CCM Blood Biomarker Validation Study

CCM:t, yksi yleisimmistä verisuonten epämuodostumista, ovat tyypillisiä epänormaalisti laajentuneet kallonsisäiset kapillaarit, mikä lisää alttiutta verenvuotohalvaukselle. Autosomaalisena hallitsevana sairautena, jolla on epätäydellinen penetranssi, suurin osa CCM-geenimutaatioiden kantajista on suurelta osin oireettomia, mutta oireiden ilmaantuessa tauti on tyypillisesti saavuttanut fokaalisen verenvuodon vaiheen, jossa on peruuttamaton aivovaurio. Tällä hetkellä CCM-leesioiden invasiivinen neurokirurginen poisto on ainoa hoitovaihtoehto, vaikka oireet toistuvat leikkauksen jälkeen. Siksi on olemassa suuri tarve prognostisille/seurantabiomarkkereille aivohalvauksen ennaltaehkäisyn riskin ennustajina. Tavoitteena on kehittää joukko veren prognostisia biomarkkereita aivohalvauksen ennaltaehkäisyn riskin ennustajiksi. Tämän projektin tavoitteena on validoida uudet seerumin biomarkkerit, jotka on tunnistettu Ccm-eläinmalleissa ihmisen veressä ja jotka voisivat ennustaa verenvuototapahtumien riskiä. Keskeinen hypoteesi on, että tiettyjen seerumin biomarkkerien kvantitatiivista havaitsemista voidaan käyttää verenvuototapahtumien ajoituksen ennustamiseen. Hypoteesi on muotoiltu viiden seerumin etiologisen biomarkkerin viimeaikaisten löydösten perusteella, jotka liittyvät veri-aivoesteen (BBB) ​​häiriintymiseen, mikä voi johtaa verenvuototapahtumiin. Hyödyntämällä tutkimusryhmän asiantuntemusta Ccm-patologiassa ja seerumin biomarkkereissa, keskeistä hypoteesia testataan tutkimuksen tavoitteen saavuttamiseksi toteuttamalla seuraavat kolme vallankumouksellista tavoitetta kahdessa vaiheessa, alkaen vaiheesta 1 kahdella ensimmäisellä biomarkkerien löytämisellä (1 , 2):

1. Vahvista veren ennuste-/seurantabiomarkkerit optimoidun tunnistusalustan avulla verenvuotoa aiheuttavan aivohalvauksen ehkäisyyn. Työhypoteesi on, että tiettyjen verimolekyylien ilmentymistasot korreloivat häiriintyneen BBB:n etenemisen kanssa. Tässä tarkoituksessa Ccms-hiirissä tunnistetut seerumin biomarkkerit validoidaan CCM-potilaiden verinäytteissä niiden toteutettavuuden ja luotettavuuden arvioimiseksi. Korrelaatiofunktiot biomarkkerien seerumi/plasmatasojen ja Ccms-hiirissä tunnistetun hajoaneen BBB:n etenemisen välillä testataan käyttämällä "kultastandardia", entsyymikytketyn immunosorbenttimäärityksen (ELISA) alustaa CCM-potilailla kohdassa 1a). Kliininen valmistelu suuren kohortin CCM-analyysiin; 1b). Seerumin progesteronin (PRG) validointi biomarkkerina ja 1c). Neljän etiologisen seerumin peptidibiomarkkerin validointi optimoidulla ELISA-alustalla CCM-potilailla.
2. Optimoida biomarkkerien herkkyys, spesifisyys, dynaaminen alue ja luotettavuus käyttämällä huippuluokan multipleksointialustaa verenvuotohalvauksen riskien ennustamiseen. Työhypoteesi on, että veren biomarkkerien mittausparametreja, kuten herkkyyttä, spesifisyyttä, dynaamista työskentelyaluetta ja inter/sisäistä vaihtelua, voidaan parantaa huomattavasti suuremmalla näytekoolla, parannetuilla kliinisillä määritelmillä ja paremmilla havaitsemisalustoilla. Suorituskykyisiä ELISA-testejä käytetään jatkuvasti etiologisten biomarkkerien validointiin. Korkeimman herkkyyden ja spesifisyyden varmistamiseksi vankka automaattinen multipleksausalusta suurten kohorttien toistuvaan analysointiin on välttämätön biomarkkerien validoimiseksi verenvuotoa aiheuttaville aivohalvauksille. Lineaarinen tai logistinen regressioanalyysi suoritetaan validoitujen biomarkkerien ja kliinisten kriteerien välisen korrelaation määrittämiseksi. Tässä tarkoituksessa testamentti 2a). Parantaa ehdokasveren biomarkkerien herkkyyttä ja spesifisyyttä korrelaatioyhtälöiden avulla, jotka optimoitiin CCM-verinäytteiden koolla ja päivitetyillä kliinisillä tiedoilla; 2b). Määrittele uudet biomarkkerit käyttämällä korkean suorituskyvyn omic-lähestymistapoja ja 2c). Paranna veren biomarkkerien herkkyyttä ja lisää dynaamista työskentelyaluetta multiplex bead array assay (MBAA) -alustan ja optimoitujen protokollien avulla.

Vaihe 2 Tavoite: 3) Parantaa validoitujen prognostisten/seurantabiomarkkerien kliinistä käyttökelpoisuutta optimoiduilla algoritmeilla suuremmissa kohortteissa ihmisillä tehtäviä kliinisiä tutkimuksia varten. Työhypoteesi on, että veren biomarkkerien kliinistä herkkyyttä ja spesifisyyttä voidaan parantaa edelleen tekemällä sokeasti testi-uudelleentestausmenetelmä suuremmissa riippumattomissa ihmisryhmissä. Tämä tavoite antaa riittävän todisteen siitä, että veren biomarkkerien kliinistä käyttökelpoisuutta voidaan parantaa ja käyttää aivohalvauksen riskin ennustamiseen, mikä luo pohjan tuleville kliinisille tutkimuksille ja mahdollisille tulevaisuuden vallankumouksellisille kliinisille sovelluksille. Tutkimusryhmä jatkaa 3a). Paranna kliinistä käyttökelpoisuutta optimoimalla validoitujen biomarkkerien/paneelien prognostisten/seurantaalgoritmien tarkkuutta käyttämällä suurempia kohortteja; 3b). Paranna kliinistä käyttökelpoisuutta edelleen vahvistamalla validoitujen biomarkkerien/paneelien luotettavuus suuremmassa kohortissa; ja 3c). Vahvista, että validoidut prognostiset/seurantabiomarkkerit/paneelit ovat valmiita tulevia kliinisiä tutkimuksia varten.