Diagnosi precoce del melanoma utilizzando il profilo di espressione e il campionamento non invasivo delle cellule della pelle (DermTech)

Questo è uno studio multicentrico, sponsorizzato da Derm Tech (DTI) International.

Obiettivi specifici dello studio

Questo studio di ricerca propone di utilizzare un metodo non invasivo per catturare cellule superficiali su lesioni cutanee pigmentate sospettate di essere melanomi precoci. Questa tecnologia di "biopsia" non invasiva è stata sviluppata e brevettata da DermTech International. L'RNA nelle cellule della pelle catturate con questo metodo sarà profilato per diagnosticare la natura della lesione (es. melanoma maligno o meno). Un esito positivo di questa proposta creerebbe un test diagnostico non invasivo candidato basato su un profilo di espressione genica per l'identificazione dei melanomi in fase iniziale. Questo test e più in particolare il profilo diagnostico di espressione genica sono considerati candidati perché il profilo dovrebbe essere convalidato (ad es. dimostrato di essere diagnostico) in studi clinici più ampi. Gli esiti secondari potrebbero includere test per la diagnosi e la prognosi di una varietà di lesioni cutanee pigmentate.

Obiettivo specifico 1: creare un campione di lesioni cutanee pigmentate. Ogni campione composto da:

1. RNA recuperato mediante tape stripping dell'epidermide superficiale sovrastante la lesione (il tape stripping verrà utilizzato anche per recuperare l'RNA da aree cutanee normali e nevi benigni come controlli).
2. Una biopsia standard della stessa lesione e istologia e diagnosi di accompagnamento. Le biopsie verrebbero prelevate dopo lo stripping del nastro e sottoposte all'analisi istopatologica standard, che fornirebbe una diagnosi "gold standard". Queste diagnosi potrebbero quindi essere correlate con i dati generati in Specific

Obiettivo 2.

Questo obiettivo specifico si compone di tre obiettivi individuali:

1. Analisi di campioni selezionati di RNA di lesione mediante DNA microarray.
2. Correlazione dei dati di espressione genica con l'istopatologia.
3. Creazione di un classificatore di espressioni candidate per la diagnosi di melanoma.

Il tape stripping (commercializzato come metodo per il recupero dell'RNA come Epidermal Genetic Information Retrieval o EGIR™) è un metodo non invasivo che consente il recupero delle cellule che comprendono e sono associate all'epidermide superiore [4]. La fattibilità del campionamento non invasivo dell'epidermide umana mediante rimozione sequenziale del nastro adesivo è stata dimostrata da Morhenn et al [4]. Il loro lavoro ha dimostrato che la rimozione del nastro adesivo dalla pelle ha prodotto RNA sufficiente per l'analisi mediante test di protezione della ribonucleasi per rilevare specifiche specie di RNA, comprese quelle note per essere a bassa abbondanza.

4. Il tessuto rimosso terapeuticamente verrà raccolto

La procedura di rimozione del nastro verrà eseguita prima di tutte le procedure di biopsia. Il nastro verrà applicato al sito e strofinato energicamente con l'estremità arrotondata smussata di un pennarello o una provetta di plastica con un movimento circolare. È necessario completare un minimo di 15 movimenti circolari prima che il nastro venga rimosso. Per tener conto del fatto che molti siti saranno più piccoli del diametro del nastro, si avrà cura di applicare il nastro solo alla lesione o al sito di controllo e non all'epidermide normale circostante. Il bordo della lesione sarà delimitato sul nastro con un pennarello chirurgico; quando i nastri vengono elaborati per l'estrazione dell'RNA, la marcatura consentirà la rimozione del nastro che non è entrato in contatto con la lesione (e che potrebbe ospitare l'epidermide normale). Un totale di 4 nastri verrà utilizzato per campionare un sito maggiore o uguale a 6 mm di diametro. I dati preliminari ottenuti da DTI mostrano che le lesioni di diametro inferiore a 6 mm possono richiedere fino a 8 nastri per recuperare l'RNA. Lo stripping del nastro verrà eseguito anche su un'area cutanea apparentemente normale (preferibilmente; parte superiore della schiena o processo mastoideo) e un nevo benigno (se disponibile) da utilizzare come confronto. Dopo il campionamento, i nastri verranno conservati a -20oC o meno. I nastri saranno spediti a DTI su ghiaccio secco, tramite posta espressa, per l'analisi.

Biopsia Una volta completata la procedura di tape-stripping, l'intera lesione sarà asportata chirurgicamente secondo la pratica clinica standard. La biopsia è una procedura standard di cura che verrebbe condotta indipendentemente dalla ricerca. Tutti i tessuti prelevati vengono fissati in formalina e inviati a un laboratorio di istopatologia, dove vengono inclusi in paraffina e sezionati per l'analisi istopatologica. I risultati della patologia saranno raccolti per distinguere la diagnosi. I referti patologici del soggetto saranno identificati con gli identificativi univoci del soggetto assegnati prima dell'uso nello studio per proteggere l'identità del soggetto.