Diammine hopeafluoridin farmakokinetiikka

Osallistujat Kuusi tervettä vapaaehtoista (4 naista, keski-ikä 36,2, vaihteluväli 23-52 vuotta) rekrytoitiin Universidad Católica de Santa Marían henkilöstöön Arequipa, Peru. Osallistujat eivät käyttäneet lääkkeitä ja heillä oli useimmat pysyvät hampaat. Osallistujia pyydettiin välttämään kalaa tai teetä 12 tuntia ennen tutkimusta ja olemaan käyttämättä fluorattua hammastahnaa 4 tuntia ennen tutkimusta. Comité de Etica de Investigacion, Universidad Católica de Santa María hyväksyi tutkimuksen ja siihen saatiin tietoinen suostumus.

Tutkimusagentti DSF [Ag(NH3)2F, CAS RN 33040-28-7, Saforide, Toyo Seiyaku Kasei Co. Ltd. Osaka, Japani] käytettiin. DSF on kirkas ja väritön, ja siinä on heikko ammoniakin haju. 38 % liuos sisältää 24,4-28,8 % (w/v) hopeaa (Ag) ja 5,0-5,9 % fluoridi (F). Ag:n ja F:n pitoisuudet tutkimuksessa käytetyssä DSF:ssä olivat 24,9 % ja 5,5 %, vastaavasti, ja ominaispaino oli 1,253 25 °C:ssa (analyysierän todistus nro 155060). Diamiinihopeafluoridia kutsutaan kirjallisuudessa myös hopeadiamiinifluoridiksi, hopeadiamiinifluoridiksi tai hopeafluoridiksi.

Toimenpiteet Käsiteltiin kolmea yläleuan hammasta (käski ja esihampaita) samassa kvadrantissa. Kolme hammasta hoidettiin, koska tämä oli aikuisilla tehdyssä epidemiologisessa tutkimuksessa ilmoitettu keskimääräinen herkkien hampaiden lukumäärä [5]. Hampaissa ei ollut täytteitä tai kavitaatiota. Kasvojen pinta kuivattiin puuvillaharsolla ja sitten DSF levitettiin kunkin hampaan kohdunkaulan alueelle. Hampaat eristettiin, jotta harja ei kastuisi syljestä. Jokainen hammas päällystettiin käyttämällä erillistä mikroharjaa, joka kastettiin DSF:ään ja punnittiin ennen ja jälkeen levityksen (malli S2000, Kern & Sohn GmbH, Balingen, Saksa). Käytetyn materiaalin painoerojen summa laskettiin kullekin osallistujalle.

Verenotto Välittömästi ennen DSF:n levittämistä ja sitten uudelleen noin 30 minuuttia, 1, 2, 3 ja 4 tuntia levityksen jälkeen, verta otettiin ääreislaskimosta. Ajanjaksot valittiin aiemman fluoridilakan farmakokineettisen tutkimuksen perusteella [6]. Veri siirrettiin fluorivapaaseen muoviseen Vacutainer-putkeen, jossa oli hyytymisaktivaattori (BD Vacutainer Plus Plastic Serum Tube, BD Diagnostics, New Jersey). Putkia sentrifugoitiin 1100 g:lla 10 minuuttia ja seerumi siirrettiin muovipipetillä muovisiin kryogeenisiin putkiin. Näytteet pakastettiin ja kuljetettiin Washingtonin yliopistoon analysoitavaksi.

Analyysi Fluori. Näytteet sulatettiin ja analysoitiin kahtena tai kolmena rinnakkaisena käyttämällä diffuusio- ja detektiomenetelmää heksametyylidisiloksaanilla (HMDS) ja Orion F-herkällä elektrodilla [7-8]. Havaitsemisen parantamiseksi esidiffuusiovaihe jätettiin pois [9] ja tiivistykset suoritettiin loppuun ennen kuin sekoitettiin 1 ml seerumia 1 ml:aan HMDS:ää, kyllästettyä 3 M H2SO4:ää [10]. Pystyliuos oli 20 umol 1 M NaOH. Se kuivattiin haihtumisen ja jäännös-HMDS:n vaihtelun poistamiseksi ennen kuin lisättiin 100 ui 3 M etikkahappoa lopulliseen pH-arvoon 3,4. Standardit olivat 10 ja 100 uM fluoridia samassa lopullisessa NaOH:n ja etikkahapon konsentraatiossa, joka vastasi 1 ja 10 uM F näytteissä. ORION F ja holkkityyppiset vertailuelektrodit kytkettiin Accumet Basic 0,1 mV -mittariin (Thermo Fisher Scientific, Milwaukee WI).

Vacutainers testattiin fluoridin suhteen lisäämällä naudan plasmaa 2 putkeen ja antamalla niiden seistä yön yli ennen kuin 2 näytettä yhdistettiin ja niitä verrattiin plasmaan, joka laitettiin suoraan diffuusiomaljoihin. Keskimääräiset pitoisuudet (μM±SD) olivat 0,34 ± 0,014 ja 0,32±0,012, vastaavasti. Siksi alle 2 % F seeruminäytteissä tuli Vacutainersilta ja hyytymisen tehostajalta. Naudan seerumiin lisätyn 1 nmoolin/ml F:n saanto (keskiarvo ± SD) oli 101 ± 4 %. Fluoritasoista laskettiin keskiarvo ja ne ilmaistaan ​​uM:na.

Hopea. Näytteet sulatettiin ja analysoitiin käyttämällä induktiivisesti kytkettyä plasmamassaspektrometriaa (EPA 6020a Rev.1 2007). Seerumi (0,5 ml) lisättiin 2 ml:aan laimealla hapolla (lopullinen konsentraatio: 2 % HCl, 1 % HNO3; hivenmetallilaatu, Fisher, Fairlawn, NJ). Näytteitä sentrifugoitiin (1290 g) 10 minuuttia ja suodatettiin (0,45 um, PTFE; kaikki polypropeeniruisku) 15 ml:n polypropeenisentrifugiputkiin. Näytteet analysoitiin Agilent 7500CE (Santa Clara, CA) induktiivisesti kytketyllä massaspektrometrillä (ICPMS), jossa oli törmäyskennokaasu, ja ASX-510 autosamplerilla (CETAC, Omaha, NB). Käytettiin Micromist-sumutinta (Glass Expansion, Pocasset, MA) (1,15 l/min kantokaasua; ei lisäkaasua). Suihkukammion lämpötila oli 2°C. RF-teho oli 1500 W. Ag määritettiin käyttämällä Y:tä sisäisenä standardina. Kalibrantit laimennettiin 2-prosenttisella HCl:lla ja 1-prosenttisella HNO3:lla, jotka oli valmistettu kaupallisista ICPMS-laatuisista liuoksista (Ultra Scientific, N. Kingstown, RI; BDH Aristar, VWR, Radnor, PA) ja vaihtelivat välillä 0,5-50 ng/ml. Kalibrointi suoritettiin painotetulla (1/cps) lineaarisella regressiolla. Tiedot korjattiin tyhjällä menettelyllä. Hopean arvot alle 2 ng/ml koodattiin uudelleen 2:ksi. Hopeapitoisuudet ilmaistaan ​​yksikköinä ng/ml.

Pehmytkudosten arviointi Ienet DSF:n levittämisen vieressä ja limakalvo havaittiin yleensä lähtötilanteessa ja 24 tuntia hoidon jälkeen. Punoitus, verenvuoto, valkoiset muutokset, haavaumat ja pigmentaatio arvioitiin aikaisempaa tutkimusta varten kehitetyillä menetelmillä [1].