Estudo de Validação de Biomarcadores Sanguíneos CCM

As malformações cavernosas cerebrais (CCMs), uma das malformações vasculares mais comuns, são caracterizadas por capilares intracranianos anormalmente dilatados, resultando em maior suscetibilidade ao acidente vascular cerebral hemorrágico. Como um distúrbio autossômico dominante com penetrância incompleta, a maioria dos portadores da mutação do gene CCMs é amplamente assintomática, mas quando os sintomas ocorrem, a doença geralmente atinge o estágio de hemorragia focal com dano cerebral irreversível. Atualmente, a remoção neurocirúrgica invasiva das lesões da MCC é a única opção de tratamento, apesar da recorrência dos sintomas após a cirurgia. Portanto, há uma grande necessidade de biomarcadores de prognóstico/monitoramento como preditores de risco para prevenção de AVC. O objetivo é desenvolver um conjunto de biomarcadores prognósticos sanguíneos como preditores de risco para a prevenção de AVC. O objetivo deste projeto é validar novos biomarcadores séricos identificados em modelos animais de Ccm em sangue humano que possam predizer o risco de eventos hemorrágicos. A hipótese central é que a detecção quantitativa de certos biomarcadores séricos pode ser utilizada para prever o tempo de eventos hemorrágicos. A hipótese foi formulada com base nos achados recentes de cinco biomarcadores etiológicos séricos associados ao rompimento da Barreira Hematoencefálica (BHE), que podem levar a eventos hemorrágicos. Aproveitando a experiência da equipe de pesquisa em patologia Ccm e biomarcadores séricos, a hipótese central será testada para atingir o objetivo do estudo, perseguindo os três objetivos revolucionários a seguir em duas fases, começando na fase 1 com os dois primeiros objetivos de descoberta de biomarcadores (1 , 2):

1. Valide biomarcadores de prognóstico/monitoramento de sangue com a plataforma de detecção otimizada para prevenção de AVC hemorrágico. A hipótese de trabalho é que os níveis de expressão de certas moléculas sanguíneas estão correlacionados com a progressão de uma BBB interrompida. Neste objetivo, biomarcadores séricos identificados em camundongos Ccms serão validados em amostras de sangue de pacientes com CCM para avaliar sua viabilidade e confiabilidade. As funções de correlação entre os níveis séricos/plasmáticos de biomarcadores e a progressão de um BBB interrompido identificado em camundongos Ccms serão testadas usando o "padrão ouro", plataforma de ensaio imunossorvente ligado a enzima (ELISA) em pacientes com CCM para 1a). Preparação clínica para análise de CCM de grande coorte; 1b). Validar a progesterona sérica (PRG) como um biomarcador, e 1c). Validação de 4 biomarcadores séricos peptídicos etiológicos com a plataforma ELISA otimizada em pacientes com CCM.
2. Para otimizar a sensibilidade, especificidade, faixa dinâmica e confiabilidade de biomarcadores usando a plataforma multiplex de ponta para prever riscos de acidente vascular cerebral hemorrágico. A hipótese de trabalho é que os parâmetros de medição de biomarcadores sanguíneos, como sensibilidade, especificidade, faixa dinâmica de trabalho e variabilidade inter/intra, podem ser drasticamente melhorados com um tamanho de amostra maior, definições clínicas aprimoradas e melhores plataformas de detecção. ELISAs de alto desempenho serão continuamente utilizados para validar biomarcadores etiológicos. Para garantir a mais alta sensibilidade e especificidade, uma plataforma multiplex automática robusta para a análise repetitiva de grandes coortes é essencial para validar biomarcadores para AVC hemorrágico. A análise de regressão linear ou logística será realizada para delinear a correlação entre os biomarcadores validados e os de critérios clínicos. Neste sentido, a vontade 2a). Melhorar a sensibilidade e a especificidade de biomarcadores sanguíneos candidatos por meio de equações de correlação otimizadas com tamanhos de amostra de sangue CCM aumentados e informações clínicas atualizadas; 2b). Definir novos biomarcadores usando abordagens ômicas de alto rendimento e 2c). Melhore a sensibilidade e aumente a faixa de trabalho dinâmica dos biomarcadores sanguíneos com uma plataforma de ensaio multiplex bead array (MBAA) e protocolos otimizados.

Objetivo da Fase 2: 3) Melhorar a utilidade clínica de biomarcadores de prognóstico/monitoramento validados com algoritmos otimizados em coortes maiores em preparação para ensaios clínicos em humanos. A hipótese de trabalho é que a sensibilidade clínica e a especificidade dos biomarcadores sanguíneos podem ser melhoradas por meio de uma abordagem cega de teste-reteste em coortes humanas independentes maiores. Este objetivo fornecerá provas suficientes de que a utilidade clínica dos biomarcadores sanguíneos pode ser melhorada e utilizada para prever o risco de acidente vascular cerebral hemorrágico, estabelecendo as bases para futuros ensaios clínicos e possíveis futuras aplicações clínicas revolucionárias. A equipe de pesquisa continuará a 3a). Melhorar a utilidade clínica otimizando a precisão dos algoritmos de prognóstico/monitoramento de biomarcadores/painéis validados usando coortes maiores; 3b). Melhorar ainda mais a utilidade clínica, confirmando a confiabilidade do(s) biomarcador(es)/painel(is) validado(s) em uma coorte maior; e 3c). Confirme se o(s) biomarcador(es)/painel(es) de prognóstico/monitoramento validados estão prontos para futuros ensaios clínicos.