Endometriosis y disbiosis peritoneal

El objetivo principal del proyecto es analizar el microbioma intestinal, peritoneal y uterino en mujeres sometidas a laparoscopia por endometriosis (brazo 1) o infertilidad idiopática (brazo 2). Los objetivos detallados son: i) análisis de la correlación entre la composición del microbioma intestinal, peritoneal y uterino con el estadio de endometriosis según ASRM, ii) comparación cualitativa del microbioma intestinal y peritoneal con el microbioma de la cavidad uterina en mujeres con endometriosis vs. infertilidad idiopática, iii) análisis de la correlación entre la composición del microbioma intestinal, peritoneal y uterino con la intensidad del dolor y la infertilidad, iv) comparación de la calidad de vida en ambos brazos y valoración de su correlación con el microbioma local. La calidad de vida se evaluará en ambos brazos mediante el cuestionario SF-36 y luego se comparará. El cuestionario autoadministrado SF-36 cubre ocho dominios de salud: funcionamiento físico (10 ítems), dolor corporal (2 ítems), limitaciones de roles debido a problemas de salud física (4 ítems), limitaciones de roles debido a problemas personales o emocionales (4 ítems ), bienestar emocional (5 ítems), funcionamiento social (2 ítems), energía/fatiga (4 ítems) y percepciones generales de salud (5 ítems). Las puntuaciones para cada dominio varían de 0 a 100, y una puntuación más alta define un estado de salud más favorable. El grupo de estudio estará formado por mujeres en edad fértil, sometidas a tratamiento quirúrgico por endometriosis pélvica o infertilidad idiopática. Antes de la cirugía, se tomará una muestra de heces para examinar el microbioma intestinal. Durante la laparoscopia programada, además del procedimiento planificado, que es el propósito de la hospitalización, se realizará una biopsia por aspiración endometrial y se recolectará líquido de la cavidad peritoneal y/o líquido del quiste ovárico para análisis del microbioma local. Los materiales biológicos (heces, líquido de quistes peritoneales/ováricos, aspirado endometrial) se asegurarán y luego se someterán a análisis molecular utilizando el método de secuenciación de próxima generación (NGS). Las etapas incluirán: i) aislamiento de ADN bacteriano a partir de materiales biológicos, ii) preparación de bibliotecas para la secuenciación, incluida la realización de métodos de PCR y PCR anidada en aislados de ADN bacteriano de las muestras analizadas de materiales biológicos, iii) purificación de productos de amplificación, indexación, validación de la concentración de amplicones, agrupación y desnaturalización de bibliotecas, iv) estandarización y optimización del procedimiento para el aislamiento de ADN metagenómico bacteriano a partir de materiales biológicos de intestinos, cavidad peritoneal, cavidad uterina y tejidos endometriales, v) estandarización del método nested-PCR en aislados de ADN bacteriano de los materiales biológicos analizados, vi) envío de muestras para secuenciación. Los datos de secuenciación se someterán a análisis bioinformáticos para obtener perfiles bacterianos (la composición porcentual de la población bacteriana local por filos y géneros). El objetivo es caracterizar el microbioma de los intestinos, el peritoneo y la cavidad uterina en mujeres sometidas a tratamiento quirúrgico por endometriosis o diagnóstico invasivo por infertilidad idiopática, y comparar las poblaciones bacterianas en estos lugares, lo que también puede proporcionar información sobre el origen de las bacterias. en la cavidad peritoneal.