PCM1-JAK2 hoitoon liittyvissä kasvaimissa
PCM1-JAK2-fuusiogeenin havaitseminen potilailla, joilla on hoitoon liittyvä myelodysplastinen oireyhtymä / akuutti myelooinen leukemia
Termi "hoitoon liittyvä" leukemia on kuvaava ja perustuu potilaan historiaan altistumisesta sytotoksisille aineille. Vaikka syy-yhteys on oletettu, mekanismi on vielä todistettava. Näiden kasvaimien uskotaan olevan suora seuraus aiemman hoidon aiheuttamista mutaatiotapahtumista. Hoitoon liittyvät myelodysplastiset oireyhtymät / akuutti myelooinen leukemia (t-MDS / t-AML) katsotaan nykyään yhtenä kokonaisuutena, jota kutsutaan hoitoon liittyviksi myeloidisiksi kasvaimaksi. Nykyinen Maailman terveysjärjestön WHO-luokitus2,. Se on hyvin tunnustettu kliininen oireyhtymä, joka esiintyy myöhäisenä komplikaationa sytotoksisten aineiden ja ionisoivan sädehoidon jälkeen useimpien syöpätyyppien hoidossa: Hodgkin-lymfooma (HL), non-Hodgkin-lymfooma (NHL), akuutti lymfoblastinen leukemia (ALL), sarkooma, ja munasarja- ja kivessyöpä t-MDS/AML:n ilmaantuvuus tavanomaisen hoidon jälkeen vaihtelee 0,8 %:sta 6,3 %:iin 20 vuoden kohdalla. Keskimääräinen aika t-MDS/AML:n kehittymiseen on 3–5 vuotta, ja riski pienenee huomattavasti ensimmäisen vuosikymmenen jälkeen. WHO:n luokituksessa tunnustetaan kahta tyyppiä t-MDS/AML:ää riippuen aiheuttavasta terapeuttisesta altistumisesta: alkyloiva aine. /säteilyyn liittyvää tyyppiä ja topoisomeraasi II -estäjään liittyvää tyyppiä. Alkylointiaineeseen liittyvä t-MDS/AML ilmaantuu yleensä 4–7 vuoden kuluttua altistumisesta mutageeniselle aineelle. Käänteinen translokaatio t(8;9) (p22;p24) kromosomin 8 lyhyen haaran ja kromosomin 9 pitkän haaran välillä on toistuva poikkeavuus, joka fuusio Janus-aktivoidun kinaasi 2:n (JAK2) ihmisen autoantigeenin pericentriolaarisen materiaalin 1 geeniin (PCM1) ja katkeaa ja yhdistyy vyöhykkeissä 8p11 ja 9q3410 PCM1-JAK2-geenifuusion, PCM1-väliainedomeenien kierteisen kierteen geenin vuoksi. oligomerointi, joka kokoaa yhteen kytketyt JAK2-domeenit, mikä johtaa JAK2:n konstitutiivisesti aktivoituun tyrosiinikinaasidomeeniin. Yleisin JAK2-aktivaatiomekanismi hematologisissa pahanlaatuisissa kasvaimissa on pistemutaatio kohdassa 617 (V617F).
JAK2-aktivaation seuraukset ovat neoplastinen transformaatio ja epänormaali solujen lisääntyminen erilaisissa pahanlaatuisissa kasvaimissa
- Joten JAK2-lokuksen sisältävien translokaatioiden katsotaan olevan onkogeenisiä akuuteissa leukemioissa ja myelodysplastisissa / myeloproliferatiivisissa sairauksissa.
- Potilailla, joilla on tämä poikkeavuus, on laaja kliininen kirjo kroonisista akuutteihin hematologisiin sairauksiin, joilla on myeloidinen tai lymfaattinen ilme.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Yksityiskohtainen kuvaus
Termi "hoitoon liittyvä" leukemia on kuvaava ja perustuu potilaan historiaan altistumisesta sytotoksisille aineille. Vaikka syy-yhteys on oletettu, mekanismi on vielä todistettava. Näiden kasvainten uskotaan olevan suoria seurauksia aiemman hoidon aiheuttamista mutaatiotapahtumista.
Hoitoon liittyviä myelodysplastisia oireyhtymiä / akuuttia myeloidista leukemiaa (t-MDS / t-AML) pidetään nykyään yhtenä kokonaisuutena, jota kutsutaan terapiaan liittyviksi myeloidisiksi kasvaimaksi WHO:n nykyisen luokituksen2 perusteella. Se on hyvin tunnettu kliininen oireyhtymä, joka esiintyy myöhemmässä komplikaatiossa sytotoksisten aineiden ja ionisoivan sädehoidon jälkeen useimpien syöpätyyppien hoidossa: Hodgkin-lymfooma (HL), non-Hodgkin-lymfooma (NHL), akuutti lymfoblastinen leukemia (ALL), sarkooma, sekä munasarja- ja kivessyöpä3,4.
Hoitoon liittyvän myelooisen kasvaimen ominaisuudet ja sen kehittymisen ajoitus ensisijaisen diagnoosin jälkeen riippuvat altistumisesta tietyille aineille sekä edellisen sytotoksisen hoidon kumulatiivisesta annoksesta ja annosintensiteetistä 5.
t-MDS/AML:n ilmaantuvuus tavanomaisen hoidon jälkeen vaihtelee 0,8 %:sta 6,3 %:iin 20 vuoden kohdalla. Mediaaniaika t-MDS/AML:n kehittymiseen on 3–5 vuotta, ja riski pienenee huomattavasti ensimmäisen vuosikymmenen jälkeen 6.
Kaksi t-MDS/AML-tyyppiä tunnistetaan WHO:n luokituksessa riippuen aiheuttavasta terapeuttisesta altistuksesta: alkyloiva aine/säteilyyn liittyvä tyyppi ja topoisomeraasi II -estäjään liittyvä tyyppi. Alkylointiaineeseen liittyvä t-MDS/AML ilmaantuu yleensä 4–7 vuoden kuluttua altistumisesta mutageeniselle aineelle.
Noin kahdella kolmasosalla potilaista on MDS ja lopuilla AML, jolla on myelodysplastisia piirteitä. Potilailla on usein sytopeniaa. Usein esiintyy monilinjaista dysplasiaa 7.
Tässä klassisessa hoitoon liittyvässä leukemian muodossa, joka seuraa alkyloivilla aineilla ja/tai sädehoitoa, veri- ja luuytimen löydökset muistuttavat primaarisessa MDS:ssä havaittuja, vaikka dysgranulopoieesin ja dysmegakaryosytopoieesin aste on tyypillisesti suurempi 8.
Toisin kuin alkyloiva aine t-MDS/AML, topoisomeraasi II:n estäjien sekundaarisella AML:llä ei usein ole edeltävää myelodysplastista vaihetta, ja se esiintyy selvänä akuuttina leukemiana, jossa usein on näkyvä monosyyttinen komponentti. Latenssiaika topoisomeraasi II:n estäjähoidon aloittamisen ja leukemian alkamisen välillä on lyhyt, mediaani 2-3 vuotta 9.
Käänteinen translokaatio t(8;9) (p22;p24) kromosomin 8 lyhyen haaran ja kromosomin 9 pitkän käsivarren välillä on toistuva poikkeavuus, joka fuusioi Janus-aktivoidun kinaasi 2:n (JAK2) ihmisen autoantigeenin perisentriolaarisen materiaalin 1 geeniin (PCM1), katkeamalla ja yhdistämällä kaistat 8p11 ja 9q341010.
PCM1 koodaa suurta 228 kDa:n proteiinia, joka sisältää useita potentiaalisia coiled-coil-domeeneja aminoterminaalisessa osassaan. Tämä proteiini sijaitsee sytoplasmaattisissa rakeissa, joita kutsutaan sentriolaariseksi satelliitiksi. Sillä oletetaan olevan ratkaiseva rooli sentrosomaalisten proteiinien kokoamisessa, mikrotubulusten organisoinnissa ja solusyklin etenemisessä11.
PCM1-JAK2-geenifuusion ansiosta PCM1:n kierteiset domeenit välittävät oligomerisaatiota, joka kokoaa yhteen kytketyt JAK2-domeenit, mikä johtaa JAK212, 13:n konstitutiivisesti aktivoituun tyrosiinikinaasidomeeniin.
JAK2 on tyrosiinikinaasien Janus-perheen jäsen (JAK1, JAK2, JAK3, TYK2). Näillä ei-reseptorityrosiinikinaaseilla on merkittävä rooli erilaisissa signaalinsiirtoreiteissä, jotka säätelevät solujen eloonjäämistä, proliferaatiota, erilaistumista ja apoptoosia. Proteiini muodostuu seitsemästä domeenista. JH2-domeeni (pseudokinaasidomeeni, kinaasin kaltainen domeeni) sijaitsee eksonissa 14 ja sillä on olennainen negatiivinen autosäätelytoiminto14.
Yleisin JAK2-aktivaatiomekanismi hematologisissa pahanlaatuisissa kasvaimissa on pistemutaatio kohdassa 617 (V617F).
JAK2-aktivaation seuraukset ovat neoplastinen transformaatio ja epänormaali solujen lisääntyminen erilaisissa pahanlaatuisissa kasvaimissa15.
- Joten JAK2-lokuksen sisältävien translokaatioiden katsotaan olevan onkogeenisiä akuuteissa leukemioissa ja myelodysplastisissa / myeloproliferatiivisissa sairauksissa.
- Potilailla, joilla on tämä poikkeavuus, on laaja kliininen kirjo kroonisista akuutteihin hematologisiin sairauksiin, joilla on myeloidinen tai lymfaattinen ulkonäkö 16.
Fluoresenssi in situ -hybridisaatio (FISH) on eräänlainen sytogeneettinen tekniikka, joka mahdollistaa määriteltyjen nukleiinihapposekvenssien visualisoinnin tietyissä solu- tai kromosomikohdissa hybridisoimalla komplementaarisia fluoresoivasti leimattuja koetinsekvenssejä koskemattomissa metafaasi- tai interfaasisoluissa.
Fluoresoivat koettimet ovat nukleiinihappoleimattuja fluoresoivilla ryhmillä ja ne voivat sitoutua spesifisiin DNA/RNA-sekvensseihin. Fluoresenssimikroskopiaa voidaan käyttää sen selvittämiseen, missä fluoresoiva koetin on sitoutunut kromosomeihin17.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Odotettu)
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
- Lapsi
- Aikuinen
- Vanhempi Aikuinen
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Näytteenottomenetelmä
Tutkimusväestö
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
• Myelodysplastiset oireyhtymät: MDS-diagnoosi on vahvistettava luuytimen aspiraatilla ja/tai biopsialla: blastien määrän on oltava < 20 %; potilaat, joilla on mikä tahansa kansainvälinen ennustepiste (IPSS), ovat kelvollisia; potilaiden, joilla on alhainen tai keskitasoinen (INT)-1 IPSS, verihiutaleiden määrän < 50 x 10⁹/l ja/tai absoluuttisen neutrofiilimäärän (ANC) < 50 x 10⁹/l.
- Akuutti myelooinen leukemia, jossa on monilinjainen dysplasia: AML-TLD:n diagnoosi on vahvistettava luuytimen aspiraatilla ja/tai biopsialla HUOMAA: luuytimen aspiraatin ja/tai biopsian tarkastelussa on oltava todisteita >= 20 % blasteista; AML-TLD:n tulkitaan sisältävän potilaat, jotka on aiemmin diagnosoitu ranskalais-amerikkalais-brittiläisen (FAB) kriteerein refraktaariseksi anemiaksi, jossa on ylimääräisiä blasteja transformaatiossa (RAEB-t), sekä potilaat, joilla ei ole aiempia hematologisia häiriöitä ja joilla on AML, joka täyttää Maailman terveysjärjestön (WHO) AML-TLD:n kriteerit; potilailla, joilla on AML-TLD, on oltava valkosolujen (WBC) = < 30 x 10⁹/L dokumentoituna 4 viikon sisällä ennen tutkimukseen osallistumista (otetaan kaksi laskentasarjaa, joiden välillä on 2 viikkoa); potilaat, joiden valkosolujen määrä on kaksinkertaistunut tässä ajassa ja yli 20 x 10⁹/l seulontahetkellä, ei ole kelvollinen
- Potilaat ovat aloittaneet hoidon (sytotoksiset aineet ja ionisoiva sädehoito) vähintään 2 vuotta sitten.
Poissulkemiskriteerit:
- muut hoitoon liittyvät kasvaimet kuin myelodplastinen oireyhtymä tai akuutti myelooinen leukemia
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Havaintomallit: Muut
- Aikanäkymät: Poikkileikkaus
Kohortit ja interventiot
Ryhmä/Kohortti |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Denovo MDS/AML
Potilaat, joilla on de-novo myeloidinen kasvain joko myelodysplastinen oireyhtymä ja/tai akuutti myelooinen leukemia, jotka on diagnosoitu täydellisellä verenkuvalla, verikalvolla, luuytimen aspiraatilla, luuytimen biopsialla, immunofenotyypisillä ja luuytimen biopsialla näillä kriteereillä • Myelodysplastiset oireyhtymät: diagnoosi MDS on vahvistettava luuytimen aspiraatilla ja/tai biopsialla: blastimäärän on oltava < 20 %; • Akuutti myelooinen leukemia, johon liittyy monilinjainen dysplasia: AML-TLD:n diagnoosi on vahvistettava luuytimen aspiraatilla ja/tai biopsialla HUOMAA: luuytimen aspiraatin ja/tai biopsian tarkastelussa on oltava todisteita >= 20 % blasteista ; |
Näytteet dehydratoidaan etanolissa (50, 80 ja 95 % (v/v) sarja, altistus 3 minuuttia 300 ul:aan etanolia kullakin pitoisuudella) ennen hybridisaatiota. Nauhoilla olevia näytteitä hybridisoidaan 15 minuuttia 55 °C:ssa käyttämällä kosteussuljettua objektilasien inkubointikammiota. Lyhyesti sanottuna 500 µl:n tilavuudet hybridisaatiopuskuria (0,7 M NaCl, 0,1 M Tris [pH 8,0], 0,1 % natriumdodekyylisulfaatti, 10 mM EDTA, sisältää koettimen, esilämmitetty 55 ºC:seen) levitetään nauhan ja kammion pinnalle. kansi on suljettu, mikä luo kostean, lämpötilaltaan säädellyn ympäristön kammioon. 15 minuutin kuluttua kansi poistetaan ja näytteet huuhdellaan lyhyesti koettimettomalla hybridisaatiopuskurilla, joka on esilämmitetty 55 °C:seen. Nauhoilla olevia hybridisoituja soluja vastavärjätään 10 minuuttia pimeässä -30 ui:lla kiinnitysväliainetta, joka sisältää 1,5 ug ml-1 4',6-diamidino-2-fenyyli-indolia (DAPI). Sitten nauhat kiinnitetään peitinlasilla ja niitä tutkitaan fluoresenssimikroskoopilla. |
|
hoitoon liittyvä MDS/AML
PCM1-JAK2-fuusiogeenin havaitseminen potilailla, joilla on hoitoon liittyvä myelodysplastinen oireyhtymä / akuutti myelooinen leukemiapotilaat
|
Näytteet dehydratoidaan etanolissa (50, 80 ja 95 % (v/v) sarja, altistus 3 minuuttia 300 ul:aan etanolia kullakin pitoisuudella) ennen hybridisaatiota. Nauhoilla olevia näytteitä hybridisoidaan 15 minuuttia 55 °C:ssa käyttämällä kosteussuljettua objektilasien inkubointikammiota. Lyhyesti sanottuna 500 µl:n tilavuudet hybridisaatiopuskuria (0,7 M NaCl, 0,1 M Tris [pH 8,0], 0,1 % natriumdodekyylisulfaatti, 10 mM EDTA, sisältää koettimen, esilämmitetty 55 ºC:seen) levitetään nauhan ja kammion pinnalle. kansi on suljettu, mikä luo kostean, lämpötilaltaan säädellyn ympäristön kammioon. 15 minuutin kuluttua kansi poistetaan ja näytteet huuhdellaan lyhyesti koettimettomalla hybridisaatiopuskurilla, joka on esilämmitetty 55 °C:seen. Nauhoilla olevia hybridisoituja soluja vastavärjätään 10 minuuttia pimeässä -30 ui:lla kiinnitysväliainetta, joka sisältää 1,5 ug ml-1 4',6-diamidino-2-fenyyli-indolia (DAPI). Sitten nauhat kiinnitetään peitinlasilla ja niitä tutkitaan fluoresenssimikroskoopilla. |
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
PCM1-JAK2-fuusiogeenin havaitseminen
Aikaikkuna: 24 kuukautta
|
Käytetään tuoretta näytettä myelooisista kasvainpotilaista PCM1-JAK2-fuusiogeenin etsimiseen kahdessa thaerap-peräisessä myelooisessa kasvaintyypissä, tutkitaan PCM1-JAK2:n ja annosintensiteetin ja altistusajan välistä suhdetta sekä tutkitaan PCM1-JAK2:n ja muiden sytogeneettisten tekijöiden välistä suhdetta. poikkeavuuksia käyttämällä FISH-tekniikkaa ja
|
24 kuukautta
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Odotettu)
Ensisijainen valmistuminen (Odotettu)
Opintojen valmistuminen (Odotettu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Muut tutkimustunnusnumerot
- PCM1-JAK2 fusion gene
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .