Habituação do Reflexo Nociceptivo de Piscar em Ataque de Enxaqueca Induzido Experimentalmente

Este é um estudo intervencional, randomizado, cruzado e duplo-cego controlado por placebo. Os indivíduos inscritos participarão de duas sessões de estudo (V1 e V2, respectivamente) com pelo menos uma semana de intervalo.

Está prevista uma primeira visita de rastreio (V0), durante a qual serão recolhidos os dados clínico-demográficos, os doentes serão submetidos a um exame neurológico e objetivo completo e será realizado um ECG para excluir patologias cardíacas major. Os pacientes que atenderem aos critérios de inclusão/exclusão continuarão com as sessões de estudo subsequentes (V1 e V2). Durante V1 e V2 os sujeitos devem estar na fase intercrítica da doença, ou seja, sem cefaléia e sem drogas analgésicas nas últimas 48 horas.

Primeira sessão de estudo (V1):

Na linha de base (T0), serão aplicadas as escalas de avaliação da doença (MIDAS, HIT-6, ASC-12, MSQ, BDI, STAI), e a primeira sessão de teste eletrofisiológico (reflexo nociceptivo do piscar -nBR) será realizada juntamente com a primeira amostra de sangue de um cateter venoso periférico posicionado na veia antecubital.

Ao final da avaliação basal, os sujeitos serão randomizados em dois grupos para receber, na primeira das duas sessões, NTG (0,5 μg/kg/min endovenoso em 20 minutos) ou placebo (soro fisiológico endovenoso em 20 minutos) via bomba de infusão.

Os indivíduos serão então monitorados no hospital por 4 horas após a infusão de NTG (fase hospitalar) e então liberados com a indicação de manter um diário de dor de cabeça por mais 8 horas (12 horas de observação geral). Ao final das 4 horas de observação hospitalar, o investigador ou o paciente pode decidir estender o período de observação com base na possível ocorrência de efeitos adversos ou em qualquer caso conforme necessário.

A partir da infusão, será avaliado a cada dez minutos o aparecimento da cefaléia e características associadas (náuseas, vômitos, fotofobia, fonofobia, localização da dor, qualidade da dor, agravamento com tosse, intensidade), bem como a presença de outros sintomas ou eventos adversos. Os parâmetros vitais (pressão arterial, frequência cardíaca) serão monitorados a cada 5 minutos durante a infusão e, a seguir, a cada 10 minutos durante toda a duração da observação intra-hospitalar. Medições adicionais de sinais vitais serão realizadas com base na necessidade ou tendência clínica.

Após 2 horas (T1) e 4 horas (T2) do término da infusão de NTG/placebo, serão repetidas as avaliações eletrofisiológicas e coletas de sangue, sendo aplicada a escala de avaliação de alodinia (ASC-12).

Em indivíduos nos quais o ataque de enxaqueca induzido aparecerá na fase de observação hospitalar (4 horas), a sumatriptana 6 mg será administrada por via subcutânea. 1 hora após a administração do sumatriptano, será repetida a avaliação eletrofisiológica do nBR e coleta de sangue após (TS).

Segunda sessão de estudo (V2):

Os pacientes retornarão ao centro para a segunda sessão (V2) do estudo pelo menos uma semana após a primeira sessão. A segunda sessão irá espelhar completamente a primeira, os pacientes receberão placebo (solução salina endovenosa em 20 minutos) ou NTG (0,5 μg/kg/min endovenoso em 20 minutos) em cross-over de acordo com a lista de randomização.

É especificado que, para indivíduos do sexo feminino, um teste de gravidez de urina será realizado antes de cada sessão de estudo.

O paciente será informado de que pode surgir dor de cabeça durante o teste, mas nenhuma informação será compartilhada sobre o possível curso após GTN / placebo para evitar quebra de blindagem.

Procedimento de registro da NBR:

A resposta R2 do nBR será avaliada usando um eletrodo concêntrico planar (Bionen, Florença, Itália), colocado 10 mm acima da emergência do nervo supraorbitário. Para cada sujeito, será escolhido o lado preferencial de localização da dor das crises de enxaqueca, em alternativa será utilizado o lado direito. Parâmetros de estimulação: estimulação monopolar única, duração 0,3 ms, filtro de banda: 3 Hz a 3 kHz, frequência de gravação: 2,5 kHz, tempo de análise: 200 ms, sensibilidade: 100 mV.

O registro eletromiográfico de superfície (CED Powerlab 1401, Cambridge Electronic Design) será realizado ao nível do músculo orbicularis oculi através de um par de eletrodos de superfície, sendo o eletrodo de referência na lateral do olho, o eletrodo de registro no ponto médio do pálpebra inferior. Um aumento progressivo na intensidade da estimulação (0,3 mA por vez) será usado para avaliar o limiar de reflexo (RT = limiar de reflexo), definido como uma resposta presente de forma estável a pelo menos 3 estimulações. Para avaliar a habituação do nBR, 26 estímulos consecutivos serão administrados em diferentes frequências de estímulo, de acordo com uma ordem aleatória (0,2, 0,3, 0,5 Hz), com intensidade de estimulação igual a 1,8 vezes o RT. Desses estímulos, o primeiro será removido da análise para eliminar a resposta de sobressalto. Os 25 registros eletromiográficos serão coletados em 5 blocos, e os valores da área sob a curva de amplitude (AUC, ms * mV) serão calculados para cada bloco. A variação percentual da AUC do último bloco, em relação ao primeiro, representa o valor do "índice de habituação" (HI).

Painel bioquímico:

• Níveis plasmáticos de citocinas pró e antiinflamatórias (TNF-alfa, IL-1beta, IL-6, IL-4, IL-10) por meio de uma análise ELISA de última geração
• Níveis plasmáticos de ácido quinolínico, por espectrometria de massa;
• Níveis plasmáticos de CGRP, PACAP, VIP por meio de kits ELISA disponíveis comercialmente.
• Expressão gênica das citocinas citadas acima e microRNAs específicos (mir-155, mir-382, mir-34a, mir-30a) e MALAT1 através do método RT-PCR.