治療関連新生物におけるPCM1-JAK2
治療関連の骨髄異形成症候群/急性骨髄性白血病患者における PCM1-JAK2 融合遺伝子の検出
「治療関連」白血病という用語は記述的であり、患者の細胞毒性物質への暴露歴に基づいています。 因果関係は示唆されていますが、メカニズムはまだ証明されていません。 これらの新生物は、以前の治療によって誘発された突然変異事象の直接的な結果であると考えられています。現在の世界保健機関の WHO 分類 2。 ホジキンリンパ腫 (HL)、非ホジキンリンパ腫 (NHL)、急性リンパ芽球性白血病 (ALL)、肉腫、および卵巣がんと精巣がん 従来の治療後の t-MDS/AML の発生率は、20 年で 0.8% から 6.3% の範囲です。 t-MDS/AML の発症までの期間の中央値は 3 ~ 5 年で、最初の 10 年を過ぎるとリスクが著しく低下します. /放射線関連型とトポイソメラーゼII阻害剤関連型。 アルキル化剤関連の t-MDS/AML は通常、変異原性物質への曝露から 4 ~ 7 年後に出現します。8 番染色体の短腕と 9 番染色体の長腕の間の相互転座 t(8;9) (p22;p24)は、ヤヌス活性化キナーゼ 2 (JAK2) をヒト自己抗原中心体周囲物質 1 遺伝子 (PCM1) に融合させる再発性の異常であり、バンド 8p11 および 9q3410 での切断と再結合を伴います。リンクされた JAK2 ドメインをまとめて JAK2 の構成的に活性化されたチロシンキナーゼドメインをもたらすオリゴマー化 血液悪性腫瘍における JAK2 活性化の最も一般的なメカニズムは、617 位の点変異 (V617F) です。
JAK2 活性化の結果は、さまざまな悪性腫瘍における腫瘍性形質転換と異常な細胞増殖です。
- そのため、JAK2遺伝子座が関与する転座は、急性白血病および骨髄異形成/骨髄増殖性疾患において発癌性の重要性があると考えられています。
- この異常を有する患者は、骨髄性またはリンパ性の外観を伴う慢性から急性の血液疾患に至る幅広い臨床スペクトルを呈します
調査の概要
状態
詳細な説明
「治療関連」白血病という用語は記述的であり、患者の細胞毒性物質への暴露歴に基づいています。 因果関係は示唆されていますが、メカニズムはまだ証明されていません。 これらの新生物は、以前の治療によって誘発された突然変異事象の直接的な結果であると考えられています。
現在、治療に関連した骨髄異形成症候群/急性骨髄性白血病 (t-MDS/t-AML) は、現在の世界保健機関の WHO 分類に基づいて、治療に関連した骨髄性新生物と呼ばれる単一のエンティティと見なされています 2。 ホジキンリンパ腫 (HL)、非ホジキンリンパ腫 (NHL)、急性リンパ芽球性白血病 (ALL)、肉腫、卵巣がんおよび精巣がん3,4。
治療に関連した骨髄性新生物の特徴と一次診断後の発症のタイミングは、特定の薬剤への曝露、および先行する細胞傷害性治療の累積用量と用量強度に依存します 5。
従来の治療後の t-MDS/AML の発生率は、20 年で 0.8% から 6.3% の範囲です。 t-MDS/AML の発症までの期間の中央値は 3 ~ 5 年で、最初の 10 年を過ぎるとリスクは著しく減少します 6.
2 種類の t-MDS/AML は、原因となる治療被ばくに応じて WHO 分類で認識されています: アルキル化剤/放射線関連タイプとトポイソメラーゼ II 阻害剤関連タイプです。 アルキル化剤関連の t-MDS/AML は通常、変異原性物質への曝露から 4 ~ 7 年後に出現します。
患者の約 3 分の 2 は MDS を呈し、残りは骨髄異形成の特徴を伴う AML を呈します。 患者はしばしば血球減少症を呈します。 多系統異形成がしばしば存在する 7.
アルキル化剤および/または放射線療法による治療に続くこの古典的な治療関連白血病では、血液および骨髄所見は原発性 MDS に見られるものと似ていますが、顆粒球形成異常および巨核球形成異常の程度は通常 8 以上です。
アルキル化剤 t-MDS/AML とは対照的に、トポイソメラーゼ II 阻害剤に続発する AML は、多くの場合、先行する骨髄異形成段階を持たず、明白な急性白血病として現れ、多くの場合、顕著な単球成分を伴います。 トポイソメラーゼ II 阻害剤による治療開始から白血病発症までの潜伏期間は短く、中央値は 2 ~ 3 年です 9。
8 番染色体の短腕と 9 番染色体の長腕の間の相互転座 t(8;9) (p22;p24) は、ヤヌス活性化キナーゼ 2 (JAK2) をヒト自己抗原中心体周囲物質 1 遺伝子に融合させる再発性異常です。 (PCM1) 、バンド 8p11 と 9q341010 で切断と再結合があります。
PCM1 は、そのアミノ末端部分にいくつかの潜在的なコイルドコイル ドメインを含む 228 kDa の大きなタンパク質をエンコードします。 このタンパク質は、中心体サテライトと呼ばれる細胞質顆粒に局在しています。 中心体タンパク質の組み立て、微小管の組織化、および細胞周期の進行において重要な役割を果たすと考えられています11。
PCM1-JAK2 遺伝子融合により、PCM1 のコイルドコイル ドメインはオリゴマー化を媒介し、リンクされた JAK2 ドメインをまとめて、構成的に活性化された JAK212 のチロシンキナーゼ ドメインをもたらします。
JAK2 は、チロシンキナーゼの Janus ファミリー (JAK1、JAK2、JAK3、TYK2) のメンバーです。 これらの非受容体チロシンキナーゼは、細胞の生存、増殖、分化、およびアポトーシスを調節するさまざまなシグナル伝達経路で重要な役割を果たします。 このタンパク質は 7 つのドメインで構成されています。 JH2 ドメイン (シュードキナーゼ ドメイン、キナーゼ様ドメイン) はエクソン 14 に位置し、必須の負の自己調節機能を持っています14。
血液悪性腫瘍における JAK2 活性化の最も一般的な機序は、617 位の点変異 (V617F) です。
JAK2 活性化の結果は、さまざまな悪性腫瘍における腫瘍性形質転換と異常な細胞増殖です 15。
- そのため、JAK2遺伝子座が関与する転座は、急性白血病および骨髄異形成/骨髄増殖性疾患において発癌性の重要性があると考えられています。
- この異常を有する患者は、骨髄性またはリンパ性の外観を伴う慢性から急性の血液疾患に至る幅広い臨床スペクトルを呈します 16.
蛍光 in situ ハイブリダイゼーション (FISH) は、無傷の中期または間期細胞内の相補的な蛍光標識プローブ配列のハイブリダイゼーションによって、特定の細胞または染色体部位で定義された核酸配列の可視化を可能にする一種の細胞遺伝学的手法です。
蛍光プローブは、蛍光基で標識された核酸であり、特定の DNA/RNA 配列に結合できます。 蛍光顕微鏡を使用して、蛍光プローブが染色体のどこに結合しているかを調べることができます17。
研究の種類
入学 (予想される)
参加基準
適格基準
就学可能な年齢
- 子
- 大人
- 高齢者
健康ボランティアの受け入れ
受講資格のある性別
サンプリング方法
調査対象母集団
説明
包含基準:
• 骨髄異形成症候群: MDS の診断は、骨髄穿刺および/または生検によって確認する必要があります。芽球数は 20% 未満でなければなりません。国際予後スコア(IPSS)を持つ患者は適格です。低または中程度の (INT)-1 IPSS の患者は、血小板数 < 50x10⁹/L および/または絶対好中球数 (ANC) < 50x10⁹/L でなければなりません。
- 多系統異形成を伴う急性骨髄性白血病: AML-TLD の診断は、骨髄吸引物および/または生検によって確認する必要があります。 AML-TLD は、フレンチ-アメリカン-ブリティッシュ (FAB) 基準によって、形質転換中の過剰芽球を伴う難治性貧血 (RAEB-t) と以前に診断された患者、および先行する血液障害の病歴がなく、AML を有する患者を含むと解釈されます。世界保健機関 (WHO) の基準による AML-TLD の基準を満たしています。 -AML-TLDの患者は、白血球(WBC)が30x10⁹ / L未満である必要があります 研究への参加前の4週間以内に記録された(2週間離れた2セットのカウントが行われます);この期間内に WBC が 2 倍になり、スクリーニング時に 20x10⁹/L を超える患者は適格ではありません
- -患者は少なくとも2年前に治療(細胞毒性薬および電離放射線療法)を開始しています。
除外基準:
- -骨髄形成症候群または急性骨髄性白血病以外の他の治療関連の新生物
研究計画
研究はどのように設計されていますか?
デザインの詳細
- 観測モデル:他の
- 時間の展望:断面図
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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Denovo MDS/AML
-骨髄異形成症候群および/または急性骨髄性白血病のいずれかのde-novo骨髄性新生物を有する患者で、全血球計算、血液膜、骨髄穿刺液、骨髄生検、免疫表現型検査および骨髄生検によりこれらの選択基準で診断された患者 • 骨髄異形成症候群:診断骨髄穿刺および/または生検によってMDSの有無を確認する必要があります。芽球数は20%未満でなければなりません。 • 多系統異形成を伴う急性骨髄性白血病: AML-TLD の診断は、骨髄吸引液および/または生検によって確認する必要があります。 ; |
ハイブリダイゼーションの前に、サンプルをエタノールで脱水します (50、80、および 95% (v/v) シリーズ、各濃度のエタノール 300 μl に 3 分間曝露)。 テープ上のサンプルは、湿気で密閉されたスライド インキュベーション チャンバーを使用して、55°C で 15 分間ハイブリダイズします。 手短に言えば、500 μl 容量のハイブリダイゼーションバッファー (0.7 M NaCl、0.1 M Tris [pH 8.0]、0.1% ドデシル硫酸ナトリウム、10 mM EDTA、プローブを含み、55 ºC に予熱) をテープの表面とチャンバーの蓋が密閉され、チャンバー内に湿った、温度制御された環境が作られます。 15分後、蓋を外し、55℃に予熱したプローブフリーのハイブリダイゼーションバッファーでサンプルを簡単にすすぎます。 テープ上のハイブリダイズした細胞は、1.5 μg ml-1 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) を含む ~30 μl の封入剤で暗所で 10 分間対比染色されます。 次に、テープにカバースリップを取り付け、蛍光顕微鏡を使用して検査します。 |
治療関連MDS/AML
治療に関連する骨髄異形成症候群/急性骨髄性白血病患者における PCM1-JAK2 融合遺伝子の検出
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ハイブリダイゼーションの前に、サンプルをエタノールで脱水します (50、80、および 95% (v/v) シリーズ、各濃度のエタノール 300 μl に 3 分間曝露)。 テープ上のサンプルは、湿気で密閉されたスライド インキュベーション チャンバーを使用して、55°C で 15 分間ハイブリダイズします。 手短に言えば、500 μl 容量のハイブリダイゼーションバッファー (0.7 M NaCl、0.1 M Tris [pH 8.0]、0.1% ドデシル硫酸ナトリウム、10 mM EDTA、プローブを含み、55 ºC に予熱) をテープの表面とチャンバーの蓋が密閉され、チャンバー内に湿った、温度制御された環境が作られます。 15分後、蓋を外し、55℃に予熱したプローブフリーのハイブリダイゼーションバッファーでサンプルを簡単にすすぎます。 テープ上のハイブリダイズした細胞は、1.5 μg ml-1 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) を含む ~30 μl の封入剤で暗所で 10 分間対比染色されます。 次に、テープにカバースリップを取り付け、蛍光顕微鏡を使用して検査します。 |
この研究は何を測定していますか?
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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PCM1-JAK2fusion 遺伝子の検出
時間枠:24ヶ月
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骨髄性腫瘍患者からの新鮮なサンプルを使用して、2 種類の thaerap 関連骨髄性腫瘍における PCM1-JAK2 融合遺伝子を検索し、PCM1-JAK2 と線量強度および曝露時間との関係を調べ、PCM1-JAK2 と他の細胞遺伝学との関係を調べたFISH技術を用いた異常
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24ヶ月
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協力者と研究者
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研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (予想される)
一次修了 (予想される)
研究の完了 (予想される)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
本研究に関する用語
その他の研究ID番号
- PCM1-JAK2 fusion gene
個々の参加者データ (IPD) の計画
個々の参加者データ (IPD) を共有する予定はありますか?
医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
米国FDA規制機器製品の研究
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