Farmacocinética del fluoruro de plata diamina

Participantes Seis voluntarios sanos (4 mujeres, edad media 36,2, rango 23-52 años) fueron reclutados entre los miembros del personal de la Universidad Católica de Santa María, Arequipa, Perú. Los participantes no tomaban medicamentos y tenían la mayoría de los dientes permanentes presentes. Se pidió a los participantes que evitaran el pescado o el té durante 12 horas antes del estudio y que no usaran pasta dental con flúor 4 horas antes. El Comité de Ética de Investigación de la Universidad Católica de Santa María aprobó el estudio y se obtuvo el consentimiento informado.

Agente de estudio DSF [Ag(NH3)2F, CAS RN 33040-28-7, Saforide, Toyo Seiyaku Kasei Co. Ltd. Se utilizó Osaka, Japón]. DSF es transparente e incoloro, con un débil olor a amoníaco. La solución al 38% contiene entre 24,4-28,8% (p/v) plata (Ag), y 5,0-5,9% fluoruro (F). Las concentraciones de Ag y F en el DSF utilizado para el estudio fueron 24,9 % y 5,5 %, respectivamente, y la gravedad específica fue 1,253 a 25 °C (certificado de análisis, lote n.º 155060). El fluoruro de diamina de plata también se denomina en la literatura como fluoruro de diamina de plata, fluoruro de diamina de plata o fluoruro de plata.

Procedimientos Se trataron tres dientes maxilares (cúspides y premolares) en el mismo cuadrante. Se trataron tres dientes porque este era el número promedio de dientes sensibles reportados en un estudio epidemiológico de adultos [5]. Los dientes estaban libres de restauraciones o cavitación. La superficie facial se secó con gasa de algodón y luego se aplicó DSF en el área cervical de cada diente. Se aislaron los dientes para evitar mojar el cepillo con saliva. Cada diente se recubrió con un microcepillo separado, que se sumergió en el DSF y se pesó antes y después de la aplicación (Modelo S2000, Kern & Sohn GmbH, Balingen, Alemania). Para cada participante se calculó la suma de las diferencias de peso del material aplicado.

Recolección de sangre Inmediatamente antes de la aplicación de DSF y luego nuevamente aproximadamente 30 min, 1, 2, 3 y 4 h después de la aplicación, se extrajo sangre de una vena periférica. Los períodos de tiempo se eligieron en base a un estudio farmacocinético previo del barniz de fluoruro [6]. La sangre se transfirió a un tubo Vacutainer de plástico libre de fluoruro con activador de coágulos (BD Vacutainer Plus Plastic Serum Tube, BD Diagnostics, New Jersey). Los tubos se centrifugaron a 1100 g durante 10 min y el suero se transfirió con una pipeta de plástico a tubos criogénicos de plástico. Las muestras fueron congeladas y transportadas a la Universidad de Washington para su análisis.

Análisis Fluoruro. Las muestras se descongelaron y analizaron por duplicado o triplicado utilizando el método de difusión y detección con hexametildisiloxano (HMDS) y electrodo sensible a Orion F [7-8]. Para mejorar la detección, se omitió el paso de predifusión [9] y se completaron los sellos antes de mezclar 1 ml de suero con 1 ml de HMDS, H2SO4 3 M saturado [10]. La solución de captura fue de 20 µmoles de NaOH 1 M. Se secó para eliminar la variabilidad de la evaporación y el HMDS residual antes de agregar 100 µl de ácido acético 3 M hasta un pH final de 3,4. Los estándares fueron fluoruro 10 y 100 µM en la misma concentración final de NaOH y ácido acético correspondiente a F 1 y 10 µM en las muestras. Los electrodos de referencia ORION F y tipo manguito se acoplaron con un medidor Accumet Basic de 0,1 mV (Thermo Fisher Scientific, Milwaukee WI).

Se analizó el fluoruro de los Vacutainers agregando plasma bovino a 2 tubos y dejándolos reposar durante la noche antes de combinar las 2 muestras y compararlas con el plasma colocado directamente en placas de difusión. Las concentraciones promedio (μM±SD) fueron 0,34±0,014 y 0,32±0,012, respectivamente. Por lo tanto, menos del 2 % de F en las muestras de suero provino de los Vacutainers y el reforzador de coágulos. La recuperación (media ± DE) de 1 nmol/ml de F añadido al suero bovino fue del 101 ± 4 %. Los niveles de fluoruro se promediaron y se expresan como µM.

Plata. Las muestras se descongelaron y analizaron mediante espectrometría de masas de plasma acoplado inductivamente (EPA 6020a Rev.1 2007). El suero (0,5 ml) se llevó a 2 ml con ácido diluido (concentración final: HCl al 2 %, HNO3 al 1 %; trazas de metal, Fisher, Fairlawn, NJ). Las muestras se centrifugaron (1290 g) durante 10 min y se filtraron (0,45 µm, PTFE; todas jeringas de polipropileno) en tubos de centrífuga de polipropileno de 15 ml. Las muestras se analizaron en un espectrómetro de masas de acoplamiento inductivo (ICPMS) Agilent 7500CE (Santa Clara, CA) con He como gas de celda de colisión y un inyector automático ASX-510 (CETAC, Omaha, NB). Se utilizó un nebulizador Micromist (Glass Expansion, Pocasset, MA) (1,15 l/min de gas portador; sin gas auxiliar). La temperatura de la cámara de pulverización era de 2ºC. La potencia de RF fue de 1500 W. La Ag se cuantificó utilizando Y como patrón interno. Los calibradores se diluyeron con HCl al 2 % y HNO3 al 1 % preparados a partir de soluciones comerciales de grado ICPMS (Ultra Scientific, N. Kingstown, RI; BDH Aristar, VWR, Radnor, PA) y oscilaron entre 0,5 y 50 ng/ml. La calibración se realizó mediante regresión lineal ponderada (1/cps). Los datos fueron corregidos por procedimiento en blanco. Los valores de plata inferiores a 2 ng/mL se recodificaron como 2. Las concentraciones de plata se expresan como ng/mL.

Evaluación de los tejidos blandos La encía adyacente a la aplicación de DSF y la mucosa en general se observaron al inicio y 24 horas después del tratamiento. El eritema, el sangrado, los cambios de blanco, la ulceración y la pigmentación se evaluaron utilizando métodos desarrollados para un estudio anterior [1].