LoViReT (pacientes tratados con reservorio viral bajo) (LoViReT)

La terapia antirretroviral combinada (cART) tiene un gran éxito en la supresión de la replicación del VIH-1 y la progresión clínica en pacientes infectados. Sin embargo, no impide el establecimiento de reservorios virales, generando células infectadas de forma latente que provocan un rápido rebote de la viremia del VIH tras la interrupción del tratamiento. Durante los últimos años se han sugerido diferentes estrategias para abordar los reservorios de VIH-1 con un éxito limitado. De hecho, los pocos casos descritos de cura funcional del VIH-1 se encuentran en controladores de élite y postratamiento. Así, algunos pacientes con progresión regular del VIH pueden controlar la replicación espontáneamente, la mayoría de ellos después de recibir cART durante la infección primaria por VIH-1. De hecho, el "bebé Mississippi", que fue tratado 36 horas después del nacimiento, había mantenido una viremia indetectable durante 27 meses después de la interrupción del tratamiento. Recientemente, también se ha demostrado en pacientes tratados con éxito que un reservorio proviral bajo se relaciona con un mejor control del VIH-1 después de la interrupción del tratamiento. Así, la identificación de pacientes con menor reservorio latente en infección crónica permitirá desvelar posibles mecanismos para lograr una cura funcional tras la retirada del TARc.

Nuestro centro de Badalona destina una colección de muestras biológicas que contiene 72.000 ejemplares de sujetos infectados por el VIH-1. Las muestras de 319 pacientes sometidos a cART de supresión durante más de 3 años se examinaron utilizando la plataforma de reacción en cadena de la polimerasa digital de gotas BioRad de alta sensibilidad (ddPCR). Entre los pacientes evaluados, se estableció una cohorte de 20 pacientes "tratados con reservorio viral bajo" (LoViReT) con niveles de ADN del VIH-1 extremadamente bajos o indetectables a pesar de haber iniciado cART durante la infección crónica por VIH-1, que se espera que aumentar hasta 40 pacientes. Descubrir los factores que reducen el reservorio de VIH y hacen que los pacientes de LoViReT mantengan niveles extremadamente bajos de ADN proviral del VIH-1 abrirá nuevas estrategias de tratamiento basadas en mantener el reservorio en los niveles más bajos además del marcador clínico regular de carga viral. Además, se puede diseñar un segundo paso adicional de interrupción controlada del cART para evaluar el impacto real de albergar niveles extremadamente bajos de reservorio latente para una mayor cura funcional del VIH.

Para desentrañar los mecanismos por los que la cohorte LoViReT mantiene niveles extremadamente bajos de ADN del VIH-1 a pesar de haber iniciado cART durante la infección crónica por VIH-1, esta cohorte se estudiará desde diferentes puntos de vista. Todos los resultados se compararán con un grupo de control de 40 personas con niveles estándar de ADN de VIH total (reservorio). Se abordarán tres objetivos principales para luego extrapolar nuestros resultados a poblaciones más grandes con infección crónica por VIH-1:

• Investigar el papel de cART en la supresión del reservorio de VIH en los pacientes LoViReT, en comparación con los controles. Para abordar este objetivo, se realizará un análisis longitudinal del ADN del VIH proviral para cada paciente, incluidos los puntos de tiempo previos al TARc. En total, se analizarán 200 muestras y se construirán modelos dinámicos para los dos niveles diferentes de establecimiento del embalse. El fenotipo inmunitario general de las poblaciones celulares, incluidos también los marcadores de activación, también se evaluará en todos los puntos temporales.
• Investigar la integridad de las secuencias del VIH en los pacientes LoViReT y su relación con la patogenia, en comparación con los controles. El tropismo genotípico del VIH y el genoma viral completo se analizarán mediante la secuenciación del ADN de las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de los pacientes. Se tomarán muestras de sangre fresca de los 40 LoViReT y 40 pacientes de control en el estudio. Además, para aquellos que ejerzan la producción de virus, se utilizarán aislados virales para analizar la capacidad de replicación viral y la patogénesis celular.
• Investigar el papel de los factores inmunogenéticos que junto con el TARc contribuyen a reducir los reservorios de VIH en los pacientes LoViReT. La respuesta funcional de las células T se medirá aislando las células T CD8 y midiendo la capacidad de inhibición de la replicación del VIH en cada paciente. La producción específica de interferón de células T CD8 relacionadas con el VIH también se evaluará bajo el estímulo del epítopo. También se explorarán otros factores genéticos asociados a la progresión como el tipo de antígeno leucocitario humano (HLA) y los polimorfismos de nucleótido único (SNP) CCR5, CCR2 y SIGLEC-1.