Abituazione del riflesso di lampeggio nocicettivo nell'attacco di emicrania indotto sperimentalmente

Questo è uno studio interventistico, randomizzato, crossover e in doppio cieco controllato con placebo. I soggetti arruolati parteciperanno a due sessioni di studio (V1 e V2, rispettivamente) distanziate di almeno una settimana.

È prevista una prima visita di screening (V0), durante la quale verranno raccolti i dati clinico-demografici, i pazienti saranno sottoposti ad un esame neurologico ed obiettivo completo, ed eseguito un ECG per escludere patologie cardiache maggiori. I pazienti che soddisfano i criteri di inclusione/esclusione continueranno con le successive sessioni di studio (V1 e V2). Durante V1 e V2 i soggetti devono trovarsi nella fase intercritica della malattia, cioè liberi da cefalee e in assenza di farmaci analgesici nelle 48 ore precedenti.

Prima sessione di studio (V1):

Al basale (T0), verranno somministrate le scale di valutazione della malattia (MIDAS, HIT-6, ASC-12, MSQ, BDI, STAI) e verrà eseguita la prima sessione di test elettrofisiologico (riflesso di ammiccamento nocicettivo -nBR) insieme alla prima prelievo di sangue da un catetere venoso periferico posizionato nella vena antecubitale.

Al termine della valutazione di base, i soggetti saranno randomizzati in due gruppi per ricevere, durante la prima delle due sessioni, NTG (0,5 μg/kg/min per via endovenosa in 20 minuti) o placebo (soluzione salina per via endovenosa in 20 minuti) tramite pompa di infusione.

I soggetti verranno poi monitorati in ospedale per 4 ore successive all'infusione di NTG (fase ospedaliera) e poi dimessi con l'indicazione di tenere un diario della cefalea per ulteriori 8 ore (12 ore di osservazione complessiva). Al termine delle 4 ore di osservazione ospedaliera, lo sperimentatore o il paziente possono decidere di estendere il periodo di osservazione in base all'eventuale insorgenza di effetti avversi o comunque secondo necessità.

A partire dall'infusione, verrà valutata ogni dieci minuti l'insorgenza della cefalea e le caratteristiche associate (nausea, vomito, fotofobia, fonofobia, sede del dolore, qualità del dolore, aggravamento con la tosse, intensità) e la presenza di altri sintomi o eventi avversi. I parametri vitali (pressione arteriosa, frequenza cardiaca) saranno monitorati ogni 5 minuti durante l'infusione, poi ogni 10 minuti per tutta la durata dell'osservazione intraospedaliera. Ulteriori misurazioni dei segni vitali verranno eseguite in base alle esigenze o alle tendenze cliniche.

Dopo 2 ore (T1) e 4 ore (T2) dalla fine dell'infusione di NTG/placebo, verranno ripetute le valutazioni elettrofisiologiche e i prelievi di sangue, e verrà somministrata la scala di valutazione per l'allodinia (ASC-12).

Nei soggetti in cui l'attacco emicranico indotto si manifesterà entro la fase di osservazione ospedaliera (4 ore), verrà somministrato sumatriptan 6 mg per via sottocutanea. 1 ora dopo la somministrazione di sumatriptan, verrà ripetuta la valutazione elettrofisiologica del nBR e il prelievo di sangue dopo (TS).

Seconda sessione di studio (V2):

I pazienti torneranno al centro per la seconda sessione (V2) dello studio almeno una settimana dopo la prima sessione. La seconda sessione rispecchierà completamente la prima, i pazienti riceveranno placebo (soluzione salina per via endovenosa in 20 minuti) o NTG (0,5 μg/kg/min per via endovenosa in 20 minuti) in cross-over secondo l'elenco di randomizzazione.

Si precisa che, per i soggetti di sesso femminile, verrà effettuato un test di gravidanza sulle urine prima di ogni sessione di studio.

Il paziente verrà informato che durante il test potrebbe insorgere mal di testa, ma nessuna informazione verrà condivisa sul possibile decorso dopo NTG/placebo per evitare di rompere il cieco.

Procedura di registrazione NBR:

La risposta R2 di nBR sarà valutata utilizzando un elettrodo concentrico planare (Bionen, Firenze, Italia), posizionato 10 mm sopra l'emergenza del nervo sopraorbitario. Per ogni soggetto verrà scelto il lato preferenziale di localizzazione del dolore delle crisi emicraniche, in alternativa verrà utilizzato il lato destro. Parametri di stimolazione: stimolazione monopolare singola, durata 0,3 ms, filtro banda: da 3 Hz a 3 kHz, frequenza di registrazione: 2,5 kHz, tempo di analisi: 200 ms, sensibilità: 100 mV.

La registrazione elettromiografica di superficie (CED Powerlab 1401, Cambridge Electronic Design) sarà effettuata a livello del muscolo orbicolare dell'occhio attraverso una coppia di elettrodi di superficie, l'elettrodo di riferimento sul lato dell'occhio, l'elettrodo di registrazione sul punto medio del palpebra inferiore. Un progressivo aumento dell'intensità di stimolazione (0.3 mA per volta) servirà a valutare la soglia del riflesso (RT = reflex threshold), definita come una risposta stabilmente presente ad almeno 3 stimolazioni. Per valutare l'assuefazione all'nBR, verranno somministrati 26 stimoli consecutivi a diverse frequenze di stimolo, secondo un ordine casuale (0.2, 0.3, 0.5 Hz), con un'intensità di stimolazione pari a 1.8 volte la RT. Di queste stimolazioni, la prima verrà rimossa dall'analisi per eliminare la risposta di trasalimento. Le 25 registrazioni elettromiografiche saranno raccolte in 5 blocchi, e per ogni blocco verranno calcolati i valori dell'area sotto la curva di ampiezza (AUC, ms * mV). La variazione percentuale dell'AUC dell'ultimo blocco, rispetto al primo, rappresenta il valore di "indice di assuefazione" (HI).

Pannello biochimico:

• Livelli plasmatici di citochine pro e antinfiammatorie (TNF-alfa, IL-1beta, IL-6, IL-4, IL-10) attraverso un'analisi ELISA di ultima generazione
• Livelli plasmatici di acido chinolinico, mediante spettrometria di massa;
• Livelli plasmatici di CGRP, PACAP, VIP attraverso i kit ELISA disponibili in commercio.
• Espressione genica delle citochine sopra menzionate e di specifici microRNA (mir-155, mir-382, mir-34a, mir-30a) e MALAT1 mediante metodo RT-PCR.