Estudio de validación de biomarcadores sanguíneos CCM

Las malformaciones cavernosas cerebrales (CCM, por sus siglas en inglés), una de las malformaciones vasculares más comunes, se caracterizan por capilares intracraneales anormalmente dilatados, lo que aumenta la susceptibilidad al accidente cerebrovascular hemorrágico. Como trastorno autosómico dominante con penetrancia incompleta, la mayoría de los portadores de mutaciones del gen CCM son en gran medida asintomáticos, pero cuando se presentan síntomas, la enfermedad generalmente ha alcanzado la etapa de hemorragia focal con daño cerebral irreversible. Actualmente, la extirpación con neurocirugía invasiva de las lesiones de CCM es la única opción de tratamiento, a pesar de la recurrencia de los síntomas después de la cirugía. Por lo tanto, existe una gran necesidad de biomarcadores de pronóstico/seguimiento como predictores de riesgo para la prevención de accidentes cerebrovasculares. El objetivo es desarrollar un conjunto de biomarcadores de pronóstico sanguíneo como predictores de riesgo para la prevención de accidentes cerebrovasculares. El objetivo de este proyecto es validar nuevos biomarcadores séricos identificados en modelos animales Ccm en sangre humana que podrían predecir el riesgo de eventos hemorrágicos. La hipótesis central es que la detección cuantitativa de ciertos biomarcadores séricos se puede utilizar para predecir el momento de los eventos hemorrágicos. La hipótesis se ha formulado sobre la base de los hallazgos recientes de cinco biomarcadores etiológicos séricos asociados con la interrupción de la barrera hematoencefálica (BBB), que podría conducir a eventos hemorrágicos. Aprovechando la experiencia del equipo de investigación en patología Ccm y biomarcadores séricos, se probará la hipótesis central para lograr el objetivo del estudio al perseguir los siguientes tres objetivos revolucionarios en dos fases, comenzando desde la fase 1 con los dos primeros objetivos de descubrimiento de biomarcadores (1 , 2):

1. Valide biomarcadores de pronóstico/monitoreo de sangre con la plataforma de detección optimizada para la prevención de accidentes cerebrovasculares hemorrágicos. La hipótesis de trabajo es que los niveles de expresión de ciertas moléculas sanguíneas se correlacionan con la progresión de una BBB interrumpida. Con este objetivo, los biomarcadores séricos identificados en ratones Ccms se validarán en muestras de sangre de pacientes con CCM para evaluar su viabilidad y fiabilidad. Las funciones de correlación entre los niveles de suero/plasma de los biomarcadores y la progresión de una BBB interrumpida identificada en ratones Ccms se probarán utilizando la plataforma de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) "estándar de oro" en pacientes con CCM para 1a). Preparación clínica para análisis de CCM de grandes cohortes; 1b). Validar la progesterona sérica (PRG) como biomarcador, y 1c). Validación de 4 biomarcadores de péptidos séricos etiológicos con la plataforma ELISA optimizada en pacientes con CCM.
2. Para optimizar la sensibilidad, la especificidad, el rango dinámico y la confiabilidad de los biomarcadores utilizando la plataforma multiplex de vanguardia para predecir los riesgos de accidente cerebrovascular hemorrágico. La hipótesis de trabajo es que los parámetros de medición de los biomarcadores sanguíneos, como la sensibilidad, la especificidad, el rango de trabajo dinámico y la variabilidad inter/intra, se pueden mejorar drásticamente con un tamaño de muestra más grande, mejores definiciones clínicas y mejores plataformas de detección. Se utilizarán continuamente ELISA de alto rendimiento para validar biomarcadores etiológicos. Para garantizar la máxima sensibilidad y especificidad, es esencial contar con una sólida plataforma multiplex automática para el análisis repetitivo de grandes cohortes a fin de validar los biomarcadores de accidentes cerebrovasculares hemorrágicos. Se realizará un análisis de regresión lineal o logística para delinear la correlación entre los biomarcadores validados y los de criterios clínicos. En este fin, la voluntad 2a). Mejorar la sensibilidad y la especificidad de los biomarcadores sanguíneos candidatos a través de ecuaciones de correlación optimizadas con mayores tamaños de muestras de sangre CCM e información clínica actualizada; 2b). Definir nuevos biomarcadores utilizando enfoques ómicos de alto rendimiento, y 2c). Mejore la sensibilidad y aumente el rango de trabajo dinámico de los biomarcadores sanguíneos con una plataforma de ensayo de matriz de microesferas multiplex (MBAA) y protocolos optimizados.

Objetivo de la fase 2: 3) Mejorar la utilidad clínica de biomarcadores de pronóstico/seguimiento validados con algoritmos optimizados en cohortes más grandes en preparación para ensayos clínicos en humanos. La hipótesis de trabajo es que la sensibilidad clínica y la especificidad de los biomarcadores sanguíneos se pueden mejorar aún más mediante un enfoque de prueba y repetición a ciegas en cohortes humanas independientes más grandes. Este objetivo proporcionará pruebas suficientes de que la utilidad clínica de los biomarcadores sanguíneos se puede mejorar y utilizar para predecir el riesgo de accidente cerebrovascular hemorrágico, sentando las bases para futuros ensayos clínicos y posibles futuras aplicaciones clínicas revolucionarias. El equipo de investigación continuará con 3a). Mejorar la utilidad clínica al optimizar la precisión de los algoritmos de pronóstico/monitoreo de biomarcadores/paneles validados utilizando cohortes más grandes; 3b). Mejorar aún más la utilidad clínica al confirmar la confiabilidad de los biomarcadores/paneles validados en una cohorte más grande; y 3c). Confirmar que los biomarcadores/paneles de seguimiento/pronóstico validados están listos para futuros ensayos clínicos.