Validační studie krevních biomarkerů CCM

Cerebrální kavernózní malformace (CCM), jedna z nejčastějších cévních malformací, se vyznačují abnormálně dilatovanými intrakraniálními kapilárami, což vede ke zvýšené náchylnosti ke hemoragické mrtvici. Jako autozomálně dominantní porucha s neúplnou penetrací je většina přenašečů genových mutací CCM z velké části asymptomatická, ale když se objeví symptomy, onemocnění typicky dosáhlo stadia fokálního krvácení s nevratným poškozením mozku. V současné době je invazivní neurochirurgické odstranění lézí CCM jedinou možností léčby, a to i přes recidivu symptomů po operaci. Proto existuje vážná potřeba prognostických/monitorovacích biomarkerů jako prediktorů rizik pro prevenci mrtvice. Cílem je vyvinout soubor krevních prognostických biomarkerů jako prediktorů rizik pro prevenci cévní mozkové příhody. Cílem tohoto projektu je ověřit nové sérové ​​biomarkery identifikované na zvířecích modelech Ccm v lidské krvi, které by mohly predikovat riziko hemoragických příhod. Ústřední hypotézou je, že kvantitativní detekci určitých sérových biomarkerů lze využít k predikci načasování hemoragických příhod. Hypotéza byla formulována na základě nedávných zjištění pěti sérových etiologických biomarkerů spojených s narušením hematoencefalické bariéry (BBB), které by mohlo vést ke hemoragickým příhodám. S využitím odborných znalostí výzkumného týmu v oblasti patologie Ccm a sérových biomarkerů bude hlavní hypotéza testována k dosažení cíle studie sledováním následujících tří revolučních cílů ve dvou fázích, počínaje fází 1 s prvními dvěma cíli objevu biomarkerů (1 , 2):

1. Ověřujte krevní prognostické/monitorovací biomarkery pomocí optimalizované detekční platformy pro prevenci hemoragické mrtvice. Pracovní hypotéza je, že hladiny exprese určitých krevních molekul korelují s progresí narušeného BBB. Za tímto účelem budou sérové ​​biomarkery identifikované u Ccms myší validovány ve vzorcích krve pacientů s CCM, aby se vyhodnotila jejich proveditelnost a spolehlivost. Korelační funkce mezi hladinami biomarkerů v séru/plazmě a progresí narušeného BBB identifikovaného u Ccms myší budou testovány pomocí „zlatého standardu“, platformy ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) u pacientů s CCM pro 1a). Klinická příprava na analýzu CCM velké kohorty; 1b). Validace sérového progesteronu (PRG) jako biomarkeru a 1c). Validace 4 etiologických sérových peptidových biomarkerů s optimalizovanou platformou ELISA u pacientů s CCM.
2. Optimalizovat senzitivitu, specificitu, dynamický rozsah a spolehlivost biomarkerů pomocí špičkové multiplexní platformy k predikci rizik hemoragické mrtvice. Pracovní hypotéza je, že parametry měření krevních biomarkerů, jako je senzitivita, specificita, dynamický pracovní rozsah a inter/intra variabilita, lze výrazně zlepšit pomocí větší velikosti vzorku, vylepšených klinických definic a lepších detekčních platforem. Pro validaci etiologických biomarkerů budou nepřetržitě využívány vysoce výkonné testy ELISA. K zajištění nejvyšší citlivosti a specifičnosti je nezbytná robustní automatická multiplexní platforma pro opakovanou analýzu velkých kohort pro validaci biomarkerů pro hemoragické mrtvice. Bude provedena lineární nebo logistická regresní analýza k vymezení korelace mezi validovanými biomarkery a biomarkery klinických kritérií. V tomto cíli vůle 2a). Zlepšení citlivosti a specifity kandidátních krevních biomarkerů prostřednictvím korelačních rovnic byly optimalizovány se zvětšenou velikostí krevních vzorků CCM a aktualizovanými klinickými informacemi; 2b). Definujte nové biomarkery pomocí vysoce výkonných omických přístupů a 2c). Zlepšete citlivost a zvyšte dynamický pracovní rozsah krevních biomarkerů pomocí platformy multiplexního testu s kuličkami (MBAA) a optimalizovaných protokolů.

Fáze 2 Cíl: 3) Zlepšit klinickou využitelnost validovaných prognostických/monitorovacích biomarkerů s optimalizovanými algoritmy ve větších kohortách v rámci přípravy na klinické studie na lidech. Pracovní hypotézou je, že klinickou senzitivitu a specificitu krevních biomarkerů lze dále zlepšit přístupem slepého testu a opakovaného testování ve větších nezávislých lidských kohortách. Tento cíl poskytne dostatečný důkaz, že klinickou využitelnost krevních biomarkerů lze zlepšit a využít k predikci rizika hemoragické cévní mozkové příhody, čímž položí základy pro budoucí klinické studie a možné budoucí revoluční klinické aplikace. Výzkumný tým bude pokračovat do 3a). Zlepšení klinické užitečnosti optimalizací přesnosti prognostických/monitorovacích algoritmů validovaných biomarkerů/panelů/panelů s použitím větších kohort; 3b). Dále zlepšit klinickou využitelnost potvrzením spolehlivosti validovaného biomarkeru(ů)/panelu(ů) ve větší kohortě; a 3c). Potvrďte, že validované prognostické/monitorovací biomarkery/panely jsou připraveny pro budoucí klinické studie.