Schadstoffe in der atherosklerotischen Plaque und kardiovaskuläre Ereignisse (APAChE)

Unter den Patienten mit Karotisstenose (gemäß der nordamerikanischen Klassifizierung der symptomatischen Karotis-Endarteriektomie-Studie), die sich einer Karotis-Endarteriektomie wegen extrakranieller hochgradiger (>70 %) Stenose der inneren Halsschlagader unterziehen müssen, werden die Forscher 145 aufeinanderfolgende Patienten mit asymptomatischer Erkrankung aufnehmen. Alle Patienten werden einer klinischen Grunduntersuchung mit Computertomographie oder MRT zur Beurteilung zerebraler Läsionen unterzogen, und es werden Gesundheitsakten erhoben. Klinische Variablen werden mit Standardverfahren nach dem Fasten über Nacht gemessen. Patienten mit Anzeichen von Herzinsuffizienz, Herzklappenfehlern, bösartigen Neubildungen oder sekundären Ursachen von Bluthochdruck werden ausgeschlossen.

Proben des Teils der Karotisbifurkation, der die maximale Erkrankung zeigte, werden durch Atherektomie gewonnen und in zwei Hälften geschnitten und in flüssigem Stickstoff eingefroren oder für nachfolgende Analysen in 10 % gepuffertem Formalin fixiert.

Anschließend werden Plaqueproben verwendet, um das Vorhandensein und die Menge flüchtiger organischer Verbindungen und Mikroplastik mittels Pyrolyse-Gaschromatographie-Massenspektrometrie zu bestimmen.

Um diese Ergebnisse zu untermauern, werden Plaqueproben auch mit Transmissionselektronenmikroskopie beobachtet, um Mikroplastik im Atherom visuell zu identifizieren und weitere Beweise und strukturelle Erkenntnisse zu gewinnen.

Plaques werden auch durch Immunhistochemie, ELISAs und Western Blot analysiert, um entzündliche, d. h. NLRP3, Caspase-1, IL-1β, IL-6, TNFα, NF-kB und CD68 sowie Plaque-Stabilitätsmarker, d. h. MMP-9 und Kollagen, um zu untersuchen, ob das Vorhandensein von Mikroplastik mit einem schlechteren Plaque-Phänotyp verbunden ist. Die Gruppen (post-hoc zusammengestellt) von Patienten mit verunreinigten Plaques im Vergleich zu nicht verunreinigten Plaques werden hinsichtlich der Expression all dieser Marker verglichen.

Nach der Karotis-Endarteriektomie werden die Patienten nachuntersucht und auf das Auftreten eines kombinierten Ergebnisses überwacht, das aus nicht-tödlichem Myokardinfarkt, nicht-tödlichem Schlaganfall und Gesamtmortalität besteht, die den wichtigsten und einzigen harten Endpunkt der Studie darstellen .

Die Patienten werden (post-hoc) in Gruppen mit verunreinigten Plaques (mit nachweisbaren Konzentrationen von mindestens einem Schadstoff) oder in nicht verunreinigte Plaques eingeteilt. Die Cox-Regressionsanalyse wird verwendet, um den Zusammenhang zwischen dem Vorhandensein von Mikroplastik und der Inzidenz des zusammengesetzten Ergebnisses zu untersuchen, angepasst an Alter, Geschlecht, BMI, systolischen und diastolischen Blutdruck, die Prävalenz von Diabetes, Dyslipidämie und Rauchen. Bei Patienten mit verunreinigten Plaques wird die Häufigkeit der Schadstoffe, also die Summe, zur Kategorisierung der Patienten in Terzile verwendet. Cox-Modelle, angepasst an dieselben Variablen, werden durchgeführt, um den Zusammenhang zwischen der Belastung durch Mikroplastik und dem Ergebnis zu untersuchen. P-Werte < 0,05 gelten als statistisch signifikant.