ADAMTS-13 TASO ENNUSTAVANA BIOMARKKERINA MAKSAKIRROOSIN (ADAPTHRO) PORTaalilaskimotromboosin kehittymiseen (ADAPTHRO)

TAUSTA JA PERUSTELUT Porttilaskimotromboosin (PVT) esiintyminen muuttaa radikaalisti kirroosipotilaiden, erityisesti maksansiirtoa odottavien potilaiden ennustetta. Jos näin tapahtuu, sitä esiintyy noin 8-10 %:lla vuodessa maksakirroosipotilailla, jotka odottavat maksansiirtoa. Jotkut tutkimukset ovat ehdottaneet erilaisten riskitekijöiden osallistumista PVT:n kehittymiseen kirroosipotilailla, mukaan lukien klassiset synnynnäiset ja hankitut trombofiilit [1-6], vaikka tutkimusryhmämme panokset ovat osoittaneet, että se on avaintekijä PVT:n kehityksessä. näillä potilailla on portaaliveren virtauksen hidastunut nopeus [7, 8]. Von Willebrand -tekijän (VWF) ja maksan tähtisolujen tuottaman ADAMTS-13:n [9] mahdollinen vaikutus PVT:n kehittymiseen on melko huonosti dokumentoitu. Äskettäisessä havainnointitutkimuksessa [10], joka tehtiin 84 maksakirroosipotilaalla, havaittiin, että verenkierrossa olevan ADAMTS-13:n taso on merkittävästi alhaisempi PVT-ryhmässä (mediaani = 16,8 % vs. 69,1 %. p = 0,0047) ja riippumattomasti yhdistetty portaalitromboosiin (p = 0,007). Ottaen kuitenkin huomioon tutkimuksen ei-pitkittäinen luonne, on mahdollista, että havaittu ADAMTS-13:n alentunut taso on seuraus eikä syy PVT:stä. On myös vielä tutkimatta ADAMTS-13-tason yhteyttä kirroosin spesifiseen etiologiaan (virus-, alkoholi-, idiopaattinen jne.) ja siitä johtuvaan tulehdukseen sairauden aikana.

Tutkimusjakson (jaksojen) kesto ja tutkimushenkilöiden osallistuminen Kahta sataa (200) potilasta, jotka on otettu peräkkäin noin 6 kuukauden ajanjakson aikana, seurataan 18 kuukauden ajan ilmoittautumisesta. Tämän seurauksena seuraavien 18 kuukauden aikana odotetaan noin 20-25 PVT-tapausta. Kaikki potilaat allekirjoittavat tietoisen suostumuksen. Maksan vajaatoiminnan vakavuus arvioidaan Child-Pugh-pistemäärän [11] avulla.

Ensisijainen päätepiste Kuvaa prospektiivisesti sekä ADAMTS-13-perustason että porttilaskimovirtauksen yhteyttä PVT:n kehittymiseen kirroosipotilailla 18 kuukauden aikana ilmoittautumisesta. Toissijaiset päätepisteet Kuvaa prospektiivisesti ADAMTS-13-tason muutos kirroosin etiologian funktiona Koagulaatio ja biokemialliset parametrit

Prospektiivitutkimuksessa mitataan seuraavat biokemialliset ja hyytymisparametrit jokaisella seurantakäynnillä, joka on suunniteltu 4 kuukauden välein rutiinikontrollien mukaan:

Hyytymis- ja trombofiliatekijät Kaikki verinäytteet otetaan paasto-olosuhteissa aamulla. PT, APTT, fibrinogeeni, antitrombiini, proteiini C, proteiini S, lupus antikoagulantti, FVIII (kaksivaiheinen kromogeeninen määritys) ja D-dimeeri määritetään automaattisella koagulometrillä (ACL Top 700, IL). VWF-antigeeni VWF:aktiivisuus mitataan plasmanäytteistä kemiluminesenssimäärityksillä. VWF-multimeerikuvio (VWFm) mitattiin aiemmin raportoidulla tavalla [10]. Näiden polymorfismien FV Leiden R506Q ja protrombiini G20210A genotyypitys suoritettiin käyttämällä PCR-RT-pohjaiseen menetelmään perustuvia kaupallisia sarjoja (EliTechGroup S.p.A., Torino, Italia) automaattisella instrumentilla (Model 7300, Applied Biosystem, Foster City, CA, USA) ).

ADAMTS-13-aktiivisuuden mittaus. ADAMTS-13-aktiivisuus mitattiin sitroiduista plasmanäytteistä fluoresenssiresonanssienergian siirtoon (FRET) perustuvalla määrityksellä käyttäen VWF86-aminohappopeptidisubstraattia, joka sisältyi Instrumentation Laboratoryn kaupalliseen pakkaukseen (ADAMTS-13-aktiivisuus, Werfen Group, Milano, Italia ) ja Varian Eclipse -spektrofluorometri, kuten aiemmin on kuvattu [10, 13] ja ilmaistu prosentteina normaalista plasmasta.

Kliinisen kemian määritykset. Kaikki kliinisen kemian määritykset (plasmaalbumiini, kreatiniini, alaniini-leusiiniaminotransferaasi (ALT) ja kokonaisbilirubiini) suoritetaan osana rutiininomaista diagnostista tutkimusta 24 tunnin sisällä kliinisestä havainnosta A:n keskuslaboratoriossa. . Gemelli" Hospital, jossa käytetään heparinisoituja plasmanäytteitä ja Siemensin kaupallisia reagensseja.

Toissijaiset tavoitteet. Toissijaisia ​​tavoitteita ADAMTS-13- ja VWF-tasojen analysoimiseksi kirroosin etiologian funktiona arvioidaan edelleen vasta kirroosin tietyn etiologian sertifioidun diagnoosin jälkeen. HCV:hen liittyvän kirroosin tapauksessa analysoidaan myös HCV:n genotyyppi.

Tietoinen suostumus ja rekisteröinti Kaikki potilaat, jotka antavat tietoon perustuvan suostumuksen (eli allekirjoittavat ja päivättävät tietoisen suostumuslomakkeen ja suostumuslomakkeen, jos sovellettavissa) ja täyttävät kaikki muut sisällyttämis-/poissulkemiskriteerit, katsotaan tutkimukseen ilmoittautuneiksi.

Aiheen tunnuskoodi. Seuraavat numerosarjat sisältävät subjektin tunnistekoodin (SIC): protokollan lyhenne (ADAPTHRO) ja 2-numeroinen aihenumero (esim. 01….02), joka kuvastaa ilmoittautumisjärjestystä (eli tietoisen suostumuslomakkeen allekirjoitus). Esimerkiksi kolmas henkilö, joka allekirjoitti tietoisen suostumuslomakkeen, tunnistetaan ADAPTHRO-03:ksi. Kaikki tutkimusasiakirjat (esim. CRF:t, kliiniset asiakirjat jne.) tunnistetaan SIC:llä.

Seulonta ja opintokäynnit Tutkimuspaikka on vastuussa ilmoittautumis-/seulontalokin pitämisestä, joka sisältää kaikki ilmoittautuneet aiheet. Loki myös dokumentoi seulonnan epäonnistumisen syyn. Kaikki seulontatiedot kerätään ja raportoidaan CRF:issä seulontatuloksesta riippumatta.

Koehenkilön lopettaminen/keskeyttäminen Tutkittavan katsotaan suorittaneen tutkimuksen, kun hän lopettaa aktiivisen osallistumisen tutkimukseen, koska tutkittava on tai sen oletetaan suorittaneen tutkimuksen protokollan mukaisesti, osallistunut määrätyn havaintoajan ja kun opiskelupoistumislomake on täytetty. Päättymisen/keskeytyksen syyt raportoidaan Completion/Continuation CRF-sivulla, mukaan lukien: valmis, näytön epäonnistuminen, haittatapahtuma (esim. kuolema), keskeyttäminen kohteen mukaan (esim. seurannan vuoksi menetetty [määritelty kolmeksi dokumentoiduksi epäonnistuneeksi yritykseksi ota yhteyttä potilaaseen], keskeyttäminen), lääkärin päätös (esim. raskaus, etenevä sairaus, protokollarikkomus), elintoiminnot Elintoiminnot sisältävät pituuden (cm) ja painon (kg). Pituus ja paino kerätään, jos saatavilla, seulontakäynnillä, jokaisella vuosittaisella välikäynnillä ja tutkimuksen päättyessä/lopetuksella.

TILASTOLLINEN ANALYYSI. Suunniteltu tilastollinen analyysi Jatkuvat muuttujat ilmaistaan ​​keskiarvoina ± keskihajonnat. Kategoriset muuttujat ilmaistaan ​​taajuuksina ja prosentteina. Fisherin eksakteja testejä ja/tai Chi-Square-testejä käytetään pääasiassa kvalitatiivisten muuttujien vertailuun ja Studentin t-testiä kvantitatiivisille parittomille tiedoille. P-arvoa < 0,05 pidetään tilastollisesti merkitsevänä tutkivassa mielessä. Kuvaavien tilastojen (sijaintiparametrit) ja yksimuuttuja-analyysin lisäksi suunnitellaan monimuuttujaanalyysejä. Riippumattomia muuttujia, jotka havaitaan liittyvän PVT:hen yksimuuttujaanalyysissä p < 0,05, käytetään riippumattomina kovariaatteina, jotka liittyvät PVT:hen seuraavien 18 kuukauden aikana monimuuttujalogistisessa regressioanalyysissä. Kaksipuolinen p < 0,05 määriteltiin tilastollisesti merkitseväksi. Analyysit suoritetaan käyttämällä SPSS-ohjelmistoa (versio 21, Chicago, IL, USA) ja GraphPad Prism -ohjelmistoa (GraphPad Software, Inc, La Jolla, CA, USA).

Tietoinen suostumus. Tutkijat valitsevat potilaat tutkimukseen kelpoisuuskriteerien perusteella. Tutkija ei käytä selektiivisyyttä, jotta tästä lähteestä ei aiheudu puolueellisuutta. Kaikkien potilaiden on allekirjoitettava tietoinen suostumuslomake sovellettavien säännösten mukaisesti ennen tutkimukseen osallistumista. EY tarkistaa tietoisen suostumuslomakkeen ennen käyttöä. Allekirjoittamalla tietoisen suostumuslomakkeen potilaat suostuvat osallistumaan tutkimukseen.

Luottamuksellisuuspolitiikka Tutkija noudattaa luottamuksellisuuspolitiikkaa, joka on kuvattu Ei-interventionaalista tutkimusta koskevassa sopimuksessa.

Tutkimusasiakirjat ja tapausraporttilomakkeet Tutkija säilyttää täydelliset ja tarkat tutkimusasiakirjat erillisessä tiedostossa. Asiakirjat voivat sisältää potilastietoja, tallenteita tutkimuksen edistymisestä kunkin koehenkilön osalta, allekirjoitetut tietoon perustuvat suostumuslomakkeet, kirjeenvaihto EY:n kanssa, ilmoittautumis- ja seulontatiedot, CRF:t ja laboratorioraportit. Tutkija noudattaa tietojen kirjaamiseen ja raportointiin liittyviä menettelyjä.

Asiakirjojen ja tietojen säilyttäminen Tutkija säilyttää tutkimusasiakirjat ja tiedot sovellettavien säännösten ja asiakirjojen ja tietojen säilyttämiskäytännön mukaisesti, kuten Interventio-tutkimussopimuksessa on kuvattu.