Mediciones in vivo de la frecuencia del latido ciliar nasal mediante el uso de interferometría

Antecedentes El aclaramiento mucociliar de las vías respiratorias depende del movimiento ciliar de las células ciliadas que cubren toda la vía respiratoria y los senos paranasales. En muchas enfermedades de las vías respiratorias el aclaramiento mucociliar se ve afectado por lesiones provocadas por humo, virus, otros organismos infecciosos o enfermedades genéticas que se denominan Discinesia Ciliar Primaria (PCD).

El diagnóstico de PCD se basa en una combinación de hallazgos clínicos como bronquiectasias, sinusitis crónica, otitis media crónica y espermatozoides inmóviles.

Además, en las pruebas realizadas en el laboratorio pulmonar los niveles de óxido nítrico nasal pueden ser bajos.

Las muestras obtenidas por biopsia con cepillado nasal se pueden analizar y el movimiento ciliar se puede registrar mediante videomicroscopía. La frecuencia de latidos ciliares (CBF) se puede calcular en muestras recién aisladas, pero también después de hacer crecer el tejido en cultivo celular.

Además, las células ciliadas pueden analizarse mediante microscopía electrónica para detectar defectos en la estructura microscópica de los cilios.

El principal problema con el que se encuentran todos estos ensayos es que se realizan en condiciones in vitro y no en el entorno natural de las células, donde la acidez (pH), la temperatura, los electrolitos, etc. pueden ser muy diferentes.

Además, las pruebas genéticas se limitan a las mutaciones que se sabe que causan PCD, lo que descarta las mutaciones aún no descubiertas.

Por lo tanto, se necesita un método para medir inequívocamente el movimiento ciliar en el entorno natural.

Meta

1. Evaluación de una cámara de video de alta velocidad con fuente de luz verde para la medición de la frecuencia de batido ciliar (CBF) en las vías respiratorias nasales de los pacientes.
2. Evaluaciones del efecto de fármacos y otras terapias sobre el FSC utilizando el sistema de estudio.

Métodos El protocolo ha sido aprobado por la Junta de Revisión Institucional (IRB) local del Centro Médico Hadassah, Jerusalén, Israel

Equipo:

1. Microscopio de video de alta velocidad construido según las especificaciones necesarias para este estudio basado en un sistema de video de alta velocidad disponible comercialmente.
2. La fuente de luz verde (LED) utilizada consta de un punto de 3 mm de diámetro y tiene una energía de 10 milivatios (igual a 1 kilovatio/metro cuadrado)
3. Cámara de video (fabricada por SONY Inc, Japón)

Pacientes:

A los pacientes remitidos para biopsia por cepillado ciliar se les pedirá que firmen el consentimiento informado y que se inscriban en el estudio.

Los pacientes serán examinados colocando una cámara de video digital de alta velocidad cerca de la cavidad nasal para fotografiar el área de interés. La lente de la cámara estará desenfocada y se registrará la luz reflejada de la mucosa nasal. Este registro de luz reflejada se analizará para obtener el FSC, la frecuencia cardíaca y la frecuencia respiratoria.

Luego del registro se procederá a la biopsia ciliar por cepillado nasal. Las células serán analizadas por un CBF que se calculará a partir de varias áreas del frotis.

Medidas de seguridad:

Todos los pacientes participantes llevarán una cubierta protectora sobre los ojos durante la fotografía.