内皮素 1 在镰状细胞病中的作用

本研究的目的是检验以下假设：使用安立生坦阻断内皮素拮抗剂 (ETA) 受体是安全的、可耐受的，并且可以改善镰状细胞病 (SCD) 患者的肾功能/白蛋白尿。 研究人员预计蛋白尿会减少，三尖瓣反流射流 (TRJ) 速度会降低，炎症标志物会减少，前臂血流会改善，伤害感受/疼痛也会改善。

根据糖尿病肾病的发现，主要疗效终点被选为 ETA 受体阻断剂对减少微量白蛋白尿的影响，糖尿病肾病的发病机制与镰状肾病相似。 根据糖尿病肾病中 ETA 受体阻断剂的研究结果，蛋白尿减少 30% 是相当保守和现实的，该研究结果一致导致蛋白尿减少 40-45%。 临床前数据表明，在慢性 ET-1 升高模型中观察到明显蛋白尿之前，可以检测到尿肾素排泄的变化。 此外，肾内血管闭塞危象 (VOC) 可能导致的肾小管损伤预计会增加肾小管损伤标志物、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 (NGAL)、肾损伤分子 1 (KIM- 1), 和 netrin。 安立生坦治疗有望减弱这些变化。 Jennifer Pollock 博士在包括 ET-1 在内的所有生物标志物检测方面拥有丰富的经验。 Pollock 博士为两个 PO1 运行生物分析核心实验室，并广泛发表了关于人类和动物样本的这些和类似方法的文章。

该项目的其他基本原理基于最近 24 小时尿液的肌酐清除率和总蛋白排泄结果，这些结果来自奥古斯塔镰状细胞诊所的 97 名镰状细胞性贫血 (Hb SS) 和镰状 0 型地中海贫血 (SB0-thalassemia) 患者。 这些患者的年龄范围为 19-63 岁（52 名女性，45 名男性）。 其中，17 人 (18%) 有微量白蛋白尿，定义为 24 小时白蛋白排泄量为 150-300 mg，34 人 (36%) 有大量白蛋白尿（>300 mg 白蛋白排泄/24 小时），因此 54% 的患者有微量白蛋白尿或大量白蛋白尿，只有 46% 的人白蛋白尿正常。 58 名患者 (58%) 接受长期羟基脲治疗。 9 名患者使用血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEi)，20 名患者使用血管紧张素受体阻滞剂 (ARB)（共 30%）。 55 名患者 (57%) 存在肾小球高滤过（肌酐清除率 >120 毫升/分钟）。 观察到肾小球滤过率 (GFR) 与年龄相关的下降。 具有正常白蛋白尿的患者数量随着年龄的增长而急剧下降，表明镰状肾病的进展。 最近对 SCD 疼痛的研究导致了观念的改变。 大约 50% 的患者报告每天都经历慢性疼痛。 此外，与该患者群体的中心化和神经性疼痛相关的问题已开始受到越来越多的关注。 大量证据表明，endothelin-1 在增强各种条件下的疼痛刺激和伤害感受方面起着重要作用。 这是由 ETA 受体介导的。 伯克利 SCD 转基因小鼠确实有痛觉过敏，如目标 2 的基本原理初步数据部分所示，ETA 受体阻断将这种痛觉过敏逆转为正常。 作为正在进行的国家少数民族健康与健康差异研究所 (NIMHD) 资助的疼痛及其遗传相关性研究的一部分（研究参考：1 P20 MD003383-01），研究人员发现 SCD 患者通过压痛测量显示出明显的痛觉过敏海藻计测试。 该测试在患者 (n=38) 和对照组 (n=20) 的三个不同解剖部位进行，结果表明，与对照组相比，SCD 患者在明显较低的压力下感知疼痛（咬肌：患者为 157.7 千帕 (kPa)，患者为 214.4 kPa对于对照组，p=0.017；尺骨：患者为 299.1 kPa，对照组为 477.5 kPa，p=0.0018；斜方肌：患者为 290.1 kPa，对照组为 462.8 kPa，p=0.02）。 这些数据表明痛觉过敏存在于绝大多数 SCD 患者中，并将构成研究期间监测的客观参数。

在每次研究访视时进行的协议要求的评估包括：身体检查、生命体征、服用禁药的审查、研究药物的责任、不良事件审查、疼痛日记的完成和怀孕测试（如果适用）。

在指定的研究访问中执行的协议要求的评估包括：收集血液和尿液以进行安全性和有效性测试；心电图 (ECG)；超声心动图（回声）；定量感觉测试（通过痛觉计的压力痛阈值，通过单丝的皮肤机械痛，以及通过 Q-Sense 小纤维测试的热测试）；经颅多普勒 (TCD)；前臂血流量测量；皮肤血流测量；以及完成生活质量问卷。

程序说明：

感官测试：患者还将在基线和研究期结束时进行感官测试。 感官测试将包括： 1) 压力痛阈值将通过 Fillingim 等人描述的手持式数字海藻计在三个不同的解剖部位测量：右上斜方肌中心、右咬肌和右尺骨； 2) 皮肤机械疼痛测试——使用在手背测试的尼龙单丝来评估机械疼痛的时间总和。 3) 热感觉测试将使用 Q-Sense 小纤维测试进行，该测试提供了一种经过科学验证的热、冷和热痛热感觉阈值测量方法。

疼痛日记/问卷：将要求患者完成 PISCES 研究中描述的每日疼痛日记。 疼痛日记的评估将由 Robert Gibson 博士和研究人员进行。 此外，研究人员还将纳入两项前/后措施，以检查疼痛对功能表现和生活质量的影响。 运动和过程技能评估 (AMPS) 是一项成熟的功能评估。 该评估证明了区分健康对照和慢性疼痛广泛传播的对照的能力。 它还展示了衡量干预后变化的能力。 研究人员还将使用成人镰状细胞生活质量测量信息系统 (ASCQ-Me) 来测量患者的生活质量。 这种生活质量评估是专门为镰状细胞群开发的。 罗伯特·吉布森 (Robert Gibson) 博士接受过 ASCQ-Me 方面的培训和经验，并获得了管理 AMPS 的资格。

三尖瓣反流射流 (TRJ) 速度测量的超声心动图：将在基线（除非在第 1 天的 6 个月内临床获得）和研究结束时进行经胸超声心动图，用于测量 TRJ 速度和肺动脉收缩压。

心电图：心电图 (ECG) 是一种测量心脏电活动的测试。 将在基线、第 8 天访视和研究结束时作为安全措施进行 ECG，但不知道安贝生坦会延长校正的 QT 间期 (QTc)。

前臂血流测量：将根据最近的 FMD 超声评估教程进行肱动脉血流介导的扩张 (FMD)。 患者将在基线和研究期结束时在受控环境中禁食条件下接受测试。

皮肤血流测量：皮肤血流将使用低频激光成像相机和/或小型皮肤探针进行无创测量。 大约 1.5 英寸宽的环形探针将用胶带放置在前臂上。 一个环将装满约 2 毫升（约 1/2 茶匙）的水用于局部加热，其他环将用于离子电渗疗法。 对于局部热量，研究人员会将环中的水加热到 42°C (107°F) 和 44°C (111°F) 之间，并等待大约 30 分钟，让皮肤血流量的增加变得稳定。 离子电渗疗法是一种使用低电平电流将血管活性药物输送到皮肤约 1 毫米深的技术。 这种技术的优点是它是非侵入性的，药物不会进入体内，只会停留在皮肤表面。 我们将使用 1-2% 的乙酰胆碱、硝普钠或 N-硝基-L-精氨酸甲酯 (L-NAME)（血管活性物质）溶液来增加或减少皮肤血流量。 多个短电流（10-180 秒）将间隔大约 1 分钟执行。 调查人员将在上述前臂动脉血流测试期间以及局部热疗和离子电渗疗法期间监测通过环的皮肤血流。

血液和尿液测量：在特定研究访视时为安全性/有效性评估而进行的实验室测试包括全血细胞计数 (CBC)、完整代谢组 (CMP)、白蛋白肌酐比值的随机尿液、24 小时尿液、妊娠试验、生物标志物和炎症标志物。

经颅多普勒 (TCD)：将执行治疗前和治疗后 TCD 以评估脑血流速度。 这种非侵入性测试是在受试者躺下时进行的，涉及使用声波来评估头部的大循环。 换能器用于听取和记录结果。