Biotilgjengelighet av protein og aminosyrer av erteproteinisolat hos friske frivillige (Qualipois)

2 grupper av friske frivillige rekrutteres (menn og kvinner fra 18 til 65 år), BMI fra 18 til 30.

Hver gruppe tester en proteinkilde (30g) innlemmet i en potetmos som er delt i små porsjoner for å utføre en gjentatt måltidsprotokoll. Proteinkilder (erter eller kasein) er iboende merket med 15N og deuterium (2H).

Dagen før måltidstesten er de frivillige utstyrt med en tarmsonde som migrerer frem til ileum. På dagen for forsøket blir posisjonen til tarmrøret kontrollert med radiografi for å verifisere plasseringen ved den terminale ileum. Et kateter legges inn i underarmsvenen for blodprøvetaking. En saltvannsløsning som inneholder polyetylenglykol 4000 (PEG-4000, 20 g/L), brukt som en ikke-absorberbar markør for tarmstrømmen, infunderes i ileum for å beregne strømningshastigheten til tarmavløpet. Etter en basal blod- og urinprøvetaking, samt en basal samling av ileal-avløp utført i 30 minutter, inntar forsøkspersonen ved t=0 den første kjeksdosen. De små måltidsdelene inntas hvert 30. min i 4 timer, for å oppnå et isotopisk platå. Spordoser av karbon 13 (13C) aminosyrer inntas samtidig med måltidsdosene. Ikke-absorberbar markør (inulin) tilsettes testmåltidet for å korrigere for ufullstendig restitusjon på ilealnivå.

Den postprandiale prøvetakingsperioden varer i 8 timer etter inntak av måltidet. Tarminnholdet samles kontinuerlig over is og samles hvert 30. min. Blod tas hvert 30. minutt i 4 timer, og deretter hver time. Total urin tas hver 2. time.

Målinger:

I avløpet måler etterforskerne PEG 4000, nitrogen (N) og 15N, karbon og 13C, aminosyrer (AA), 15N og 13C i aminosyrer og måltidets ikke-absorberbare markører. Etterforskerne beregner ileal-strømningshastigheten, den totale reelle ileal-proteinfordøyeligheten og den reelle ilealfordøyeligheten til individuelle aminosyrer.

I plasma måler etterforskerne uremi og 15N i urea, AA og protein for å måle overføringen av diett-N i plasmaproteinpooler; 15N, 2H og 13C i individuelle aminosyrer måler også den relative biotilgjengeligheten til 15N/2H aminosyrer sammenlignet med frie 13C aminosyrer.

I urinen måler etterforskerne urea og 15N i urea-ammoniakk for å beregne postprandiale deamineringstap.

Disse målingene vil tillate å bestemme protein- og aminosyrebiotilgjengeligheten fra erteprotein og sammenligne det med kasein, ved å bruke den klassiske metoden som innebærer ileal-prøvetaking og iboende spor av diettprotein (15N). I tillegg vil det tillate å teste en mindre invasiv prosedyre ved å bruke flere sporstoffer for å vurdere aminosyrens biotilgjengelighet.