Diagnóstico temprano de melanoma utilizando perfiles de expresión y muestreo no invasivo de células de la piel (DermTech)

Este es un estudio multicéntrico, patrocinado por Derm Tech (DTI) International.

Objetivos específicos del estudio

Este estudio de investigación propone utilizar un método no invasivo para capturar células superficiales en lesiones cutáneas pigmentadas que se sospecha que son melanomas tempranos. Esta tecnología de "biopsia" no invasiva ha sido desarrollada y patentada por DermTech International. El ARN en las células de la piel capturadas por este método se perfilará para diagnosticar la naturaleza de la lesión (es decir, melanoma maligno o no). Un resultado exitoso de esta propuesta crearía un ensayo de diagnóstico no invasivo candidato basado en un perfil de expresión génica para identificar melanomas en etapa temprana. Este ensayo y más en particular el perfil de expresión génica de diagnóstico se consideran candidatos porque el perfil tendría que ser validado (es decir, demostrado ser diagnóstico) en ensayos clínicos más grandes. Los resultados secundarios podrían incluir pruebas para el diagnóstico y el pronóstico de una variedad de lesiones cutáneas pigmentadas.

Objetivo Específico 1: Crear una muestra de lesiones cutáneas pigmentadas. Cada muestra compuesta por:

1. El ARN se recuperó extrayendo con cinta la epidermis superficial que recubre la lesión (la extracción con cinta también se usará para recuperar el ARN de áreas normales de la piel y nevos benignos como controles).
2. Una biopsia estándar de la misma lesión y la histología y el diagnóstico que la acompañan. Las biopsias se tomarían después de quitar la cinta y se someterían a un análisis histopatológico estándar, lo que proporcionaría un diagnóstico de "estándar de oro". Estos diagnósticos podrían luego ser correlacionados con los datos generados en Específicos.

Objetivo 2.

Este objetivo específico se compone de tres objetivos individuales:

1. Análisis de muestras de ARN de lesiones seleccionadas mediante microarrays de ADN.
2. Correlación de datos de expresión génica con histopatología.
3. Creación de un clasificador de expresión candidato para el diagnóstico de melanoma.

La extracción de cinta (comercializada como un método para la recuperación de ARN como Epidermal Genetic Information Retrieval o EGIR™) es un método no invasivo que permite la recuperación de células que comprenden y están asociadas con la epidermis superior [4]. Morhenn et al [4] demostraron la viabilidad del muestreo no invasivo de la epidermis humana mediante la extracción secuencial con cinta adhesiva. Su trabajo mostró que la extracción de la piel con cinta produjo suficiente ARN para el análisis mediante el ensayo de protección de la ribonucleasa para detectar especies específicas de ARN, incluidas aquellas que se sabe que tienen poca abundancia.

4. Se recolectará el tejido extraído terapéuticamente

El procedimiento de extracción de cinta se realizará antes de todos los procedimientos de biopsia. La cinta se colocará en el sitio y se frotará enérgicamente con el extremo romo y redondeado de un marcador o tubo de ensayo de plástico con un movimiento circular. Se debe completar un mínimo de 15 movimientos circulares antes de retirar la cinta. Para acomodar el hecho de que muchos sitios serán más pequeños que el diámetro de la cinta, se tendrá cuidado de aplicar la cinta solo en el sitio de la lesión o de control y no en la epidermis normal circundante. El borde de la lesión se demarcará en la cinta con un marcador quirúrgico; cuando las cintas se procesan para la extracción de ARN, la marca permitirá retirar la cinta que no haya estado en contacto con la lesión (y que podría albergar una epidermis normal). Se utilizarán un total de 4 cintas para muestrear un sitio mayor o igual a 6 mm de diámetro. Los datos preliminares obtenidos de DTI muestran que las lesiones de menos de 6 mm de diámetro pueden requerir hasta 8 cintas para recuperar el ARN. También se realizará una extracción con cinta en un área de la piel de apariencia normal (preferiblemente, la parte superior de la espalda o el proceso mastoideo), así como también en un nevus benigno (si está disponible) para usar como comparación. Después del muestreo, las cintas se almacenarán a -20oC o menos. Las cintas se enviarán a DTI en hielo seco, por correo urgente, para su análisis.

Biopsia Una vez finalizado el procedimiento de extracción de la cinta, se extirpará quirúrgicamente toda la lesión de acuerdo con la práctica clínica habitual. La biopsia es un procedimiento estándar de atención que se llevaría a cabo independientemente de la investigación. Todos los tejidos extraídos se fijan en formalina y se envían a un laboratorio de histopatología, donde se incluyen en parafina y se seccionan para su análisis histopatológico. Los resultados de la patología se recogerán para el diagnóstico distintivo. Los informes de patología de los sujetos se identificarán con los identificadores de sujetos únicos asignados antes de su uso en el estudio para proteger la identidad de los sujetos.