagenomischer DNA aus biologischem Material aus Darm, Peritonealhöhle, Gebärmutterhöhle und Endometriumgewebe, v) Standardisierung der Nested-PCR-Methode an bakteriellen DNA-Isolaten aus den getesteten biologischen Materialien, vi) Einsendung von Proben zur Sequenzierung. Die Sequenzdaten werden einer bioinformatischen Analyse unterzogen, um Bakterienprofile zu erhalten (die prozentuale Zusammensetzung der lokalen Bakterienpopulation nach Stämmen und Gattungen). Ziel ist es, das Mikrobiom des Darms, der Bauchfelle und der Gebärmutterhöhle bei Frauen, die sich einer chirurgischen Behandlung der Endometriose oder der invasiven Diagnostik der idiopathischen Infertilität unterziehen, zu charakterisieren und die Bakterienpopulationen an diesen Orten zu vergleichen, was auch Informationen über die Herkunft der Bakterien liefern kann in der Bauchhöhle.