Hacia biomarcadores inmunitarios para la tolerancia y la EICH en humanos (BioGvHD)

La enfermedad de injerto contra huésped (EICH) es la complicación más frecuente y grave del trasplante alogénico de células madre hematopoyéticas (TPH). Gran parte de nuestro conocimiento sobre la fisiopatología de la GVHD se ha obtenido a partir de modelos experimentales, pero mucho menos del estudio de la enfermedad en humanos. Los desarrollos recientes en biología básica abren nuevas vías para el desarrollo de conjuntos de biomarcadores que podrían predecir la gravedad y el pronóstico de la GVHD que podrían probarse y validarse a través de ensayos clínicos multicéntricos bien diseñados.

El objetivo principal de este proyecto es ampliar nuestra comprensión de los mecanismos patogénicos de la GVHD humana por un lado, y de la tolerancia inmune funcional por el otro. Además, este estudio tiene como objetivo establecer un conjunto de biomarcadores clínicamente relevantes en GVHD humano y tolerancia inmune en una cohorte de descubrimiento.

Los objetivos de este proyecto son:

1. Definir los correlatos fenotípicos, funcionales y moleculares de la EICH aguda poco después del HSCT/en su inicio 2. Estudiar la reconstitución tímica y el repertorio de células T después del HSCT durante el período 2 3. Identificar los correlatos funcionales y moleculares de la tolerancia inmunológica en largos sobrevivientes a término de HSCT 4. Preparación para la validación de biomarcadores en un ensayo clínico Proponemos un análisis prospectivo de una cohorte de 680 pacientes trasplantados de un hermano donante HLA idéntico en el hospital de Saint Louis. Los análisis se realizarán durante 3 períodos críticos, clínicamente relevantes.

1. Período 1: análisis al inicio de la EICH o en el momento del injerto 30 días después del TCMH en pacientes que no desarrollan EICH. También se analizará una muestra de sangre adicional 90 días después del HSCT.
2. Período 2: Se realizará un análisis de la función tímica utilizando mediciones de los círculos de escisión del receptor de células T (TREC) a los 6 y 12 meses posteriores al trasplante para todos los pacientes. El análisis de receptores de células T en poblaciones de células T ordenadas se realizará mediante NGS.
3. Período 3: En pacientes "tolerantes" (pacientes más de 2 años después del TCMH que no requieren tratamiento inmunosupresor), o en pacientes que aún requieren tratamiento inmunosupresor después de 2 años. También analizaremos los parámetros inmunológicos correspondientes a cada donante.

El diseño longitudinal de este estudio nos permitirá brindar una visión integrada de la fisiopatología de la GVHD y los mecanismos de tolerancia inmunológica en humanos.

Los biomarcadores fenotípicos, moleculares o funcionales identificados prospectivamente se analizarán en un estudio posterior a partir de materiales biológicos recogidos prospectivamente dentro de la amplia cohorte francesa de CryoStem. Por lo tanto, como tarea final de este proyecto, realizaremos análisis estadísticos teniendo en cuenta las variables clínicas de confusión que influyen en el resultado (es decir, tolerancia o muerte relacionada con la EICH). La preparación para un ensayo clínico requerirá pasar de los análisis bioinformáticos clásicos a análisis estadísticos clínicamente relevantes que incluyan mediciones biológicas secuenciales en la cohorte del conjunto de descubrimiento. Los puntos principales que se tendrán en cuenta para esta tarea son los siguientes;

1. La mortalidad relacionada con el trasplante (TRM) se puede estimar en el rango del 20%; HSCT post-alogénico de 2 años
2. La TRM se debe principalmente (aunque sea totalmente) a la GVHD y su inmunodeficiencia asociada
3. La incidencia acumulada de GVHD se puede estimar en el rango del 40%
4. Se estudiarán prospectivamente 80 pacientes y se analizarán 30 pacientes (estudio transversal) solo para la parte 3.
5. Dado que la mortalidad y la tolerancia relacionadas con la EICH son situaciones mutuamente excluyentes, se puede esperar el cálculo óptimo para la cohorte de validación.
6. Este cálculo será la base para la propuesta de un ensayo clínico intervencionista.