Implante autólogo de células madre adultas derivadas de tejido adiposo para enfermedades de la córnea (ADASCs-CT-CD) (ADASCs-CT-CD)

Se han utilizado diferentes tipos de células madre de diversas maneras en varios proyectos de investigación para encontrar el procedimiento óptimo para regenerar el estroma corneal humano. Incluyó varios enfoques que pueden clasificarse como implantación intraestromal de células madre (1) solas, (2) junto con un andamio biodegradable, (3) con un andamio no biodegradable o (4) con un andamio estromal corneal descelularizado. La estructura compleja del estroma corneal aún no se ha replicado y existen inconvenientes bien conocidos en el uso de diseños basados ​​en andamios sintéticos. Recientemente, se han descrito varias técnicas de descelularización corneal, que proporcionan una matriz extracelular corneal (MEC) acelular. Estos andamios han ganado atención en los últimos años. El andamio proporciona un entorno más natural para el crecimiento y la diferenciación de las células en comparación con los andamios sintéticos. Además, los componentes de la ECM generalmente se conservan entre especies y son bien tolerados incluso por receptores xenogénicos. Los queratocitos son esenciales para la remodelación del estroma corneal y para la fisiología epitelial normal. Esto destaca la importancia de trasplantar un sustituto celular junto con el soporte estructural (ECM acelular) para llevar a cabo estas funciones críticas en la homeostasis corneal. Según el conocimiento de los investigadores, todos los intentos de repoblar andamios corneales descelularizados han utilizado células corneales, pero estas células tienen importantes inconvenientes que impiden su uso autólogo en la práctica clínica (daño del tejido donante, falta de células y subcultivos celulares ineficientes). ), de ahí los esfuerzos por encontrar una fuente extraocular de células autólogas. Un estudio reciente de los investigadores ha demostrado una biointegración perfecta de láminas estromales corneales descelularizadas humanas (100 µm de espesor) con y sin colonización de h-ADASCs dentro de la córnea de conejo in vivo, sin observar ninguna respuesta de rechazo a pesar de que el injerto es xenogénico. Los investigadores también demostraron la diferenciación de h-ADASC en queratocitos funcionales dentro de estos implantes in vivo, que luego lograron su biofuncionalización adecuada. Según la opinión del investigador, el trasplante de células madre junto con la MEC corneal descelularizada sería la mejor técnica para restaurar eficazmente el grosor de una córnea humana enferma, como el queratocono. Mediante esta técnica, y utilizando células madre mesenquimales extraoculares de pacientes, es posible transformar injertos alergénicos en injertos autólogos funcionales, evitando teóricamente el riesgo de rechazo.

El flujo del proceso se define de la siguiente manera: (1) el estudio del archivo: que comienza con la recepción del archivo del paciente, el archivo se enviará a los médicos coordinadores designados para su revisión y presentación del informe médico, luego se evaluará el informe médico dentro de Se le solicitará al comité de terapia celular y al paciente un examen clínico, y luego de la consulta, se le dará una respuesta al paciente con la decisión médica de aprobar o no ser reclutado y, en caso afirmativo, se presentará y explicará un breve informe sobre el procedimiento. en detalles al paciente, se debe firmar un formulario de consentimiento si el paciente acepta ser incluido en el estudio, (2) la admisión del paciente: que puede comenzar completando los formularios del procedimiento y realizando la evaluación preoperatoria (evaluación inicial definido como una evaluación clínica y biológica en el CAS que puede incluir agudeza visual sin ayuda y con la mejor corrección de anteojos, refracción, examen con lámpara de hendidura, presión intraocular, fundoscopía, topografía corneal afia, aberrometría, conteo de células endoteliales (microscopía especular), microscopía confocal corneal, así como análisis de sangre), todas estas pruebas deben ser realizadas por un especialista y revisadas por un oftalmólogo. Luego, una lipoaspiración del tejido adiposo subcutáneo será realizada por un cirujano plástico, procesamiento de muestras en una instalación de cGMP para el aislamiento y caracterización de la fracción vascular estromal enriquecida con ADASC, así como la preparación de láminas (la evaluación del control de calidad se realizará antes y después). después de todos los pasos del procedimiento, desde la recolección de ADASC hasta la implantación, incluido el cultivo celular, la quiescencia celular, la descelularización de la lámina corneal humana, la recelularización de las láminas con ADASC y la implantación; la evaluación incluirá la viabilidad celular, el número de células, la apoptosis celular, inmunofenotipado, infección, inflamación mediante el análisis de las citocinas secretadas por ADASC, corte de lámina, espesor de lámina, inmunotinción, microscopía confocal, etc.); (3) el parto (implantación) que comienza con una anestesia peribulbar o retrobulbar en la que se coloca al paciente bajo el microscopio quirúrgico, seguido de una disección lamelar del estroma medio asistida por láser de femtosegundo, luego se colocarán las ADASC autólogas o láminas o láminas recelularizadas dentro del bolsillo, y finalmente cerrado por un cierre de incisión superior. El paciente recibirá antibióticos/esteroides durante un período definido y será seguido por el equipo a la semana, 2 semanas, 1 mes, 3 meses, 6 meses.

Este protocolo de terapia celular se aplicará exclusivamente en VISSUM (Alicante-España), Centro de Oftalmología Barraquer (Barcelona-España), Hospital Ramón y Cajal (Madrid-España), Hospital Príncipe de Asturias (Madrid-España) y Hospital de Murcia (Murcia). -España), en afiliación con Miguel Hernández de la Universidad de Elche (Elche-España).

El reclutamiento del paciente se realizará: para la lipoaspiración, procesamiento, preparación de las láminas celularizadas y evaluaciones de control de calidad en VISSUM (Alicante-España), Centro de Oftalmología Barraquer (Barcelona-España), Hospital Ramón y Cajal (Madrid-España) y Murcia Hospital (Murcia-España). Todos estos pasos son gestionados por VISSUM (Prof. J. ALÍO).