Nefrectomía sin contacto con reducción de células tumorales circulantes (CITO-CERENE)

Este estudio estudiará el perfil de CTC en RCC y su liberación en la circulación sanguínea durante LRN.

Los pacientes incluidos serán derivados a la Unidad de Cáncer Renal del Departamento de Urología del Centro Hospitalario Universitario del Norte de Lisboa (CHLUN) con el diagnóstico de una masa renal elegible para un NLR. Se confirmará el diagnóstico de los pacientes, se clasificará adecuadamente en etapas y se decidirán sus opciones de tratamiento después de un proceso de decisión compartido e informado a la luz de las directrices actuales de la Asociación Europea de Urología (EAU) sobre el CCR. Se excluirán pacientes < 18 años y mujeres embarazadas. Los pacientes serán adecuadamente informados del protocolo del estudio, y firmarán un consentimiento informado específico.

Los pacientes que se someten a LRN participarán en un ensayo controlado aleatorio prospectivo de un solo centro de dos brazos, que compara una técnica sin contacto, con ligadura pedicular directa (Grupo A) versus la disección convencional, y ligadura del pedículo renal con tracción renal (Grupo B ). Se recogerá una muestra de sangre periférica a su llegada al quirófano. Posteriormente, los pacientes del Grupo A serán sometidos a una RN sin contacto, realizándose la disección a través del plano de la fascia de Gerota hasta obtener la exposición del gran vaso correspondiente (vena cava del lado derecho y aorta del lado izquierdo). El pedículo renal se aislará directamente y se ligará con clips Weck® sin manipulación renal. A los pacientes del grupo B se les realizará un abordaje más convencional, comenzando con la apertura de la fascia de Gerota, identificación del uréter, tracción de la grasa perirrenal por debajo del uréter y disección cefálica hasta llegar al pedículo renal. A continuación, se aislará el pedículo renal mientras se mantiene la tracción sobre el riñón y la grasa perirrenal, y se ligará con clips Weck®. Se recolectará una segunda muestra de sangre periférica en el momento de la extracción de la muestra. Se recolectarán una tercera y cuarta muestras de sangre periférica en los días 1 y 30 postoperatorios, respectivamente, para estudiar la cinética postoperatoria de CTC. Todas las muestras recogerán 7,5 ml de sangre periférica.

Los pacientes que presenten riñones hipofuncionantes con indicación de nefrectomía total se utilizarán como controles. Los pacientes con nefrectomía total se someterán al protocolo de aleatorización, en un brazo de control.

Las CTC se aislarán de las muestras de sangre periférica utilizando un dispositivo de captura de CTC basado en el tamaño de microfluidos: Ruby™. Las muestras de sangre completa se inyectarán en los dispositivos a una velocidad de flujo de 80 µl/min. Luego, las CTC capturadas en los dispositivos se tiñen con anticuerpos contra 4',6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) para identificar núcleos celulares, grupo de antígeno de diferenciación 45 (CD45) para identificar leucocitos, citoqueratina 8/18 para identificar células epiteliales. CTC y vimentina para identificar CTC mesenquimales o CTC que han sufrido una transición epitelial a mesenquimatosa. Las muestras de sangre se procesarán no más de 30 minutos después de la recolección.