Estudio observacional de la asociación entre enfermedad periodontal y enfermedad cardiovascular

Una posible asociación entre la enfermedad periodontal y la enfermedad cardiovascular se planteó por primera vez en la década de 1980. Los estudios epidemiológicos realizados durante los últimos 20 años han demostrado una fuerte correlación entre la enfermedad periodontal y la enfermedad cardiovascular. Sin embargo, la literatura está algo dividida, ya que algunos estudios han mostrado una correlación moderada mientras que otros han mostrado correlaciones independientes (insignificantes) entre los dos. Esto deja un vacío en el conocimiento de los investigadores que debe ser reunido a través de estudios específicos. Se han realizado informes que sugieren que se ha encontrado que el 52% de las placas ateroscleróticas estudiadas contienen los mismos patógenos que causan la periodontitis. Esta es la razón por la que estas son las bacterias en las que nos centraremos durante el transcurso de este estudio.

La enfermedad periodontal, conocida como gingivitis o periodontitis, es causada por la presencia de bacterias en las bolsas gingivales de la boca que, con el tiempo, pueden causar inflamación sistémica a través de la producción de endotoxinas. Algunos ejemplos de las bacterias que causan la enfermedad periodontal incluyen Porphyromonas gingivalis y Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Estas son bacterias anaeróbicas gramnegativas que pueden prosperar en el espacio subgingival después de que pueden establecerse con éxito. Se sabe que estas dos bacterias invaden las células epiteliales orales, lo que crea la posibilidad de que puedan invadir las células epiteliales en otros lugares, como en los vasos coronarios. Estas bacterias se cultivarán del paciente y las cantidades relativas de ellas determinadas por técnicas de cultivo se utilizarán para evaluar la prevalencia de la enfermedad periodontal en el paciente. P. gingivalis es de especial importancia porque se sabe que se encuentra en pacientes con enfermedad periodontal activa y no se encuentra comúnmente en pacientes sin enfermedad periodontal. Puede identificarse por el pigmento negro producido en el cultivo. El agar Tryptic Soy-Serum-Bacitracin-Vancomicina (TSBV) es un medio selectivo capaz de aislar A. actinomycetemcomitans. La identidad de A. actinomycetemcomitans puede confirmarse en función del crecimiento de colonias "en forma de estrella" en el agar TSBV que son catalasa positivas. La cantidad relativa de estas bacterias determinada por el cultivo se utilizará para correlacionar con el nivel de enfermedad de las arterias coronarias en función de los grupos a los que se asigna cada sujeto. Así es como se puede determinar la base para una asociación entre las dos condiciones.

La inflamación sistémica se produce como resultado de la liberación de citocinas proinflamatorias en respuesta a una infección. Algunas de las citocinas liberadas incluyen proteína C reactiva de alta sensibilidad (hs-CRP), interleucina-1 (IL-1) e interleucina-6 (IL-6). La Hs-CRP es una proteína que está activa durante la respuesta de fase aguda a la inflamación. Se ha demostrado que su nivel en la sangre está notablemente elevado en la inflamación crónica y se ha encontrado consistentemente elevado en pacientes con síndromes coronarios agudos. La IL-1 es una citoquina proinflamatoria que también se libera como resultado de la inflamación sistémica. Específicamente, se ha encontrado que se secreta en respuesta al lipopolisacárido (LPS) de bacterias gramnegativas y se ha encontrado que está elevado en pacientes con enfermedad periodontal aumentada. La IL-6, al igual que la IL-1, es una citocina proinflamatoria que forma parte de la respuesta de fase aguda a la infección. Se ha correlacionado fuertemente con niveles crecientes de enfermedad arterial coronaria e incluso se ha demostrado como un marcador predictivo de mortalidad en Enfermedad Arterial Coronaria (EAC). Además de su papel en la CAD, también se ha encontrado que la IL-6 está elevada en la enfermedad periodontal, lo que crea la posibilidad de la base del vínculo entre estas dos enfermedades.

El objetivo de este estudio es lograr una mejor comprensión de la relación entre la enfermedad periodontal y la enfermedad de las arterias coronarias mediante la correlación de la gravedad de la enfermedad de las arterias coronarias con la presencia y cantidad de los patógenos periodontales P. gingivalis y A. actinomycetemcomitans. También se evaluará el nivel de inflamación sistémica causada por estos patógenos y la enfermedad de las arterias coronarias. Esto determinará si la enfermedad de las arterias coronarias se puede asociar con uno de estos patógenos específicos más que con el otro y qué niveles de inflamación sistémica se pueden asociar con ambas condiciones juntas.

Se obtendrán muestras de tejido periodontal, se cultivarán y la cantidad de los patógenos especificados presentes se correlacionará con el tipo y extensión de la enfermedad cardiovascular del paciente. También se realizarán análisis de sangre para evaluar el nivel de inflamación sistémica que se produce como resultado de la enfermedad periodontal y la enfermedad cardiovascular.

Los sujetos serán asignados a uno de 3 grupos en función de su estado cardiovascular:

• El grupo 1 incluirá pacientes sin antecedentes conocidos de CAD.
• El grupo 2 incluirá pacientes con antecedentes conocidos de CAD sin infarto de miocardio (IM) previo.
• El grupo 3 incluirá pacientes con antecedentes conocidos de CAD e infarto de miocardio previo.

Un miembro del equipo del estudio revisará previamente los expedientes de los pacientes que serán atendidos en la clínica de cardiología para determinar si el paciente es elegible para el estudio. Los pacientes recibirán su consentimiento en un entorno privado y se tomará un historial de enfermedades cardiovasculares pertinente al estudio para cada paciente que dé su consentimiento para participar en el estudio. Se usará hilo dental limpio que se haya usado para recolectar una muestra de líquido gingival de entre los dientes inferiores del paciente. No se han tomado medidas para esterilizar el hilo dental, por lo que se recomiendan técnicas asépticas adecuadas, incluido el uso de guantes estériles, para evitar la contaminación cruzada. Se recogerán tres muestras: en la línea media de los dientes, detrás del incisivo lateral derecho o izquierdo, y delante del primer molar derecho o izquierdo. La decisión de tomar muestras del lado derecho o izquierdo de la boca del paciente será aleatoria (tirar una moneda al aire) a menos que al paciente le falten dientes de un lado y la muestra deba tomarse del lado que produzca una muestra adecuada. Se deben obtener al menos 2 de las 3 muestras. Estas muestras se colocarán en 3 viales sellados etiquetados (por número de identificación del estudio y lugar de la muestra) de caldo de tioglicolato y se cultivarán durante 48 horas. Luego, se extraerá una muestra del fondo del medio de tioglicolato con una pipeta (para extraer bacterias anaerobias) y se cultivará en medios específicos para detectar la presencia de P. gingivalis y A. actinomycetemcomitans usando precauciones anaeróbicas en la microbiología del Centro Médico Universitario (UMC). laboratorio. P. gingivalis se cultivará en un agar Columbia especializado suplementado con sangre de oveja, bacitracina, colistina y ácido nalidíxico para seleccionar para el aislamiento de P. gingivalis. A. actinomycetemcomitans se puede aislar utilizando un agar especializado tríptico de suero de soja, bacitracina y vancomicina (TSBV), un agar especializado que inhibe los aerobios y anaerobios grampositivos y gramnegativos. Cada muestra se rayará en una placa de agar que se ha etiquetado con la identificación del estudio y la ubicación del diente. Las bacterias se cultivarán utilizando el método de cuatro rayas y se cultivarán durante 24 a 48 horas y se identificarán las bacterias patógenas. P. gingivalis se identificará en función del crecimiento de colonias pigmentadas negras en el agar selectivo y A. actinomycetemcomitans se identificará en función del crecimiento de colonias en forma de estrella en el agar TSBV. El nivel de enfermedad periodontal en el paciente se evaluará por la cantidad de crecimiento en las placas, con un número asignado a cada cuadrante en el que crece la bacteria. si solo crecen en el primer cuadrante, se les dará una designación numérica de 1, y el crecimiento en los cuadrantes segundo a cuarto se designará por 2 a 4 respectivamente. Con este método, se puede cuantificar el nivel de bacterias, siendo 4 la designación de la mayor cantidad relativa de bacterias. El nivel de cada patógeno encontrado en la boca de los pacientes se correlacionará con la gravedad de la enfermedad de las arterias coronarias para determinar si existe una correlación significativa. También se determinará si uno de los patógenos se puede correlacionar con la gravedad.

Además del muestreo gingival, se usará una pequeña porción (3 ml o 0,6 cucharaditas) de la sangre del paciente para analizar hs-CRP, IL-6 e IL-1 como marcadores sistémicos de inflamación. La muestra utilizada se tomará en la visita clínica inicial cuando el paciente haya dado su consentimiento y se tome la muestra gingival. La muestra será extraída por una enfermera para obtener las pruebas necesarias. Se extraerá 1 ml (0,2 cucharaditas) de suero para cada prueba (0,6 cucharaditas en total) y se enviará al laboratorio de patología de UMC para su análisis. Estos niveles se compararán con los valores normales de IL-1 (0-5 pg/mL) e IL-6 (5-15 pg/mL), mientras que la hs-CRP se correlacionará según los niveles crecientes. Esto permitirá determinar el nivel de infección sistémica causada por periodontitis (basado en el nivel de IL-1), enfermedad de las arterias coronarias (basado en el nivel de hs-CRP), o ambos (basado en el nivel de IL-6). Los resultados individuales se registrarán para el análisis estadístico.