Autologe adipöse adulte Stammzellimplantation bei Hornhauterkrankungen (ADASCs-CT-CD) (ADASCs-CT-CD)

Verschiedene Arten von Stammzellen wurden in mehreren Forschungsprojekten auf unterschiedliche Weise eingesetzt, um das optimale Verfahren zur Regeneration des menschlichen Hornhautstromas zu finden. Es umfasste mehrere Ansätze, die als intrastromale Implantation von Stammzellen (1) allein, (2) zusammen mit einem biologisch abbaubaren Gerüst, (3) mit einem nicht biologisch abbaubaren Gerüst oder (4) mit einem dezellularisierten Hornhautstroma-Gerüst klassifiziert werden können. Die komplexe Struktur des Hornhautstromas wurde noch nicht repliziert, und es gibt wohlbekannte Nachteile bei der Verwendung von Konstruktionen auf der Basis synthetischer Gerüste. Kürzlich wurden mehrere Hornhautdezellularisierungstechniken beschrieben, die eine azelluläre extrazelluläre Hornhautmatrix (ECM) bereitstellen. Diese Gerüste haben in den letzten Jahren an Aufmerksamkeit gewonnen. Das Gerüst bietet im Vergleich zu synthetischen Gerüsten eine natürlichere Umgebung für das Wachstum und die Differenzierung von Zellen. Darüber hinaus sind Komponenten der ECM im Allgemeinen artübergreifend konserviert und werden sogar von xenogenen Empfängern gut vertragen. Keratozyten sind für die Umgestaltung des Hornhautstromas und für die normale Epithelphysiologie unerlässlich. Dies unterstreicht die Bedeutung der Transplantation eines zellulären Ersatzes zusammen mit der strukturellen Unterstützung (azelluläre ECM), um diese kritischen Funktionen in der Homöostase der Hornhaut zu übernehmen. Nach bestem Wissen der Forscher wurden bei allen Versuchen, dezellularisierte Hornhautgerüste zu repopulieren, Hornhautzellen verwendet, aber diese Zellen haben große Nachteile, die ihre autologe Verwendung in der klinischen Praxis ausschließen (Schädigung des Spendergewebes, Mangel an Zellen und ineffiziente Zellsubkulturen ), daher die Bemühungen, eine extraokulare Quelle für autologe Zellen zu finden. Eine kürzlich von den Forschern durchgeführte Studie hat eine perfekte Biointegration menschlicher dezellularisierter Hornhaut-Stromaschichten (100 µm Dicke) mit und ohne h-ADASCs-Kolonisierung in der Kaninchenhornhaut in vivo gezeigt, ohne dass eine Abstoßungsreaktion beobachtet wurde, obwohl das Transplantat xenogen ist. Die Forscher demonstrierten auch die Differenzierung von h-ADASCs in funktionelle Keratozyten innerhalb dieser Implantate in vivo, die dann ihre richtige Biofunktionalisierung erreichten. Nach Ansicht des Forschers wäre die Transplantation von Stammzellen zusammen mit dezellularisierter Hornhaut-ECM die beste Technik, um die Dicke einer erkrankten menschlichen Hornhaut wie bei Keratokonus effektiv wiederherzustellen. Durch diese Technik und die Verwendung von extraokularen mesenchymalen Stammzellen von Patienten ist es möglich, allergene Transplantate in funktionelle autologe Transplantate umzuwandeln, wobei theoretisch das Risiko einer Abstoßung vermieden wird.

Der Prozessablauf ist wie folgt definiert: (1) Aktenprüfung: Beginnend mit Erhalt der Akte des Patienten, wird die Akte zur Überprüfung und Einreichung des medizinischen Berichts an die bestellten Arztkoordinatoren weitergeleitet, anschließend wird der medizinische Bericht ausgewertet Das Zelltherapie-Komitee und der Patient werden zur klinischen Untersuchung aufgefordert, und nach Rücksprache folgt eine Antwort an den Patienten mit medizinischer Entscheidung mit Zustimmung oder Nichtrekrutierung, und wenn ja, wird ein kurzer Bericht über das Verfahren vorgelegt und erläutert im Detail an den Patienten, eine Einverständniserklärung muss unterzeichnet werden, wenn der Patient einverstanden ist, in die Studie aufgenommen zu werden, (2) die Patientenaufnahme: die mit dem Ausfüllen der Verfahrensformulare und der Durchführung der präoperativen Bewertung (Erstaufarbeitung) beginnen kann definiert als eine klinische und biologische Beurteilung nach C.A.S, die die Sehschärfe ohne Hilfsmittel und die beste brillenkorrigierte Sehschärfe, Refraktion, Spaltlampenuntersuchung, Augeninnendruck, Fundoskopie, Hornhauttopogr umfassen kann Aphy, Aberrometrie, Endothelzellzählung (Spiegelmikroskopie), konfokale Hornhautmikroskopie sowie Bluttests), alle diese Tests sollten von einem Spezialisten durchgeführt und von einem Augenarzt überprüft werden. Dann eine Lipoaspiration des subkutanen Fettgewebes, die von einem plastischen Chirurgen durchgeführt wird, Probenverarbeitung in einer cGMP-Einrichtung zur Isolierung und Charakterisierung der mit ADASCs angereicherten Stroma-Gefäßfraktion sowie Lamina-Präparation (die Qualitätskontrollbewertung wird vor und durchgeführt nach allen Schritten des Verfahrens, beginnend von der Sammlung der ADASCs bis zur Implantation, einschließlich Zellkultur, Zellstillstand, Dezellularisierung der menschlichen Hornhautschicht, Rezellularisierung der Schichten mit ADASCs und Implantation; die Bewertung umfasst Zelllebensfähigkeit, Zellzahl, Zellapoptose, Immunphänotypisierung, Infektion, Entzündung durch Analyse der sezernierten Zytokine von ADASCs, Laminaschnitt, Laminadicke, Immunfärbung, konfokale Mikroskopie usw.); (3) die Entbindung (Implantation), die mit einer peribulbären oder retrobulbären Anästhesie beginnt, bei der der Patient unter einem Operationsmikroskop platziert wird, gefolgt von einer Femtosekundenlaser-unterstützten mittleren Stroma-Lamellendissektion, dann werden die autologen ADASCs oder Laminas oder rezellularisierten Laminas platziert innerhalb der Tasche und schließlich durch einen oberen Einschnittverschluss verschlossen. Der Patient wird für einen definierten Zeitraum mit Antibiotika/Steroiden behandelt und vom Team nach 1 Woche, 2 Wochen, 1 Monat, 3 Monaten, 6 Monaten weiterverfolgt.

Dieses Protokoll der Zelltherapie wird ausschließlich bei VISSUM (Alicante-Spanien), Barraquer Ophthalmology Center (Barcelona-Spanien), Ramon y Cajal Hospital (Madrid-Spanien), Asturias Prince Hospital (Madrid-Spanien) und Murcia Hospital (Murcia) angewendet -Spanien), in Zusammenarbeit mit Miguel Hernandez von der Universität Elche (Elche-Spanien).

Die Rekrutierung des Patienten erfolgt: für die Lipoaspiration, Verarbeitung, Vorbereitung der zellularisierten Lamina und Qualitätskontrollbewertungen in VISSUM (Alicante-Spanien), Barraquer Ophthalmology Center (Barcelona-Spanien), Ramon y Cajal Hospital (Madrid-Spanien) und Murcia Krankenhaus (Murcia-Spanien). All diese Schritte werden von VISSUM (Prof. J. ALIO).