CCM Blood Biomarker Validation Study

Cerebrale kavernøse misdannelser (CCM'er), en af ​​de mest almindelige vaskulære misdannelser, er karakteriseret ved unormalt udvidede intrakranielle kapillærer, hvilket resulterer i øget modtagelighed for hæmoragisk slagtilfælde. Som en autosomal dominant lidelse med ufuldstændig penetrering er størstedelen af ​​CCMs genmutationsbærere stort set asymptomatiske, men når der opstår symptomer, har sygdommen typisk nået stadiet med fokal blødning med irreversibel hjerneskade. I øjeblikket er den invasive neurokirurgiske fjernelse af CCM-læsioner den eneste behandlingsmulighed, på trods af tilbagevenden af ​​symptomer efter operationen. Derfor er der et stort behov for prognostiske/monitorerende biomarkører som risikoprædiktorer for forebyggelse af slagtilfælde. Målet er at udvikle et sæt prognostiske biomarkører for blod som risikoprædiktorer til forebyggelse af slagtilfælde. Formålet med dette projekt er at validere nye serumbiomarkører identificeret i Ccm-dyremodeller i humant blod, som kunne forudsige risikoen for hæmoragiske hændelser. Den centrale hypotese er, at kvantitativ påvisning af visse serumbiomarkører kan bruges til at forudsige tidspunktet for hæmoragiske hændelser. Hypotesen er blevet formuleret baseret på de seneste fund af fem serum-ætiologiske biomarkører forbundet med forstyrrelse af Blood-Brain Barrier (BBB), som kan føre til hæmoragiske hændelser. Ved at drage fordel af forskerholdets ekspertise inden for Ccm-patologi og serumbiomarkører vil den centrale hypotese blive testet for at nå studiemålet ved at forfølge følgende tre revolutionære mål i to faser, startende fra fase 1 med de to første biomarkøropdagelsesmål (1 , 2):

1. Validere blodprognostiske/monitorerende biomarkører med den optimerede detektionsplatform til forebyggelse af hæmoragisk slagtilfælde. Arbejdshypotesen er, at ekspressionsniveauer af visse blodmolekyler er korreleret med progressionen af ​​en forstyrret BBB. I dette formål vil serumbiomarkører identificeret i Ccms-mus blive valideret i blodprøverne fra CCM-patienter for at evaluere deres gennemførlighed og pålidelighed. Korrelationsfunktionerne mellem serum/plasma-niveauerne af biomarkører og progressionen af ​​en forstyrret BBB identificeret i Ccms mus vil blive testet ved hjælp af "gold standard", enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) platform i CCM patienter for 1a). Klinisk forberedelse til stor kohorte CCM-analyse; 1b). Validering af serumprogesteron (PRG) som en biomarkør, og 1c). Validering af 4 ætiologiske serumpeptidbiomarkører med den optimerede ELISA-platform hos CCM-patienter.
2. At optimere følsomheden, specificiteten, det dynamiske område og pålideligheden af ​​biomarkører ved hjælp af den banebrydende multiplex-platform til at forudsige risici for hæmoragisk slagtilfælde. Arbejdshypotesen er, at måleparametrene for blodbiomarkører, såsom sensitivitet, specificitet, dynamisk arbejdsområde og inter/intra variabilitet, kan forbedres drastisk med en større prøvestørrelse, forbedrede kliniske definitioner og bedre detektionsplatforme. Højtydende ELISA'er vil løbende blive brugt til at validere ætiologiske biomarkører. For at sikre den højeste sensitivitet og specificitet er en robust automatisk multipleksplatform til gentagne analyser af store kohorter afgørende for at validere biomarkører for hæmoragiske slagtilfælde. Lineær eller logistisk regressionsanalyse vil blive udført for at afgrænse sammenhængen mellem validerede biomarkører og de kliniske kriterier. I dette formål vil viljen 2a). Forbedre følsomheden og specificiteten af ​​kandidatblodbiomarkører gennem korrelationsligninger blev optimeret med øgede CCM-blodprøvestørrelser og opdateret klinisk information; 2b). Definer nye biomarkører ved hjælp af high-throughput omiske tilgange, og 2c). Forbedre følsomheden og øge det dynamiske arbejdsområde af blodbiomarkører med en multiplex bead array assay (MBAA) platform og optimerede protokoller.

Fase-2 Mål: 3) Forbedre den kliniske anvendelighed af validerede prognostiske/monitorerende biomarkører med optimerede algoritmer i større kohorter som forberedelse til humane kliniske forsøg. Arbejdshypotesen er, at klinisk sensitivitet og specificitet af blodbiomarkører kan forbedres yderligere gennem en blindt test-gentest tilgang i større uafhængige humane kohorter. Dette mål vil give tilstrækkeligt bevis på, at den kliniske anvendelighed af blodbiomarkører kan forbedres og bruges til at forudsige risikoen for hæmoragisk slagtilfælde, hvilket lægger grundlaget for fremtidige kliniske forsøg og mulige fremtidige revolutionerende kliniske anvendelser. Forskerholdet fortsætter til 3a). Forbedre den kliniske anvendelighed ved at optimere præcisionen af ​​prognostiske/monitoreringsalgoritmer for validerede biomarkører/paneler ved brug af større kohorter; 3b). Yderligere forbedre den kliniske anvendelighed ved at bekræfte pålideligheden af ​​validerede biomarkører/paneler i en større kohorte; og 3c). Bekræft, at validerede prognostiske/monitorerende biomarkører/paneler er klar til fremtidige kliniske forsøg.