Autolog fettavledet voksen stamcelleimplantasjon for hornhinnesykdommer (ADASCs-CT-CD) (ADASCs-CT-CD)

Ulike typer stamceller har blitt brukt på ulike måter i flere forskningsprosjekter for å finne den optimale prosedyren for å regenerere det menneskelige hornhinnestroma. Den inkluderte flere tilnærminger som kan klassifiseres som intrastromal implantasjon av stamceller (1) alene, (2) sammen med et biologisk nedbrytbart stillas, (3) med et ikke-biologisk nedbrytbart stillas, eller (4) med et decellularisert hornhinnestromalt stillas. Den komplekse strukturen til hornhinnens stroma er ennå ikke replikert, og det er velkjente ulemper ved bruk av syntetiske stillasbaserte design. Nylig har flere hornhinnedecellulariseringsteknikker blitt beskrevet, som gir en acellulær hornhinne ekstracellulær matrise (ECM). Disse stillasene har fått oppmerksomhet de siste årene. Stillaset gir et mer naturlig miljø for vekst og differensiering av celler sammenlignet med syntetiske stillaser. I tillegg er komponenter av ECM generelt bevart blant arter og tolereres godt selv av xenogene mottakere. Keratocytter er essensielle for ombygging av hornhinnens stroma og for normal epitelfysiologi. Dette fremhever viktigheten av å transplantere en cellulær erstatning sammen med den strukturelle støtten (acellulær ECM) for å utføre disse kritiske funksjonene i hornhinnens homeostase. Så vidt etterforskerne vet har alle forsøk på å repopulere decellulariserte hornhinnestillas brukt hornhinneceller, men disse cellene har store ulemper som utelukker deres autologe bruk i klinisk praksis (skade på donorvevet, mangel på celler og ineffektive cellesubkulturer ), og dermed forsøket på å finne en ekstraokulær kilde til autologe celler. En fersk studie av etterforskerne har vist en perfekt biointegrasjon av humane decellulariserte hornhinnestromale laminas (100 µm tykkelse) med og uten h-ADASCs kolonisering inne i kaninhornhinnen in vivo, uten å observere noen avvisningsrespons til tross for at transplantatet er xenogent. Etterforskerne demonstrerte også differensieringen av h-ADASC-er til funksjonelle keratocytter inne i disse implantatene in vivo, som deretter oppnådde sin riktige biofunksjonalisering. Ifølge etterforskerens mening vil transplantasjon av stamceller sammen med decellularisert hornhinne-ECM være den beste teknikken for å effektivt gjenopprette tykkelsen på en syk menneskelig hornhinne, som i keratokonus. Gjennom denne teknikken, og ved å bruke ekstraokulære mesenkymale stamceller fra pasienter, er det mulig å transformere allergifremkallende transplantater til funksjonelle autologe transplantater, og teoretisk unngår man risikoen for avstøting.

Prosessflyten er definert som følgende: (1) filstudien: som starter med å motta filen til pasienten, filen vil bli videresendt til oppnevnte legekoordinatorer for gjennomgang og innsending av medisinsk rapport, deretter vil den medisinske rapporten bli evaluert innen celleterapiutvalget og pasienten vil bli bedt om klinisk undersøkelse, og etter konsultasjon vil svar til pasienten med medisinsk avgjørelse følge med godkjenning eller ikke rekrutteres og hvis ja, vil en kort rapport om prosedyren bli sendt inn og forklart i detaljer til pasienten, et samtykkeskjema må signeres hvis pasienten godtar å bli inkludert i studien, (2) pasientinnleggelsen: som kan starte med utfylling av prosedyreskjemaene og foreta den pre-operasjonsevalueringen (første opparbeidelse) definert som en klinisk og biologisk vurdering på C.A.S som kan inkludere uten hjelp og beste brillekorrigert synsskarphet, refraksjon, spaltelampeundersøkelse, intraokulært trykk, fundoskopi, hornhinnetopogr afy, aberrometri, endotelcelletall (speilmikroskopi), hornhinnekonfokalmikroskopi, samt blodprøver), bør alle disse testene utføres av en spesialist og gjennomgås av en øyelege. Deretter en lipoaspirasjon av det subkutane fettvevet som skal utføres av en plastikkirurg, prøvebehandling på et cGMP-anlegg for isolering og karakterisering av den stromale vaskulære fraksjonen beriket med ADASCs samt forberedelse av laminas (kvalitetskontrollvurderingen vil bli realisert før og etter alle trinnene i prosedyren fra ADASCs samling til implantasjon inkludert cellekultur, cellehvile, decellularisering av menneskelig hornhinnelamina, recellularisering av laminas med ADASCs og implantasjon; vurderingen vil inkludere cellelevedyktighet, celleantall, celleapoptose, immunfenotyping, infeksjon, betennelse ved å analysere de utskilte cytokinene fra ADASC-er, lamina-skjæring, lamina-tykkelse, immunfarging, konfokalmikroskopi, etc.); (3) leveringen (implantasjonen) som starter med en peribulbar eller retrobulbar anestesi hvor pasienten plasseres under operasjonsmikroskop, etterfulgt av en femtosekund laserassistert midstromal lamellardisseksjon, deretter vil de autologe ADASC-ene eller laminasene eller recellulariserte laminasene plasseres inne i lommen, og til slutt lukket med en overlegen snittlukking. Pasienten vil bli satt under antibiotika/steroider i en definert periode og etterfulgt av teamet ved 1 uke, 2 uker, 1 måned, 3 måneder, 6 måneder.

Denne protokollen for celleterapi vil bli brukt utelukkende ved VISSUM (Alicante-Spania), Barraquer Ophthalmology Center (Barcelona-Spania), Ramon y Cajal Hospital (Madrid-Spania), Asturias Prince Hospital (Madrid-Spania) og Murcia Hospital (Murcia) -Spania), i tilknytning til Miguel Hernandez ved Elche University (Elche-Spania).

Pasientens rekruttering vil finne sted: for lipoaspirasjon, prosessering, forberedelse av cellulariserte laminas og kvalitetskontrollvurderinger i VISSUM (Alicante-Spania), Barraquer Ophthalmology Center (Barcelona-Spania), Ramon y Cajal Hospital (Madrid-Spania) og Murcia Sykehus (Murcia-Spania). Alle disse trinnene administreres av VISSUM (Prof. J. ALIO).