Inquinanti nella placca aterosclerotica ed eventi cardiovascolari (APAChE)

Tra i pazienti con stenosi carotidea (secondo la classificazione North American Symptomatic Carotid Endarterectomy Trial) arruolati per sottoporsi a endoarterectomia carotidea per stenosi dell'arteria carotide interna extracranica di alto grado (> 70%), i ricercatori arruoleranno 145 pazienti consecutivi con malattia asintomatica. Tutti i pazienti saranno sottoposti a un esame clinico di base, con tomografia computerizzata o risonanza magnetica per valutare le lesioni cerebrali e verranno raccolte le cartelle cliniche. Le variabili cliniche saranno misurate con procedure standard dopo il digiuno notturno. Saranno esclusi i pazienti con evidenza di insufficienza cardiaca, difetti valvolari, neoplasie maligne o cause secondarie di ipertensione.

I campioni della porzione di biforcazione carotidea che ha mostrato la massima malattia saranno ottenuti da aterectomia e saranno tagliati in due metà e congelati in azoto liquido o fissati in formalina tamponata al 10% per le successive analisi.

I campioni di placca saranno poi utilizzati per valutare la presenza e la quantità di composti organici volatili e microplastiche attraverso pirolisi-gascromatografia-spettrometria di massa.

Per corroborare questi risultati, i campioni di placca saranno anche osservati con microscopia elettronica a trasmissione per identificare visivamente le microplastiche all'interno dell'ateroma e ottenere ulteriori prove e approfondimenti strutturali.

Le placche saranno anche analizzate mediante immunoistochimica, ELISA e Western Blot per quantificare l'infiammazione, ad es. NLRP3, caspasi-1, IL-1β, IL-6, TNFα, NF-kB e CD68 e marcatori di stabilità della placca, ad es. MMP-9 e collagene, al fine di esplorare se la presenza di microplastiche è associata a un fenotipo di placca più povero. I gruppi (composti post-hoc) di pazienti con placche inquinate rispetto a placche non inquinate saranno confrontati per l'espressione di tutti questi marcatori.

Dopo l'endoarteriectomia carotidea, i pazienti saranno seguiti e monitorati per l'incidenza di un esito composito costituito da infarto miocardico non fatale, ictus non fatale e mortalità per tutte le cause, che rappresentano il principale e l'unico endpoint difficile dello studio .

I pazienti saranno classificati (post-hoc) come aventi placche inquinate (con livelli rilevabili di almeno un inquinante) o placche non inquinate. L'analisi di regressione di Cox verrà utilizzata per esaminare l'associazione tra la presenza di microplastiche e l'incidenza dell'esito composito, aggiustato per età, sesso, BMI, pressione arteriosa sistolica e diastolica, prevalenza di diabete, dislipidemia e fumo. Tra quelli con placche inquinate, l'abbondanza di inquinanti, cioè la somma, sarà utilizzata per classificare i pazienti in terzili. I modelli di Cox, aggiustati per le stesse variabili, verranno eseguiti per esplorare la relazione tra il carico di microplastiche e il risultato. I valori P <0,05 saranno considerati statisticamente significativi.