ADAMTS-13-NIVÅ SOM prediktiv biomarkör för UTVECKLING AV PORTALVENTROMBOS I LEVERCIRRHOS (ADAPTRO) (ADAPTHRO)

BAKGRUND OCH MOTIVERING Förekomsten av portalventrombos (PVT) förändrar radikalt prognosen för cirrospatienter, särskilt de som väntar på levertransplantation. Om detta händer inträffar det inom cirka 8-10% / år hos patienter med cirros som väntar på levertransplantation. Vissa studier har föreslagit involvering av olika riskfaktorer för utveckling av PVT hos cirrospatienter, inklusive de klassiska medfödda och förvärvade trombofila tillstånden [1-6], även om bidrag från vår forskargrupp har visat att ett nyckelelement i utvecklingen av PVT hos dessa patienter är den minskade hastigheten för portalblodflödet [7, 8]. Det möjliga bidraget från von Willebrand-faktorn (VWF) och ADAMTS-13, producerat av leverstjärncellerna [9], för utvecklingen av PVT är ganska dåligt dokumenterat. I en nyligen genomförd observationsstudie av förespråkaren [10], utförd på 84 patienter med levercirros, fann man att nivån av cirkulerande ADAMTS-13 är signifikant lägre i gruppen med PVT (median = 16,8 % vs. 69,1 %, p = 0,0047) och oberoende associerad med närvaron av portaltrombos (p = 0,007). Men med tanke på studiens icke-longitudinella karaktär är det möjligt att den minskade nivån av ADAMTS-13 som observerats är konsekvensen och inte orsaken till PVT. Det är också ännu att undersöka sambandet mellan ADAMTS-13-nivån med den specifika etiologin för cirros (viral, alkoholisk, idiopatisk, etc.) och den resulterande inflammationen under sjukdomsförloppet.

Studieperiodens längd och försökspersonens deltagande Tvåhundra (200) patienter, inskrivna i följd under en period av cirka 6 månader, kommer att följas under 18 månader från registreringen. Som ett resultat kommer cirka 20-25 fall av PVT att förväntas under de efterföljande 18 månaderna. Alla patienter kommer att skriva under ett informerat samtycke. Svårighetsgraden av leverfunktionssvikt kommer att bedömas med hjälp av Child-Pugh-poängen [11].

Primär endpoint Att på ett prospektivt sätt beskriva sambandet mellan både basal ADAMTS-13-nivå och portalvenflöde med utveckling av PVT hos cirrospatienter under 18 månader från inskrivningen. Sekundära slutpunkter För att prospektivt beskriva modifieringen av ADAMTS-13-nivån som en funktion av etiologin för cirros Koagulation och biokemiska parametrar

Den prospektiva studien kommer att mäta följande biokemiska och koagulationsparametrar vid varje uppföljningsbesök, schemalagt med 4 månaders intervall enligt rutinkontroller:

Koagulations- och trombofilifaktorer Alla blodprover tas under fasta på morgonen. Bestämningar av PT, APTT, fibrinogen, antitrombin, protein C, protein S, lupus antikoagulant, FVIII (tvåstegs kromogen analys) och D-dimer kommer att utföras på en automatisk koagulometer (ACL Top 700, IL). VWF-antigen VWF:aktivitet kommer att mätas i plasmaprover genom kemiluminescensanalyser. VWF multimer (VWFm) mönster mättes som tidigare rapporterats [10]. FV Leiden R506Q och protrombin G20210A genotypning av dessa polymorfismer utfördes med användning av kommersiella kit baserade på PCR-RT-baserad metod (från EliTechGroup S.p.A., Torino, Italien) på ett automatiskt instrument (Model 7300, Applied Biosystem, Foster City, CA, USA) ).

Mätning av ADAMTS-13-aktivitet. ADAMTS-13-aktiviteten mättes i citratplasmaprover med en fluorescensresonansenergiöverföring (FRET)-baserad analys med användning av ett VWF86 aminosyrapeptidsubstrat i ett kommersiellt kit från Instrumentation Laboratory (ADAMTS-13-aktivitet, Werfen Group, Milano, Italien ) och en Varian Eclipse-spektrofluorometer, som tidigare beskrivits i detalj [10, 13] och uttryckt som % av normal plasma.

Kliniska kemianalyser. Alla kliniska kemiska analyser (plasmaalbumin, kreatinin, alanin-leucin-aminotransferas (ALT) och totalt bilirubin) kommer att utföras som en del av rutindiagnostisk upparbetning inom 24 timmar efter klinisk observation i det centrala laboratoriet på "A" . Gemelli" Hospital, med hjälp av hepariniserade plasmaprover och kommersiella reagenser från Siemens.

Sekundära mål. De sekundära målen med att analysera nivåerna av ADAMTS-13 och VWF som en funktion av etiologin för cirros kommer att utvärderas ytterligare först efter en certifierad diagnos av den särskilda etiologiska orsaken till cirros. I fallet med HCV-associerad cirros kommer också genotypen av HCV att analyseras.

Informerat samtycke och registrering Varje patient som kommer att ge informerat samtycke (d.v.s. undertecknar och daterar formuläret för informerat samtycke och samtyckesformuläret, om tillämpligt) och kommer att uppfylla alla andra inklusions-/exkluderingskriterier kommer att anses vara inskrivna i studien.

Ämnesidentifikationskod. Följande nummerserie kommer att bestå av ämnesidentifikationskoden (SIC): protokollförkortning (ADAPTHRO) och tvåsiffrigt ämnesnummer (t.ex. 01….02) som återspeglar registreringsordningen (d.v.s. underteckna formuläret för informerat samtycke). Till exempel kommer den tredje försökspersonen som undertecknade ett informerat samtycke att identifieras som ADAPTHRO-03. Alla studiedokument (t.ex. CRF, klinisk dokumentation, etc.) kommer att identifieras med SIC.

Screening och studiebesök Studieplatsen ansvarar för att föra en inskrivnings-/screeninglogg som inkluderar alla inskrivna ämnen. Loggen kommer också att tjäna till att dokumentera orsaken till att screening misslyckades. All screeningdata kommer att samlas in och rapporteras i CRFs, oavsett screeningresultat.

Försöksperson Slutförande/Avbrytande En försöksperson anses ha genomfört studien när han/hon upphör med aktivt deltagande i studien eftersom försökspersonen har, eller antas ha, genomfört studien enligt protokollet, deltagit under angiven observationstid och när blanketten för studieavslut är ifylld. Skäl för att slutföra/avbryta behandlingen kommer att rapporteras på CRF-sidan för slutförande/avbrytande, inklusive: slutfört, skärmfel, biverkning (t.ex. dödsfall), avbrytande per ämne (t.ex. förlorad till uppföljning [definierat som 3 dokumenterade misslyckade försök att kontakta personen], avhopp), läkarens beslut (t.ex. graviditet, progressiv sjukdom, protokollöverträdelser), vitala tecken Vitala tecken kommer att inkludera längd (cm) och vikt (kg). Längd och vikt kommer att samlas in, om tillgängligt, vid screeningbesök, varje årligt intervallbesök och studiens slutförande/avslutande.

STATISTISK ANALYS. Planerad statistisk analys Kontinuerliga variabler kommer att uttryckas som medelvärden ± standardavvikelser. Kategoriska variabler kommer att uttryckas som frekvenser och procentsatser. Fishers exakta test och/eller Chi-Square-test kommer huvudsakligen att användas för att jämföra kvalitativa variabler och Students t-test för kvantitativa oparade data. Ett p-värde < 0,05 kommer att betraktas som statistiskt signifikant i utforskande mening. Förutom beskrivande statistik (platsparametrar), och univariat analys, planeras multivariata analyser. Oberoende variabler som kommer att finnas associerade med PVT i univariat analys med p<0,05 kommer att användas som oberoende kovariater associerade med PVT under de kommande 18 månaderna i den multivariabla logistiska regressionsanalysen. Ett dubbelsidigt p <0,05 definierades som statistiskt signifikant. Analyser kommer att utföras med SPSS-mjukvara (version 21, Chicago, IL, USA) och GraphPad Prism-mjukvara (GraphPad Software, Inc, La Jolla, CA, USA).

Informerat samtycke. Utredarna kommer att välja patienter för inskrivning baserat på studiens behörighetskriterier. Utredaren kommer inte att utöva någon selektivitet så att ingen partiskhet införs från denna källa. Alla patienter måste underteckna ett informerat samtycke innan de går in i studien enligt tillämpliga myndighetskrav. Före användning kommer formuläret för informerat samtycke att granskas av EC. Genom att underteckna formuläret för informerat samtycke godkänner patienterna att delta i studien.

Sekretesspolicy Utredaren kommer att följa sekretesspolicyn som beskrivs i avtalet om icke-ingripande försök.

Studiedokument och fallrapportformulär Utredaren kommer att upprätthålla fullständig och korrekt studiedokumentation i en separat fil. Dokumentation kan innefatta medicinska journaler, register som beskriver studiens framsteg för varje ämne, undertecknade formulär för informerat samtycke, korrespondens med EC, registrerings- och screeninginformation, CRF och laboratorierapporter. Utredaren kommer att följa rutinerna för dataregistrering och rapportering.

Dokument- och datalagring Utredaren kommer att behålla studiedokumentation och data i enlighet med tillämpliga regulatoriska krav och policyn för dokument- och datalagring, som beskrivs i avtalet om icke-interventionell studie.