Habituación del reflejo de parpadeo nociceptivo en el ataque de migraña inducido experimentalmente

Este es un estudio de intervención, aleatorizado, cruzado y doble ciego controlado con placebo. Los sujetos inscritos participarán en dos sesiones de estudio (V1 y V2, respectivamente) colocadas con al menos una semana de diferencia.

Está prevista una primera visita de cribado (V0), durante la cual se recogerán los datos clínico-demográficos, se realizará una exploración neurológica y objetiva completa a los pacientes y se realizará un ECG para descartar patologías cardiacas mayores. Los pacientes que cumplan con los criterios de inclusión/exclusión continuarán con las siguientes sesiones de estudio (V1 y V2). Durante V1 y V2 los sujetos deben estar en la fase intercrítica de la enfermedad, es decir, libres de dolor de cabeza y sin analgésicos en las 48 horas previas.

Primera sesión de estudio (V1):

Al inicio del estudio (T0), se administrarán escalas de evaluación de la enfermedad (MIDAS, HIT-6, ASC-12, MSQ, BDI, STAI) y se realizará la primera sesión de prueba electrofisiológica (reflejo de parpadeo nociceptivo -nBR) junto con la primera muestra de sangre de un catéter venoso periférico colocado en la vena antecubital.

Al final de la evaluación inicial, los sujetos serán aleatorizados en dos grupos para recibir, durante la primera de las dos sesiones, NTG (0,5 μg/kg/min intravenoso en 20 minutos) o placebo (solución salina intravenosa en 20 minutos) vía bomba de infusión.

Luego, los sujetos serán monitoreados en el hospital durante 4 horas después de la infusión de NTG (fase hospitalaria) y luego serán dados de alta con la indicación de llevar un diario de dolor de cabeza durante otras 8 horas (12 horas de observación general). Al final de las 4 horas de observación hospitalaria, el investigador o el paciente pueden decidir ampliar el período de observación en función de la posible aparición de efectos adversos o en cualquier caso según sea necesario.

A partir de la infusión se evaluará cada diez minutos la aparición de la cefalea y las características asociadas (náuseas, vómitos, fotofobia, fonofobia, localización del dolor, calidad del dolor, agravamiento con la tos, intensidad), así como la presencia de otros síntomas o eventos adversos. Los parámetros vitales (presión arterial, frecuencia cardíaca) se controlarán cada 5 minutos durante la infusión, luego cada 10 minutos durante toda la observación en el hospital. Se realizarán mediciones de signos vitales adicionales según la necesidad clínica o la tendencia.

Después de 2 horas (T1) y 4 horas (T2) desde el final de la infusión de NTG/placebo, se repetirán las evaluaciones electrofisiológicas y las muestras de sangre, y se administrará la escala de evaluación para alodinia (ASC-12).

En sujetos en los que el ataque de migraña inducido vaya a aparecer dentro de la fase de observación hospitalaria (4 horas), se administrará sumatriptán 6 mg por vía subcutánea. 1 hora después de la administración de sumatriptán, se repetirá la evaluación electrofisiológica de la nBR y la toma de sangre después de (TS).

Segunda sesión de estudio (V2):

Los pacientes regresarán al centro para la segunda sesión (V2) del estudio al menos una semana después de la primera sesión. La segunda sesión será completamente similar a la primera, los pacientes recibirán placebo (solución salina intravenosa en 20 minutos) o NTG (0,5 μg/kg/min intravenoso en 20 minutos) en cruce según la lista de aleatorización.

Se especifica que, para las mujeres, se realizará una prueba de embarazo en orina antes de cada sesión de estudio.

Se informará al paciente que puede surgir dolor de cabeza durante la prueba, pero no se compartirá información sobre el posible curso después de NTG/placebo para evitar romper el ciego.

Procedimiento de registro NBR:

La respuesta R2 de nBR se evaluará utilizando un electrodo concéntrico plano (Bionen, Florencia, Italia), colocado 10 mm por encima de la emergencia del nervio supraorbitario. Para cada sujeto se elegirá el lado preferencial de localización del dolor de las crisis de migraña, alternativamente se utilizará el lado derecho. Parámetros de estimulación: estimulación monopolar única, duración 0,3 ms, filtro de banda: 3 Hz a 3 kHz, frecuencia de registro: 2,5 kHz, tiempo de análisis: 200 ms, sensibilidad: 100 mV.

El registro electromiográfico de superficie (CED Powerlab 1401, Cambridge Electronic Design) se realizará a nivel del músculo orbicularis oculi a través de un par de electrodos de superficie, el electrodo de referencia en el lateral del ojo, el electrodo de registro en el punto medio del párpado inferior. Se utilizará un aumento progresivo en la intensidad de la estimulación (0,3 mA a la vez) para evaluar el umbral del reflejo (RT = umbral del reflejo), definido como una respuesta presente de forma estable a al menos 3 estimulaciones. Para evaluar la habituación de nBR, se administrarán 26 estímulos consecutivos a diferentes frecuencias de estímulo, según un orden aleatorio (0,2, 0,3, 0,5 Hz), con una intensidad de estimulación igual a 1,8 veces el RT. De estas estimulaciones, la primera se eliminará del análisis para eliminar la respuesta de sobresalto. Los 25 registros electromiográficos se recogerán en 5 bloques, y para cada bloque se calcularán los valores del área bajo la curva de amplitud (AUC, ms * mV). El cambio porcentual en el AUC del último bloque, en comparación con el primero, representa el valor del "índice de habituación" (HI).

Panel bioquímico:

• Niveles plasmáticos de citocinas pro y antiinflamatorias (TNF-alfa, IL-1beta, IL-6, IL-4, IL-10) mediante análisis ELISA de última generación
• Niveles plasmáticos de ácido quinolínico, mediante espectrometría de masas;
• Niveles plasmáticos de CGRP, PACAP, VIP a través de kits ELISA disponibles comercialmente.
• Expresión génica de las citocinas mencionadas anteriormente y microARN específicos (mir-155, mir-382, mir-34a, mir-30a) y MALAT1 mediante método RT-PCR.