Autologinen rasvaperäinen aikuisen kantasoluistutus sarveiskalvon sairauksiin (ADASCs-CT-CD) (ADASCs-CT-CD)

Erityyppisiä kantasoluja on käytetty eri tavoin useissa tutkimusprojekteissa optimaalisen menetelmän löytämiseksi ihmisen sarveiskalvon strooman regeneroimiseksi. Se sisälsi useita lähestymistapoja, jotka voidaan luokitella kantasolujen intrastromaaliseen implantointiin (1) yksin, (2) yhdessä biologisesti hajoavan tukikehyksen kanssa, (3) ei-biohajoavan tukikehyksen kanssa tai (4) soluista poistetun sarveiskalvon stroomarakenteen kanssa. Sarveiskalvon strooman monimutkaista rakennetta ei ole vielä toistettu, ja synteettisten rakennustelinepohjaisten mallien käytöllä on hyvin tunnettuja haittoja. Viime aikoina on kuvattu useita sarveiskalvon solunpoistotekniikoita, jotka tarjoavat soluttoman sarveiskalvon ekstrasellulaarisen matriisin (ECM). Nämä telineet ovat saaneet huomiota viime vuosina. Teline tarjoaa luonnollisemman ympäristön solujen kasvulle ja erilaistumiselle verrattuna synteettisiin telineisiin. Lisäksi ECM:n komponentit ovat yleensä säilyneitä lajien keskuudessa, ja jopa ksenogeeniset vastaanottajat sietävät niitä hyvin. Keratosyytit ovat välttämättömiä sarveiskalvon strooman uudelleenmuodostumiselle ja normaalille epiteelin fysiologialle. Tämä korostaa solun korvikkeen siirtämisen tärkeyttä yhdessä rakenteellisen tuen (asellulaarisen ECM) kanssa näiden kriittisten toimintojen suorittamiseksi sarveiskalvon homeostaasissa. Tutkijoiden parhaan tietämyksen mukaan kaikissa yrityksissä sarveiskalvon solujen uudelleenpopuloimiseksi on käytetty sarveiskalvon soluja, mutta näillä soluilla on suuria haittoja, jotka estävät niiden autologisen käytön kliinisessä käytännössä (luovuttajakudoksen vaurioituminen, solujen puute ja tehottomat solualaviljelmät ), siis pyrkimyksiä löytää autologisten solujen silmänulkoinen lähde. Tutkijoiden äskettäinen tutkimus on osoittanut ihmisen soluttomien sarveiskalvon stroomalaminoiden täydellisen biologisen integraation (100 µm paksuus) h-ADASC-kolonisaatiolla kanin sarveiskalvon sisällä ja ilman sitä in vivo ilman, että havaitaan mitään hyljintävastetta, vaikka siirrännäinen on ksenogeeninen. Tutkijat osoittivat myös h-ADASC:iden erilaistumisen toiminnallisiksi keratosyyteiksi näiden implanttien sisällä in vivo, jotka sitten saavuttivat oikean biofunktionalisoinnin. Tutkijan näkemyksen mukaan kantasolujen siirto yhdessä desellularisoidun sarveiskalvon ECM:n kanssa olisi paras tekniikka sairaan ihmisen sarveiskalvon paksuuden palauttamiseksi tehokkaasti, kuten keratoconuksessa. Tämän tekniikan avulla ja käyttämällä potilaiden ekstraokulaarisia mesenkymaalisia kantasoluja on mahdollista muuttaa allergeeniset siirteet toiminnallisiksi autologisiksi siirteiksi, jolloin teoriassa vältetään hylkimisriski.

Prosessin kulku määritellään seuraavasti: (1) tiedostotutkimus: joka alkaa vastaanottamalla potilastiedosto, tiedosto välitetään nimetyille lääkäreiden koordinaattoreille tarkistettavaksi ja lääkärinlausunnon toimittamista varten, jonka jälkeen lääketieteellinen raportti arvioidaan soluterapiatoimikuntaa ja potilasta pyydetään kliiniseen tutkimukseen, ja kuulemisen jälkeen potilaalle lähetetään vastaus lääketieteellisellä päätöksellä, jossa hyväksytään tai ei rekrytoida, ja jos kyllä, toimitetaan lyhyt raportti toimenpiteestä ja selitetään yksityiskohtaisesti potilaalle, suostumuslomake on allekirjoitettava, jos potilas suostuu tutkimukseen, (2) potilasvastaanotto: joka voi alkaa täyttämällä toimenpidelomakkeita ja tekemällä pre-op-arviointi (alkutyöstö). määritellään C.A.S:n kliiniseksi ja biologiseksi arvioinniksi, johon voi sisältyä ilman apuvälinettä ja parhaat silmälasikorjatut näöntarkkuus, refraktio, rakolamppututkimus, silmänpaine, silmänpohjan tähystys, sarveiskalvon topografia aphy, aberrometria, endoteelisolujen määrä (pekulaarimikroskopia), sarveiskalvon konfokaalimikroskopia sekä verikokeet), kaikki nämä testit tulee suorittaa asiantuntijan toimesta ja silmälääkärin tarkastettavaksi. Sitten plastiikkakirurgin tehtävänä ihonalaisen rasvakudoksen lipoaspiraatio, näytteen käsittely cGMP-laitoksessa ADASC-soluilla rikastetun stromaalisen vaskulaarisen fraktion eristämiseksi ja karakterisoimiseksi sekä laminaattien valmistelu (laadunvalvonta-arviointi toteutetaan ennen ja kaikkien toimenpiteen vaiheiden jälkeen ADASC-keräyksestä implantaatioon, mukaan lukien soluviljelmä, solujen hiljentyminen, ihmisen sarveiskalvon solujen poisto, lamellien solujen uudelleenmuodostaminen ADASC-soluilla ja implantaatio; arviointi sisältää solujen elinkelpoisuuden, solujen lukumäärän, solujen apoptoosin, immunofenotyypitys, infektio, tulehdus analysoimalla ADASC:istä erittyneet sytokiinit, lamellien leikkaaminen, kalvon paksuus, immunovärjäys, konfokaalinen mikroskopia jne.); (3) synnytys (implantaatio), joka alkaa peribulbaarisella tai retrobulbaarisella anestesialla, jossa potilas asetetaan leikkausmikroskoopin alle, jonka jälkeen suoritetaan femtosekunnin laseravusteinen stroomalamellidissektio, jonka jälkeen sijoitetaan autologiset ADASC:t tai lamellit tai solukalvot. taskussa ja lopulta suljetaan erinomaisella viillokuljetuksella. Potilaalle annetaan antibioottikuuri/steroidihoito tietyksi ajaksi, ja ryhmä seuraa häntä 1 viikon, 2 viikon, 1 kuukauden, 3 kuukauden, 6 kuukauden kuluttua.

Tätä soluterapiaprotokollaa sovelletaan yksinomaan VISSUMissa (Alicante-Espanja), Barraquer Ophthalmology Centerissä (Barcelona-Espanja), Ramon y Cajalin sairaalassa (Madrid-Espanja), Asturias Prince Hospitalissa (Madrid-Espanja) ja Murcian sairaalassa (Murcia) -Espanja), joka on yhteydessä Miguel Hernandeziin Elchen yliopistosta (Elche-Espanja).

Potilaan rekrytointi tapahtuu: lipoaspiraatioon, prosessointiin, solukalvojen valmistukseen ja laadunvalvontaarviointiin VISSUMissa (Alicante-Espanja), Barraquer Ophthalmology Centerissä (Barcelona-Espanja), Ramon y Cajal Hospitalissa (Madrid-Espanja) ja Murciassa. Sairaala (Murcia-Espanja). Kaikkia näitä vaiheita hallinnoi VISSUM (Prof. J. ALIO).