Autologe van vetweefsel afgeleide volwassen stamcelimplantatie voor hoornvliesaandoeningen (ADASCs-CT-CD) (ADASCs-CT-CD)

Verschillende soorten stamcellen zijn op verschillende manieren gebruikt in verschillende onderzoeksprojecten om de optimale procedure te vinden om het menselijke hoornvliesstroma te regenereren. Het omvatte verschillende benaderingen die kunnen worden geclassificeerd als intrastromale implantatie van stamcellen (1) alleen, (2) samen met een biologisch afbreekbare scaffold, (3) met een niet-biologisch afbreekbare scaffold, of (4) met een van cellen ontdane stromale scaffold van het hoornvlies. De complexe structuur van het hoornvliesstroma is nog niet gerepliceerd en er zijn bekende nadelen aan het gebruik van ontwerpen op basis van synthetische scaffolds. Onlangs zijn verschillende corneale decellularisatietechnieken beschreven, die een acellulaire corneale extracellulaire matrix (ECM) verschaffen. Deze steigers hebben de laatste jaren veel aandacht gekregen. De steiger biedt een meer natuurlijke omgeving voor de groei en differentiatie van cellen in vergelijking met synthetische steigers. Bovendien zijn componenten van de ECM over het algemeen geconserveerd tussen soorten en worden ze goed verdragen, zelfs door xenogene ontvangers. Keratocyten zijn essentieel voor het hermodelleren van het hoornvliesstroma en voor normale epitheliale fysiologie. Dit benadrukt het belang van het transplanteren van een cellulaire vervanger samen met de structurele ondersteuning (acellulaire ECM) om deze kritieke functies in corneale homeostase uit te voeren. Voor zover de onderzoekers weten, zijn bij alle pogingen om ontcelde hoornvliessteigers opnieuw te bevolken hoornvliescellen gebruikt, maar deze cellen hebben belangrijke nadelen die hun autologe gebruik in de klinische praktijk uitsluiten (beschadiging van het donorweefsel, gebrek aan cellen en inefficiënte celsubculturen). ), dus de inspanningen om een ​​extraoculaire bron van autologe cellen te vinden. Een recente studie door de onderzoekers heeft een perfecte bio-integratie aangetoond van humane ontcelde stromale lamina's van het hoornvlies (100 µm dik) met en zonder h-ADASC-kolonisatie in het hoornvlies van het konijn in vivo, zonder enige afstotingsreactie waar te nemen, ondanks dat het transplantaat xenogeen is. De onderzoekers toonden ook de differentiatie aan van h-ADASC's in functionele keratocyten in deze implantaten in vivo, die vervolgens hun juiste biofunctionalisatie bereikten. Volgens de mening van de onderzoeker zou de transplantatie van stamcellen samen met ontcelde cornea-ECM de beste techniek zijn om de dikte van een ziek menselijk hoornvlies, zoals bij keratoconus, effectief te herstellen. Door deze techniek, en met behulp van extraoculaire mesenchymale stamcellen van patiënten, is het mogelijk om allergene transplantaten om te zetten in functionele autologe transplantaten, waardoor theoretisch het risico van afstoting wordt vermeden.

De processtroom wordt als volgt gedefinieerd: (1) de dossierstudie: die begint met het ontvangen van het dossier van de patiënt, het dossier wordt doorgestuurd naar de aangewezen artsencoördinatoren voor beoordeling en indiening van het medisch rapport, vervolgens wordt het medisch rapport binnen de celtherapiecommissie en de patiënt worden gevraagd voor klinisch onderzoek, en na overleg volgt een antwoord aan de patiënt met medische beslissing met een al dan niet in dienst nemen en zo ja, een kort verslag over de procedure wordt voorgelegd en toegelicht in details aan de patiënt, moet een toestemmingsformulier worden ondertekend als de patiënt ermee instemt om in het onderzoek te worden opgenomen, (2) de opname van de patiënt: die kan beginnen met het invullen van de procedureformulieren en het uitvoeren van de pre-operatieve evaluatie (eerste opwerking gedefinieerd als een klinische en biologische beoordeling van C.A.S, die zonder hulp en met de beste bril gecorrigeerde gezichtsscherpte, refractie, spleetlamponderzoek, intraoculaire druk, fundoscopie, corneale topogr kan omvatten afy, aberrometrie, endotheelceltelling (spiegelmicroscopie), confocale microscopie van het hoornvlies, evenals bloedonderzoeken), al deze onderzoeken moeten worden uitgevoerd door een specialist en beoordeeld door een oogarts. Vervolgens wordt een lipoaspiratie van het onderhuidse vetweefsel uitgevoerd door een plastisch chirurg, monsterverwerking in een cGMP-faciliteit voor isolatie en karakterisering van de stromale vasculaire fractie verrijkt met ADASC's, evenals voorbereiding van lamina's (de kwaliteitscontrole zal worden uitgevoerd vóór en na alle stappen van de procedure vanaf de verzameling van de ADASC's tot de implantatie, inclusief celkweek, celstilstand, decellularisatie van de menselijke hoornvlieslamina, recellularisatie van de lamina's met ADASC's en implantatie; de ​​beoordeling omvat de levensvatbaarheid van de cellen, het aantal cellen, celapoptose, immunofenotypering, infectie, ontsteking door analyse van de uitgescheiden cytokinen van ADASC's, lamina snijden, lamina dikte, immunokleuring, confocale microscopie, enz.); (3) de bevalling (implantatie) die begint met een peribulbaire of retrobulbaire anesthesie waarbij de patiënt onder een operatiemicroscoop wordt geplaatst, gevolgd door een femtoseconde laserondersteunde mid-stromale lamellaire dissectie, waarna de autologe ADASC's of lamina's of opnieuw gecellulaire lamina's worden geplaatst in de zak en uiteindelijk gesloten door een superieure incisiesluiting. De patiënt krijgt gedurende een bepaalde periode antibiotica/steroïden en wordt gevolgd door het team na 1 week, 2 weken, 1 maand, 3 maanden, 6 maanden.

Dit protocol van celtherapie zal exclusief worden toegepast in VISSUM (Alicante-Spanje), Barraquer Ophthalmology Center (Barcelona-Spanje), Ramon y Cajal Hospital (Madrid-Spanje), Asturias Prince Hospital (Madrid-Spanje) en Murcia Hospital (Murcia -Spanje), in samenwerking met Miguel Hernandez van de Universiteit van Elche (Elche-Spanje).

De werving van de patiënt zal plaatsvinden: voor de lipoaspiratie, verwerking, voorbereiding van de lamina's met cellen en kwaliteitscontrolebeoordelingen in VISSUM (Alicante-Spanje), Barraquer Ophthalmology Centre (Barcelona-Spanje), Ramon y Cajal Hospital (Madrid-Spanje) en Murcia Ziekenhuis (Murcia-Spanje). Al deze stappen worden begeleid door VISSUM (Prof. J ALIO).