Роль эндотелина-1 в серповидноклеточной анемии

Целью данного исследования является проверка гипотезы о том, что блокада рецепторов антагонистами эндотелина (ЭТА) с использованием амбризентана безопасна, переносима и улучшает функцию почек/альбуминурию у пациентов с серповидно-клеточной анемией (SCD). Исследователи ожидают снижения протеинурии, снижения скорости струи трикуспидальной регургитации (TRJ), снижения воспалительных маркеров, улучшения кровотока в предплечье и улучшения ноцицепции/боли.

Первичная конечная точка эффективности была выбрана как влияние блокады рецепторов ЭТА на снижение микроальбуминурии на основании данных о диабетической нефропатии, патогенез которой аналогичен серповидной нефропатии. Снижение протеинурии на 30% является довольно консервативным и реалистичным, основанным на результатах исследований блокады рецепторов ЭТА при диабетической нефропатии, которые последовательно приводили к снижению протеинурии на 40-45%. Доклинические данные показали, что изменения в экскреции нефрина с мочой могут быть обнаружены до того, как будет наблюдаться явная протеинурия в модели хронического повышения ET-1. Кроме того, следует ожидать, что канальцевое повреждение, которое может произойти в результате внутрипочечного вазоокклюзионного криза (ЛОК), повышает уровень маркеров повреждения почечных канальцев, нейтрофильного желатиназ-ассоциированного липокалина (NGAL), молекулы почечного повреждения-1 (KIM- 1) и нетрин. Ожидается, что лечение амбризентаном ослабит эти изменения. Доктор Дженнифер Поллок имеет большой опыт работы со всеми анализами биомаркеров, включая ET-1. Доктор Поллок руководит базовыми биоаналитическими лабораториями для двух PO1 и опубликовал обширные публикации об этих и подобных методах на образцах человека и животных.

Дополнительное обоснование этого проекта основано на недавних 24-часовых результатах анализа мочи на клиренс креатинина и экскрецию общего белка у 97 пациентов с серповидноклеточной анемией (Hb SS) и серповидно-бета-нулевой талассемией (SB0-талассемия), наблюдаемых в серповидноклеточной клинике Августы. Эти пациенты были в возрасте от 19 до 63 лет (52 женщины, 45 мужчин). Из них 17 (18%) имели микроальбуминурию, определяемую 24-часовой экскрецией альбумина 150-300 мг, 34 (36%) имели макроальбуминурию (>300 мг экскреции альбумина/24 ч), таким образом, 54% пациентов имели микроальбуминурию или макроальбуминурию, и только 46% имели нормальную альбуминурию. 58 пациентов (58%) получали постоянную терапию гидроксимочевиной. 9 пациентов принимали ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (АПФ) и 20 — блокаторы рецепторов ангиотензина (БРА) (всего 30%). У 55 пациентов (57%) отмечалась гломерулярная гиперфильтрация (клиренс креатинина >120 мл/мин). Наблюдалось возрастное снижение скорости клубочковой фильтрации (СКФ). Число больных с нормоальбуминурией резко снижается по возрасту, что свидетельствует о прогрессировании серповидной нефропатии. Недавние исследования боли при ВСС привели к изменению восприятия. Примерно 50 % пациентов сообщили о ежедневной хронической боли. Кроме того, все большее внимание стали привлекать вопросы, связанные с централизацией и невропатической болью у этой популяции пациентов. Большое количество данных свидетельствует о том, что эндотелин-1 играет важную роль в усилении болевых стимулов и ноцицепции при различных состояниях. Это опосредуется рецептором ЭТА. Трансгенные мыши Berkeley SCD действительно имеют гипералгезию, как показано в разделе предварительных данных обоснования цели 2, и блокада рецептора ETA обращает эту гипералгезию в норму. В рамках текущего исследования боли и ее генетических коррелятов, финансируемого Национальным институтом здоровья меньшинств и различий в состоянии здоровья (NIMHD) (ссылка на исследование: 1 P20 MD003383-01), исследователи обнаружили, что пациенты с ВСС демонстрируют значительную гипералгезию, измеряемую болью при надавливании. альгометрическое тестирование. Тестирование проводилось в трех различных анатомических областях у пациентов (n = 38) и контрольной группы (n = 20) и показало, что пациенты с ВСС ощущали боль при значительно более низком давлении по сравнению с контрольной группой (массетер: 157,7 кПа для пациентов, 214,4 кПа). для контроля, p = 0,017, локтевая кость: 299,1 кПа для пациентов, 477,5 кПа для контроля, p = 0,0018 и трапециевидная: 290,1 кПа для пациентов, 462,8 кПа для контроля, p = 0,02). Эти данные свидетельствуют о том, что гипералгезия присутствует у подавляющего большинства пациентов с ВСС и будет представлять собой объективный параметр для мониторинга в ходе исследования.

Требуемые протоколом оценки, проводимые при каждом визите в рамках исследования, включают: физикальное обследование, основные показатели жизнедеятельности, анализ противозачаточных препаратов, отчетность об исследуемом препарате, обзор нежелательных явлений, заполнение дневника боли и тестирование на беременность, если применимо.

Требуемые протоколом оценки, проводимые во время определенных визитов в рамках исследования, включают: сбор крови и мочи для проверки безопасности и эффективности; электрокардиограмма (ЭКГ); эхокардиограмма (эхо); Количественное сенсорное тестирование (порог боли при надавливании с помощью альгометра, кожная механическая боль с помощью монофиламента и температурное тестирование с помощью теста Q-Sense Small Fiber Test); транскраниальная допплерография (ТКД); измерение кровотока в предплечье; измерение кожного кровотока; и заполнение вопросников качества жизни.

Описание процедур:

Сенсорное тестирование: пациенты также будут проходить сенсорное тестирование на исходном уровне и в конце периода исследования. Сенсорное тестирование будет включать: 1) порог болевой чувствительности при надавливании будет измеряться ручным цифровым альгометром, как описано Fillingim et al., в трех различных анатомических участках: в центре правой верхней части трапециевидной мышцы, правой жевательной мышце и правой локтевой кости; 2) Кожные тесты на механическую боль. Оценка суммирования механической боли во времени будет проводиться с использованием нейлоновых мононитей, протестированных на тыльной стороне кисти.; и 3) Термическое сенсорное тестирование будет проводиться с использованием теста Q-Sense Small Fiber Test, который предлагает научно подтвержденную меру температурных сенсорных порогов тепла, холода и тепловой боли.

Дневники боли/анкеты: пациентов попросят заполнять ежедневный дневник боли, как описано в исследовании PISCES. Оценка дневников боли будет проводиться доктором Робертом Гибсоном и исследовательским персоналом. Кроме того, исследователи также включат две меры до и после, которые будут изучать влияние боли на функциональные показатели и качество жизни. Оценка двигательных и технологических навыков (AMPS) — хорошо зарекомендовавшая себя функциональная оценка. Эта оценка продемонстрировала способность различать здоровых людей и людей с широко распространенной хронической болью. Он также демонстрирует способность измерять изменения после вмешательства. Исследователи также будут измерять качество жизни пациента с помощью информационной системы измерения качества жизни взрослых серповидноклеточных клеток (ASCQ-Me). Эта оценка качества жизни была специально разработана для популяций серповидноклеточной анемии. Доктор Роберт Гибсон прошел обучение и имеет опыт работы с ASCQ-Me, а также имеет сертификат для администрирования AMPS.

Эхокардиограмма при трикуспидальной регургитации (TRJ) Измерение скорости: Трансторакальная эхокардиограмма для измерения скорости TRJ и систолического давления в легочной артерии будет выполняться на исходном уровне (если не получено клинически в течение 6 месяцев после 1-го дня) и в конце исследования.

Электрокардиограмма: Электрокардиограмма (ЭКГ) — это тест, который измеряет электрическую активность сердца. ЭКГ будет проводиться в качестве меры безопасности на исходном уровне, при посещении на 8-й день и в конце исследования, хотя известно, что амбризентан не удлиняет скорректированный интервал QT (QTc).

Измерение кровотока в предплечье: Расширение плечевой артерии, опосредованное кровотоком (FMD), будет выполняться в соответствии с недавним руководством по ультразвуковой оценке FMD. Пациентов будут тестировать в условиях голодания в контролируемой среде на исходном уровне и в конце периода исследования.

Измерение кожного кровотока: кожный кровоток будет измеряться неинвазивно с использованием низкочастотной лазерной камеры и/или небольшого кожного зонда. Кольцеобразные зонды шириной около 1,5 дюймов будут прикреплены к предплечью с помощью липкой ленты. Одно кольцо будет заполнено примерно 2 мл (примерно 1/2 чайной ложки) воды для местного нагревания, а другие будут использоваться для ионофореза. При локальном нагреве исследователи нагревают воду в ринге до температуры от 42°C (107°F) до 44°C (111°F) и ждут примерно 30 минут, пока увеличение кожного кровотока не станет стабильным. Ионофорез — это метод, при котором вазоактивный препарат доставляется вглубь кожи примерно на 1 мм с помощью электрического тока низкой силы. Преимущество этой методики в том, что она неинвазивная и лекарство не попадает в организм, а просто остается на поверхности кожи. Мы будем использовать 1-2% раствор ацетилхолина, нитропруссида натрия или метилового эфира N-нитро-L-аргинина (L-NAME) (вазоактивные вещества) для увеличения или уменьшения кожного кровотока. Несколько коротких токов (10-180 секунд) будут выполняться с интервалом примерно в 1 минуту. Исследователи будут контролировать кровоток кожи через кольцо во время теста артериального кровотока предплечья, описанного выше, а также во время локального нагревания и ионофореза.

Измерение крови и мочи. Лабораторные анализы, которые должны выполняться для оценки безопасности/эффективности во время определенных визитов в рамках исследования, включают общий анализ крови (CBC), полную метаболическую панель (CMP), разовую порцию мочи для определения соотношения альбумин-креатинин, суточная моча, тест на беременность, биомаркеры и маркеры воспаления.

Транскраниальная допплерография (ТКД): ТКД до и после лечения будет проводиться для оценки скорости мозгового кровотока. Этот неинвазивный тест проводится в положении лежа и включает использование звуковых волн для оценки макроциркуляции в голове. Преобразователь используется для прослушивания и записи результатов.