Endoteliini-1:n rooli sirppisolutaudissa

Tämän tutkimuksen tarkoituksena on testata hypoteesia, jonka mukaan endoteliiniantagonisti (ETA) -reseptorin salpaus ambrisentaanilla on turvallinen, siedettävä ja parantaa munuaisten toimintaa/albuminuriaa potilailla, joilla on sirppisolusairaus (SCD). Tutkijat odottavat proteinurian vähenemistä, kolmikulmaisen regurgitaatiosuihkun (TRJ) nopeuden vähenemistä, tulehdusmerkkien vähenemistä, kyynärvarren verenkierron paranemista ja nosiseption/kivun paranemista.

Ensisijaiseksi tehon päätetapahtumaksi valittiin ETA-reseptorin salpauksen vaikutus mikroalbuminuriaan vähentämään diabeettista nefropatiaa, jolla on samanlainen patogeneesi kuin sirppinefropatialla. Proteinurian 30 %:n väheneminen on melko varovaista ja realistista perustuen ETA-reseptorin salpaamiseen liittyvien tutkimusten tuloksiin diabeettisessa nefropatiassa, jotka johdonmukaisesti johtivat proteinurian vähenemiseen 40-45 %. Prekliiniset tiedot ovat osoittaneet, että muutoksia voidaan havaita virtsan nefriinin erittymisessä ennen kuin havaitaan selvä proteinuria kroonisen ET-1:n nousun mallissa. Lisäksi tubulusvaurion, joka voi ilmetä munuaisensisäisen vaso-okklusiivisen kriisin (VOC) seurauksena, pitäisi odottaa lisäävän munuaistiehyiden vauriomarkkerien, neutrofiilien gelantinaaseihin liittyvän lipokaliinin (NGAL) ja munuaisvauriomolekyylin 1:n (KIM- 1) ja netrin. Ambrisentaanihoidon odotetaan heikentävän näitä muutoksia. Tri Jennifer Pollockilla on laaja kokemus kaikista biomarkkerimäärityksistä, mukaan lukien ET-1. Tri Pollock johtaa bioanalyyttisiä ydinlaboratorioita kahdelle PO1:lle ja on julkaissut laajasti näistä ja vastaavista menetelmistä ihmis- ja eläinnäytteissä.

Tämän projektin lisäperusteet perustuvat viimeaikaisiin 24 tunnin virtsatuloksiin kreatiniinin puhdistuman ja proteiinin kokonaiserityksen osalta 97 potilaalta, joilla oli sirppisoluanemia (Hb SS) ja sirppi beetatalassemia (SB0-talassemia), joita seurattiin Augustan sirppisoluklinikalla. Näiden potilaiden ikä vaihteli välillä 19-63 vuotta (52 naista, 45 miestä). Näistä 17:llä (18 %) oli mikroalbuminuria, joka määritellään 24 tunnin albumiinin erittymisenä 150-300 mg, 34:llä (36 %) oli makroalbuminuria (> 300 mg albumiinin erittyminen/24 tuntia), eli 54 %:lla potilaista. oli mikroalbuminuria tai makroalbuminuria ja vain 46 % oli normoalbuminuria. 58 potilasta (58 %) sai kroonista hydroksiureahoitoa. 9 potilasta sai angiotensiinikonvertaasin estäjiä (ACEi) ja 20 potilasta angiotensiinireseptorin salpaajia (ARB:t) (yhteensä 30 %). 55 potilaalla (57 %) oli glomerulusten hyperfiltraatio (kreatiniinipuhdistuma > 120 ml/min). Havaittiin ikään liittyvää glomerulusfiltraationopeuden (GFR) laskua. Normoalbuminuriapotilaiden määrä osoittaa jyrkkää laskua iän mukaan, mikä viittaa sirppinefropatian etenemiseen. Viimeaikaiset tutkimukset kivuista SCD:ssä ovat johtaneet muutokseen käsityksessä. Noin 50 % potilaista ilmoitti kokevansa päivittäistä kroonista kipua. Lisäksi keskittymiseen ja neuropaattiseen kipuun liittyvät ongelmat tässä potilaspopulaatiossa ovat alkaneet saada yhä enemmän huomiota. Suuri joukko todisteita viittaa siihen, että endoteliini-1:llä on tärkeä rooli kipuärsykkeiden ja nosiseption tehostamisessa erilaisissa olosuhteissa. Tätä välittää ETA-reseptori. Berkeley SCD-siirtogeenisillä hiirillä on hyperalgesiaa, kuten tavoitteen 2 alustavassa osassa esitetään, ja ETA-reseptorin salpaus kääntää tämän hyperalgesian kohti normaalia. Osana meneillään olevaa National Institute on Minority Health and Health Disparities (NIMHD) rahoittamaa kipua ja sen geneettisiä korrelaatioita koskevaa tutkimusta (tutkimuksen viite: 1 P20 MD003383-01) tutkijat ovat havainneet, että SCD-potilailla on merkittävää hyperalgesiaa painekivulla mitattuna. algometritestaus. Testaus tehtiin kolmessa eri anatomisessa kohdassa potilailla (n = 38) ja kontrolleilla (n = 20), ja se osoitti, että SCD-potilaat havaitsivat kipua merkittävästi alhaisemmilla paineilla verrattuna kontrolliin (masseter: 157,7 kilopascal (kPa) potilailla, 214,4 kPa kontrolleilla, p = 0,017, kyynärluu: 299,1 kPa potilailla, 477,5 kPa kontrolleilla, p = 0,0018 ja trapetsi: 290,1 kPa potilailla, 462,8 kPa kontrolleilla, p = 0,02). Nämä tiedot viittaavat siihen, että hyperalgesiaa esiintyy suurimmalla osalla SCD-potilaista, ja se muodostaa objektiivisen parametrin, jota seurataan tutkimuksen aikana.

Protokollan edellyttämät arvioinnit, jotka suoritetaan jokaisella tutkimuskäynnillä, sisältävät: fyysisen kokeen, elintoiminnot, huijauslääkityksen tarkastuksen, tutkimuslääkkeen vastuullisuuden, haittatapahtumien tarkastelun, kipupäiväkirjan täyttämisen ja raskaustestin tarvittaessa.

Protokollan edellyttämät arvioinnit, jotka suoritetaan tietyillä tutkimuskäynneillä, sisältävät: veren ja virtsan keräämisen turvallisuuden ja tehon testaamista varten; elektrokardiogrammi (EKG); kaikukardiogrammi (kaiku); Kvantitatiivinen aistinvarainen testaus (painekipukynnys algometrin avulla, ihon mekaaninen kipu monofilamentin avulla ja lämpötestaus Q-Sense Small Fiber Testin avulla); transkraniaalinen Doppler (TCD); kyynärvarren verenvirtauksen mittaus; ihon verenvirtauksen mittaus; ja elämänlaatukyselyiden täyttäminen.

Menettelyjen kuvaus:

Sensorinen testaus: Potilaille tehdään myös aistinvarainen testaus lähtötilanteessa ja tutkimusjakson lopussa. Sensorinen testaus sisältää: 1) Painekipukynnys mitataan kädessä pidettävällä digitaalisella algometrillä Fillingim et al:n kuvaamalla tavalla kolmesta eri anatomisesta kohdasta: oikean ylemmän puolisuunnikkaan keskikohdasta, oikeasta pureskelusta ja oikeasta kyynärluusta; 2) Ihon mekaanisen kivun testaus – Mekaanisen kivun ajallisen summauksen arviointi tehdään käyttämällä nailonmonofilamentteja, jotka on testattu käden selässä.; ja 3) Lämpöaistin testaus suoritetaan käyttämällä Q-Sense Small Fiber Test -testiä, joka tarjoaa tieteellisesti validoidun lämmön, viileyden ja lämpökipun lämpösensorin kynnysarvot.

Kipupäiväkirjat/kyselylomakkeet: Potilaita pyydetään täyttämään päivittäinen kipupäiväkirja PISCES-tutkimuksessa kuvatulla tavalla. Kipupäiväkirjojen arvioinnin tekevät tri Robert Gibson ja tutkimushenkilöstö. Lisäksi tutkijat sisällyttävät myös kaksi pre/post-mittausta, jotka tutkivat kivun vaikutuksia toimintakykyyn ja elämänlaatuun. Assessment of Motor and Process Skills (AMPS) on vakiintunut toiminnallinen arviointi. Tämä arviointi on osoittanut kyvyn erottaa terveet kontrollit ja ne, joilla on laajalle levinnyt krooninen kipu. Se osoittaa myös kyvyn mitata muutosta puuttumisen jälkeen. Tutkijat mittaavat myös potilaan elämänlaatua aikuisten sirppisolujen elämänlaadun mittaustietojärjestelmällä (ASCQ-Me). Tämä elämänlaadun arviointi on kehitetty erityisesti sirppisolupopulaatioita varten. Tohtori Robert Gibsonilla on koulutus ja kokemus ASCQ-Me:stä, ja hänellä on pätevyys hallita AMPS:ää.

Kaikukardiogrammi kolmikulmaisen regurgitaatiosuihkun (TRJ) nopeuden mittaamiseksi: TRJ:n nopeuden ja keuhkovaltimon systolisen paineen mittaamiseksi tehdään rintakehän kaikukuvaus lähtötilanteessa (ellei sitä saada kliinisesti 6 kuukauden sisällä päivästä 1) ja tutkimuksen lopussa.

Elektrokardiogrammi: Elektrokardiogrammi (EKG) on testi, joka mittaa sydämen sähköistä aktiivisuutta. EKG tehdään turvallisuustoimenpiteenä lähtötilanteessa, 8. päivän käynnillä ja tutkimuksen lopussa, vaikka ambrisentaanin ei tiedetä pidentävän korjattua QT-aikaa (QTc).

Kyynärvarren verenvirtauksen mittaus: Brachial valtimon virtausvälitteinen laajentuminen (FMD) suoritetaan äskettäisen suu- ja sorkkataudin ultraääniarvioinnin opetusohjelman mukaisesti. Potilaat testataan paasto-olosuhteissa kontrolloidussa ympäristössä lähtötilanteessa ja tutkimusjakson lopussa.

Ihon verenvirtauksen mittaus: Ihon verenvirtaus mitataan ei-invasiivisesti käyttämällä matalataajuista laserkuvauskameraa ja/tai pientä ihoanturia. Renkaanmuotoiset anturit, jotka ovat noin 1,5 tuumaa leveät, asetetaan kyynärvarteen teipillä. Yksi rengas täytetään noin 2 ml:lla (noin 1/2 teelusikallista) vettä paikallista lämpöä varten ja muita käytetään iontoforeesiin. Paikallista lämpöä varten tutkijat lämmittävät renkaassa olevan veden 42 °C:n ja 44 °C:n (111 °F) välille ja odottavat noin 30 minuuttia, jotta ihon verenvirtauksen lisääntyminen tasaantuu. Iontoforeesi on tekniikka, joka antaa vasoaktiivista lääkettä noin 1 mm syvälle ihoon matalalla sähkövirralla. Tämän tekniikan etuna on, että se on ei-invasiivinen ja lääkeaine ei mene kehoon, se vain jää ihon pinnalle. Käytämme joko asetyylikoliinin, natriumnitroprussidin tai N-nitro-L-arginiinimetyyliesterin (L-NAME) 1-2-prosenttista liuosta (vasoaktiivisia aineita) lisäämään tai vähentämään ihon verenkiertoa. Useita oikosulkuvirtoja (10-180 sekuntia) suoritetaan noin minuutin välein. Tutkijat seuraavat ihon verenkiertoa renkaan läpi edellä kuvatun kyynärvarren valtimoverenkiertotestin aikana sekä paikallisen lämmön ja iontoforeesin aikana.

Veren ja virtsan mittaus: Turvallisuuden/tehokkuuden arvioimiseksi määrätyillä tutkimuskäynneillä suoritettavat laboratoriotestit sisältävät täydellisen verenkuvan (CBC), täydellisen metabolisen paneelin (CMP), pistevirtsan albumiinin ja kreatiniinin suhteen, 24 tunnin virtsan, raskaustestin, biomarkkerit ja tulehdusmerkit.

Transkraniaalinen Doppler (TCD): Ennen hoitoa ja sen jälkeen suoritetaan TCD aivoverenvirtauksen nopeuden arvioimiseksi. Tämä ei-invasiivinen testi suoritetaan koehenkilön ollessa makuulla, ja siinä käytetään ääniaaltoja pään makroverenkierron arvioimiseksi. Anturia käytetään tulosten kuulemiseen ja tallentamiseen.