Herneproteiini-isolaatin proteiinin ja aminohappojen hyötyosuus terveillä vapaaehtoisilla (Qualipois)
Tutkimuksen tavoitteena on selvittää terveillä koehenkilöillä herneproteiini- ja kaseiini-isolaatin proteiinin ja aminohappojen hyötyosuutta. Tätä tarkoitusta varten tutkijat vertaavat kahta menetelmää:
- standardimenetelmä, jossa mitataan ileaalisen sulavuus suolisuolen putkia käyttäen,
- vaihtoehtoinen menetelmä, jota elintarvike- ja maatalousjärjestön (FAO) asiantuntijaryhmä on ehdottanut: kaksoisisotooppimenetelmä.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Yksityiskohtainen kuvaus
Rekrytoidaan 2 ryhmää terveitä vapaaehtoisia (miehet ja naiset 18-65-vuotiaat), BMI 18-30.
Jokainen ryhmä testaa proteiinilähdettä (30 g), joka on sisällytetty perunamuusiin, joka on jaettu pieniin annoksiin toistuvan ateriaprotokollan suorittamiseksi. Proteiinilähteet (herne tai kaseiini) on leimattu luonnostaan 15N:lla ja deuteriumilla (2H).
Ateriakoetta edeltävänä päivänä vapaaehtoiset varustetaan suolistoletkulla, joka kulkee sykkyräsuoleen saakka. Koepäivänä suolistoputken asento tarkistetaan radiografialla sen sijainnin varmistamiseksi sykkyräsuolipäässä. Katetri asetetaan kyynärvarren laskimoon verinäytteitä varten. Suolaliuos, joka sisältää polyetyleeniglykoli 4000:aa (PEG-4000, 20 g/L), jota käytetään suoliston virtauksen imeytymättömänä merkkiaineena, infusoidaan sykkyräsuoleen suolistovirtojen virtausnopeuden laskemiseksi. Perusveri- ja virtsanäytteenoton sekä 30 minuutin ajan suoritetun sykkyräsuolen ulosteiden peruskeräyksen jälkeen koehenkilö nauttii ensimmäisen keksiannoksen kohdalla t = 0. Pienet ateria-annokset nautitaan 30 minuutin välein 4 tunnin ajan isotooppisen tasanteen saavuttamiseksi. Merkkiannokset hiili 13 (13C) aminohappoja nautitaan samanaikaisesti ateriaannosten kanssa. Imeytymätön merkkiaine (inuliini) lisätään testiateriaan korjaamaan epätäydellistä palautumista sykkyräsuolen tasolla.
Aterian jälkeinen näytteenottojakso kestää 8 tuntia aterian nauttimisen jälkeen. Suoliston sisältö kerätään jatkuvasti jään päällä ja yhdistetään 30 minuutin välein. Verinäyte otetaan 30 minuutin välein 4 tunnin ajan ja sen jälkeen tunnin välein. Virtsa kerätään yhteensä 2 tunnin välein.
Mitat:
Jätevesistä tutkijat mittaavat PEG 4000, typpi (N) ja 15N, hiili ja 13C, aminohapot (AA), 15N ja 13C aminohapoissa sekä aterian imeytymättömät markkerit. Tutkijat laskevat ileaalisen virtausnopeuden, todellisen sykkyräsuolen proteiinin sulavuuden ja yksittäisten aminohappojen todellisen ileaalisen sulavuuden.
Plasmassa tutkijat mittaavat uremiaa ja 15N:ää ureassa, AA:ssa ja proteiinissa mitatakseen ravinnon N:n siirtymistä plasman proteiinipoolissa; 15N, 2H ja 13C yksittäisissä aminohapoissa mittaavat myös 15N/2H-aminohappojen suhteellista biologista hyötyosuutta verrattuna vapaisiin 13C-aminohappoihin.
Virtsasta tutkijat mittaavat ureaa ja 15N urea-ammoniakista laskeakseen aterian jälkeiset deaminaatiohäviöt.
Näillä mittauksilla voidaan määrittää proteiinin ja aminohappojen hyötyosuus herneproteiinista ja verrata sitä kaseiiniin käyttämällä klassista menetelmää, joka sisältää näytteenottoa ileaalista ja ravinnon proteiinin (15N) luontaista merkkiainetta. Lisäksi se mahdollistaa vähemmän invasiivisen menetelmän testaamisen käyttämällä useita merkkiaineita aminohappojen biologisen hyötyosuuden arvioimiseksi.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Todellinen)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskelupaikat
-
-
Ile-de-france
-
Bobigny, Ile-de-france, Ranska, 93000
- Centre de Recherche sur Volontaires (CRV)
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- 18<BMI<30
- Terve
- Vakuutettu Ranskan sosiaaliturvajärjestelmän mukaisesti
- Naisille: ehkäisyvälineiden käyttö
- Allekirjoitettu tietoinen suostumus
Poissulkemiskriteerit:
- Mikä tahansa ruoka-aineallergia
- Lateksi allergia
- Positiivinen serologia HIV:lle, hepatiitti C -viruksen vasta-aineelle, hepatiitti B -viruksen pinta-antigeenille ja ydinvasta-aineille
- Gluteenin intoleranssi
- Anemia
- Huumeiden käyttö
- Runsas alkoholin kulutus
- Verenpainetauti, diabetes, ruoansulatuskanavan sairaus, maksa- tai munuaissairaus, vakava sydänsairaus
- Raskaus
- Korkean urheilun harjoittelu (>7h/vko)
- Verenluovutus 3 kuukauden aikana ennen tutkimusta
- Osallistuminen kliiniseen tutkimukseen tutkimusta edeltäneiden 3 kuukauden aikana
- Ei allekirjoitettua tietoon perustuvaa suostumusta
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Perustiede
- Jako: Satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Yksittäinen
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
|---|---|
|
Kokeellinen: Herne
Perunamuusijauho, joka sisältää herneproteiini-isolaattia, joka on leimattu 15N:llä ja 2H:lla
|
Proteiinit ovat luonnostaan rikastettuja 15N:lla ja 2H:lla.
Niitä lisätään perunamuusiin ja testiateria formuloidaan antamaan 30 g herneproteiinia vapaaehtoista kohden.
|
|
Active Comparator: Kaseiini
Perunamuusijauho, joka sisältää kaseiini-isolaattia, joka on merkitty luonnostaan 15N:llä ja 2H:lla
|
Proteiinit ovat luonnostaan rikastettuja 15N:lla ja 2H:lla.
Niitä lisätään perunamuusiin ja testiateria formuloidaan antamaan 30 g herneproteiinia vapaaehtoista kohden.
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Herneproteiinien ja kaseiinin ileaalisen sulavuuden prosenttiosuus
Aikaikkuna: -30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
Kokonais-N ja 15N mitataan alkuaineanalysaattorilla, joka on kytketty isotooppisen suhteen massaspektrometriin (EA-IRMS), ja sitten määritetään terminaaliseen sykkyräsuoleen saavuttavan ravinnon N:n prosenttiosuus.
Tämä prosenttiosuus korjataan suolisuolen virtausnopeudella, joka arvioidaan mittaamalla PEG-pitoisuus poisteissa sameusmittausmenetelmillä.
Herneproteiinien ja kaseiinin ileaalinen sulavuus (ts.
N sulavuus) lasketaan 100 - korjattuna ravinnon N-prosenttisena.
|
-30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
|
Herneproteiinien ja kaseiinin aminohappojen ileaalisen sulavuuden prosenttiosuus
Aikaikkuna: -30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
Aminohappopitoisuudet mitataan Ultra High Performance Liquid Kromatografialla (UHPLC) ja 15N, 2H ja 13C rikastaminen yksittäisissä aminohapoissa mitataan kaasukromatografia-poltto-isotooppisuhdemassaspektrometrialla (GC-C-IRMS) määrittämään. prosenttiosuus ravinnon yksittäisistä aminohapoista, jotka saavuttavat terminaalisen sykkyräsuolen.
Tämä prosenttiosuus korjataan suolisuolen virtausnopeudella, joka arvioidaan mittaamalla PEG-pitoisuus poisteissa sameusmittausmenetelmillä.
Herneen ja kaseiinin aminohapon ileaalinen sulavuus lasketaan 100 - korjattuna ravinnon aminohappoprosenttina.
|
-30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
|
Herneproteiinien ja kaseiinin prosenttiosuus aterian jälkeisestä proteiinin nettokäytöstä
Aikaikkuna: -30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
Plasman ja virtsan urea (entsymaattisilla menetelmillä) määritetään ja liitetään 15N-rikastusarvoihin (EA IRMS:n toimesta) 15N:n siirron määrittämiseksi plasman ja virtsan N-poolissa ja herneproteiinin ja kaseiinin aterian jälkeisen proteiinin nettokäytön laskemiseksi.
|
-30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
|
Ruokavalion aminohappojen pitoisuus aterian jälkeen plasmassa
Aikaikkuna: -30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
Yksittäisten aminohappojen (alaniini, arginiini, asparagiini, asparagiinihappo, kysteiini, glutamiinihappo, glutamiini, glysiini, histidiini, isoleusiini, leusiini, lysiini, metioniini, proliini, fenyylialaniini, seriini, treoniini, valiini, tryptofaani) pitoisuus plasmassa tyrosiini määritetään UHPLC:llä ja liitetään yksittäisten aminohappojen 15N-rikastusarvoihin (GC C IRMS:llä) herneproteiineista ja kaseiinista peräisin olevien ravinnon aminohappojen pitoisuuden määrittämiseksi plasmassa.
|
-30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
|
Aterian jälkeinen glukoosipitoisuus plasmassa
Aikaikkuna: -30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
Glukoosin pitoisuus (entsymaattisella määrityksellä) määritetään plasmasta.
|
-30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
|
Aterian jälkeinen insuliinipitoisuus plasmassa
Aikaikkuna: -30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
Insuliinikonsentraatio (ELISA:lla) määritetään plasmasta.
|
-30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
|---|---|---|
|
Kahden isotoopin menetelmän validointi yksittäisten aminohappojen biologisen hyötyosuuden arvioimiseksi
Aikaikkuna: -30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
15N, 2H ja 13C aminohappojen mittaukset plasmassa GC-C-IRMS:llä.
|
-30 minuutista 8 tuntiin aterian jälkeen
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Julkaisuja ja hyödyllisiä linkkejä
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Todellinen)
Opintojen valmistuminen (Todellinen)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- Qualipois
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .