Badanie walidacyjne biomarkerów krwi CCM

Malformacje jamiste mózgu (CCM), jedna z najczęstszych malformacji naczyniowych, charakteryzują się nieprawidłowo rozszerzonymi naczyniami włosowatymi wewnątrzczaszkowymi, co powoduje zwiększoną podatność na udar krwotoczny. Jako autosomalne dominujące zaburzenie z niepełną penetracją, większość nosicieli mutacji genu CCM jest w dużej mierze bezobjawowa, ale kiedy pojawiają się objawy, choroba zazwyczaj osiąga stadium ogniskowego krwotoku z nieodwracalnym uszkodzeniem mózgu. Obecnie jedyną opcją leczenia jest inwazyjne neurochirurgiczne usunięcie zmian CCM, pomimo nawrotu objawów pooperacyjnych. Dlatego istnieje poważna potrzeba prognostycznych/monitorujących biomarkerów jako predyktorów ryzyka w zapobieganiu udarowi mózgu. Celem jest opracowanie zestawu biomarkerów prognostycznych dotyczących krwi jako predyktorów ryzyka w zapobieganiu udarowi. Celem tego projektu jest walidacja nowych biomarkerów surowicy zidentyfikowanych w modelach zwierzęcych Ccm w ludzkiej krwi, które mogłyby przewidywać ryzyko zdarzeń krwotocznych. Główną hipotezą jest to, że ilościowe wykrywanie niektórych biomarkerów w surowicy może być wykorzystane do przewidywania czasu zdarzeń krwotocznych. Hipoteza została sformułowana w oparciu o ostatnie odkrycia pięciu biomarkerów etiologicznych surowicy związanych z przerwaniem bariery krew-mózg (BBB), co może prowadzić do zdarzeń krwotocznych. Korzystając z doświadczenia zespołu badawczego w zakresie patologii Ccm i biomarkerów surowicy, główna hipoteza zostanie przetestowana, aby osiągnąć cel badania poprzez realizację następujących trzech rewolucyjnych celów w dwóch fazach, zaczynając od fazy 1 z pierwszymi dwoma celami odkrycia biomarkerów (1 , 2):

1. Weryfikuj biomarkery prognostyczne/monitorujące krew za pomocą zoptymalizowanej platformy wykrywania w celu zapobiegania udarom krwotocznym. Hipotezą roboczą jest to, że poziomy ekspresji pewnych cząsteczek krwi są skorelowane z postępem zaburzonego BBB. W tym celu biomarkery surowicy zidentyfikowane u myszy Ccms zostaną zweryfikowane w próbkach krwi pacjentów z CCM, aby ocenić ich wykonalność i wiarygodność. Funkcje korelacji między poziomami biomarkerów w surowicy / osoczu a progresją zakłóconego BBB zidentyfikowanego u myszy Ccms zostaną przetestowane przy użyciu platformy „złotego standardu”, testu immunoenzymatycznego (ELISA) u pacjentów z CCM dla 1a). Przygotowanie kliniczne do analizy dużych kohort CCM; 1b). Walidacja progesteronu w surowicy (PRG) jako biomarkera i 1c). Walidacja 4 biomarkerów etiologicznych peptydów w surowicy za pomocą zoptymalizowanej platformy ELISA u pacjentów z CCM.
2. Aby zoptymalizować czułość, swoistość, zakres dynamiczny i niezawodność biomarkerów przy użyciu najnowocześniejszej platformy multipleksowej do przewidywania ryzyka udaru krwotocznego. Hipoteza robocza jest taka, że ​​parametry pomiarowe biomarkerów krwi, takie jak czułość, swoistość, dynamiczny zakres roboczy i zmienność między/wewnątrz, można drastycznie poprawić dzięki większej wielkości próbki, ulepszonym definicjom klinicznym i lepszym platformom wykrywania. Wysokowydajne testy ELISA będą stale wykorzystywane do walidacji biomarkerów etiologicznych. Aby zapewnić najwyższą czułość i specyficzność, do walidacji biomarkerów udarów krwotocznych niezbędna jest solidna automatyczna platforma multipleksowa do powtarzalnej analizy dużych kohort. Przeprowadzona zostanie analiza regresji liniowej lub logistycznej w celu określenia korelacji między zatwierdzonymi biomarkerami a kryteriami klinicznymi. W tym celu wola 2a). Popraw czułość i swoistość potencjalnych biomarkerów krwi dzięki optymalizacji równań korelacji ze zwiększonymi rozmiarami próbek krwi CCM i zaktualizowanymi informacjami klinicznymi; 2b). Zdefiniuj nowe biomarkery przy użyciu wysokowydajnych metod omicznych i 2c). Popraw czułość i zwiększ dynamiczny zakres roboczy biomarkerów krwi dzięki platformie multiplex bead array assay (MBAA) i zoptymalizowanym protokołom.

Cel fazy 2: 3) Poprawa użyteczności klinicznej zatwierdzonych biomarkerów prognostycznych/monitorujących za pomocą zoptymalizowanych algorytmów w większych kohortach w ramach przygotowań do badań klinicznych na ludziach. Hipotezą roboczą jest to, że czułość kliniczną i swoistość biomarkerów krwi można jeszcze bardziej poprawić poprzez ślepe podejście test-retest w większych niezależnych kohortach ludzkich. Cel ten dostarczy wystarczających dowodów na to, że kliniczna użyteczność biomarkerów krwi może zostać ulepszona i wykorzystana do przewidywania ryzyka udaru krwotocznego, kładąc podwaliny pod przyszłe badania kliniczne i możliwe przyszłe rewolucyjne zastosowania kliniczne. Zespół badawczy będzie kontynuował 3a). Popraw użyteczność kliniczną poprzez optymalizację precyzji algorytmów prognostycznych/monitorujących zwalidowanych biomarkerów/paneli przy użyciu większych kohort; 3b). Dalsza poprawa użyteczności klinicznej poprzez potwierdzenie wiarygodności zwalidowanych biomarkerów/paneli w większej kohorcie; i 3c). Potwierdź, że zatwierdzone biomarkery prognostyczne/monitorujące/panele są gotowe do przyszłych badań klinicznych.