Autolog fedtafledt voksenstamcelleimplantation for hornhindesygdomme (ADASCs-CT-CD) (ADASCs-CT-CD)

Forskellige typer stamceller er blevet brugt på forskellige måder i flere forskningsprojekter for at finde den optimale procedure til at regenerere det menneskelige hornhindestroma. Det omfattede flere tilgange, der kan klassificeres som intrastromal implantation af stamceller (1) alene, (2) sammen med et biologisk nedbrydeligt stillads, (3) med et ikke-biologisk nedbrydeligt stillads eller (4) med et decellulariseret stromal hornhindestillads. Den komplekse struktur af hornhindens stroma er endnu ikke blevet replikeret, og der er velkendte ulemper ved brugen af ​​syntetiske stilladsbaserede designs. For nylig er flere hornhindedecellulariseringsteknikker blevet beskrevet, som giver en acellulær hornhinde ekstracellulær matrix (ECM). Disse stilladser har fået opmærksomhed i de sidste par år. Stilladset giver et mere naturligt miljø for vækst og differentiering af celler sammenlignet med syntetiske stilladser. Derudover er komponenter i ECM generelt bevaret blandt arter og tolereres godt selv af xenogene recipienter. Keratocytter er essentielle for ombygning af hornhindens stroma og for normal epitelfysiologi. Dette fremhæver vigtigheden af ​​at transplantere en cellulær erstatning sammen med den strukturelle støtte (acellulær ECM) for at udføre disse kritiske funktioner i hornhindens homeostase. Så vidt efterforskerne ved, har alle forsøg på at genbefolke decellulariserede hornhindestilladser brugt hornhindeceller, men disse celler har store ulemper, der udelukker deres autologe anvendelse i klinisk praksis (beskadigelse af donorvævet, mangel på celler og ineffektive cellesubkulturer ), således bestræbelserne på at finde en ekstraokulær kilde til autologe celler. En nylig undersøgelse foretaget af efterforskerne har vist en perfekt biointegration af humane decellulariserede corneale stromale laminas (100 µm tykkelse) med og uden h-ADASCs kolonisering inde i kaninhornhinden in vivo, uden at observere nogen afvisningsrespons på trods af at transplantatet er xenogent. Forskerne demonstrerede også differentieringen af ​​h-ADASC'er til funktionelle keratocytter inde i disse implantater in vivo, som derefter opnåede deres korrekte biofunktionalisering. Ifølge efterforskerens mening ville transplantation af stamceller sammen med decellulariseret corneal ECM være den bedste teknik til effektivt at genoprette tykkelsen af ​​en syg menneskelig hornhinde, som i keratoconus. Gennem denne teknik og ved hjælp af ekstraokulære mesenkymale stamceller fra patienter er det muligt at transformere allergifremkaldende transplantater til funktionelle autologe transplantater, hvilket teoretisk undgår risikoen for afstødning.

Procesflowet er defineret som følgende: (1) filstudiet: som starter med at modtage patientjournalen, filen vil blive sendt til udpegede lægekoordinatorer til gennemgang og indsendelse af lægerapport, derefter vil lægerapporten blive evalueret inden for celleterapiudvalget og patienten vil blive bedt om klinisk undersøgelse, og efter konsultation vil der følge et svar til patienten med lægelig afgørelse med en godkendelse eller ikke at blive rekrutteret, og hvis ja, vil en kort rapport om proceduren blive indsendt og forklaret i detaljer til patienten, skal en samtykkeerklæring underskrives, hvis patienten accepterer at blive inkluderet i undersøgelsen, (2) patientindlæggelsen: som kan starte med udfyldelse af procedureformularerne og udførelsen af ​​den præ-op-evaluering (indledende oparbejdning) defineret som en klinisk og biologisk vurdering på C.A.S, som kan omfatte uhjulpet og bedst brillekorrigeret synsstyrke, refraktion, spaltelampeundersøgelse, intraokulært tryk, fundoskopi, corneal topogr aphy, aberrometri, endothelcelletælling (spekulær mikroskopi), hornhindekonfokalmikroskopi, samt blodprøver), bør alle disse test udføres af en specialist og gennemgås af en øjenlæge. Derefter en lipoaspiration af det subkutane fedtvæv, der skal udføres af en plastikkirurg, prøvebehandling på en cGMP-facilitet til isolering og karakterisering af den stromale vaskulære fraktion beriget med ADASC'er samt forberedelse af laminer (kvalitetskontrolvurderingen vil blive realiseret før og efter alle trinene i proceduren, der starter fra ADASC's indsamling til implantation, inklusive cellekultur, cellehvile, decellularisering af human hornhindelamina, recellularisering af laminaerne med ADASC'er og implantation; vurderingen vil omfatte cellelevedygtighed, celleantal, celleapoptose, immunfænotypning, infektion, inflammation ved at analysere de udskilte cytokiner fra ADASC'er, lamina-skæring, lamina-tykkelse, immunfarvning, konfokal mikroskopi, etc.); (3) leveringen (implantationen), som starter med en peribulbar eller retrobulbar anæstesi, hvor patienten placeres under operationsmikroskop, efterfulgt af en femtosekund laserassisteret mid-stromal lamellar dissektion, hvorefter de autologe ADASC'er eller laminaer eller recellulariserede laminer vil blive placeret i lommen og til sidst lukket med en overlegen snitlukning. Patienten vil blive sat under antibiotika/steroider i en defineret periode og efterfulgt af teamet efter 1 uge, 2 uger, 1 måned, 3 måneder, 6 måneder.

Denne protokol for celleterapi vil udelukkende blive anvendt på VISSUM (Alicante-Spanien), Barraquer Ophthalmology Center (Barcelona-Spanien), Ramon y Cajal Hospital (Madrid-Spanien), Asturias Prince Hospital (Madrid-Spanien) og Murcia Hospital (Murcia) -Spanien), i tilknytning til Miguel Hernandez fra Elche University (Elche-Spanien).

Patientens rekruttering vil finde sted: til lipoaspiration, behandling, forberedelse af cellulariserede laminas og kvalitetskontrolvurderinger i VISSUM (Alicante-Spanien), Barraquer Ophthalmology Center (Barcelona-Spanien), Ramon y Cajal Hospital (Madrid-Spanien) og Murcia Hospital (Murcia-Spanien). Alle disse trin administreres af VISSUM (Prof. J. ALIO).