Koko kehon aineenvaihdunta lapsilla ennen keskushermoston kasvaimen hoitoa ja sen jälkeen

Vertaamalla lapsia, joilla on äskettäin diagnosoitu keskushermostokasvain, lapsiin, jotka ovat saaneet CNS-kasvainhoidon, tutkijat haluavat kuvata aineenvaihduntapolkua noin kahden vuoden hoitojakson aikana, jonka nämä lapset käyvät läpi. Näitä tuloksia verrataan myös terveiden kontrollien tuloksiin.

Kokeilusuunnittelu ja aikataulu:

Prospektiivinen, ei-satunnaistettu, poikkileikkaustutkimus.

Mukana on kolme erilaista potilasryhmää:

• Potilasryhmä A: Lapset, joilla on äskettäin diagnosoitu keskushermoston kasvain
• Potilasryhmä B: Lapset saivat hoidon keskushermoston kasvaimen takia
• Terveet kontrollit: Lapset sairaalaan epilepsiavalvontayksikössä (EMU)

Koe kestää yhteensä kaksi päivää, ja se tapahtuu Rigshospitaletin lasten- ja nuorten lääketieteen laitoksella ja Kööpenhaminan Neuromuscular Centerissä, Neurologian laitoksella, Rigshospitaletissa.

• Opintopäivä 1: Arvioidaan kestävän noin 2 tuntia.
• Opintopäivä 2: Arvioidaan kestävän noin 8 tuntia.

Tutkimuspäivä 1: Lapsille tehdään DXA-skannaus ja he täyttävät elämänlaatukyselyt ja kipupisteet. Joissakin tapauksissa tutkimuspäivä 1 tehdään tutkimuspäivän 2 jälkeen riippuen kunkin potilaan syövän hoitosuunnitelmasta.

Tutkimuspäivä 2: Potilaille, joilla on äskettäin diagnosoitu keskushermoston kasvain: Tutkijat pyrkivät suorittamaan tutkimuspäivän 2 ensimmäisen viikon kuluessa sairaalaan saapumisesta juuri diagnosoidun keskushermoston kasvaimen vuoksi. Tutkijat hyväksyvät kuitenkin tutkimuspäivän 2 suorittamisen ensimmäisen kuukauden sisällä diagnoosin tekemisestä. Koehenkilöt saapuvat noin klo 8.00 Kööpenhaminan Neuromuscular Centeriin (CNMC), Rigshospitalet.

Saapuessaan lasten iholle levitetään EMLAa (paikallinen anestesiavoide), joka minimoi iv-insertion aikana mahdollisesti ilmenevän epämukavuuden. Kaksi ääreislaskimokatetria asetetaan, yksi mediaaliseen kubitaalilaskimoon stabiilien isotooppien infuusiota varten ja toinen käden selkälaskimoon verinäytteitä varten. Jos lapsella on keskuslaskimokatetri (CVK), asetamme vain yhden perifeerisen laskimokatetrin mediaaliseen kubitaalilaskimoon stabiilien isotooppien infuusiota varten.

1 tunnin ja 45 minuutin perusmerkkiaine-infuusion jälkeen otetaan perusverinäytteet (aika -15 ja 0) merkkiainerikasteiden ja hormonipitoisuuksien määrittämiseksi. Ajankohtana = 0 tarjotaan nestemäinen seka-ateria. Verinäytteitä otetaan usein 6 tunnin ajan testiaterian alkamisesta (0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 300 ja 360 minuuttia)[24], [25]. Jos lapsi suuttuu tai muusta syystä haluamme lopettaa ennen kuin 6 tuntia, käytämme jo saatuja tuloksia.

Merkkiaineet: Tässä tutkimuksessa tutkijat infusoivat suonensisäisesti pieniä määriä stabiileilla isotoopeilla leimattuja aineenvaihduntatuotteita esivalmistetuissa jatkuvissa suonensisäisissä infuusioissa: D8-fenyylialaniini, D2-tyrosiini, 13C18-oleaattihappo, D2-glukoosi, D5-glyseroli. Tämä menetelmä on vakiintunut sekä CIMT:ssä että CNMC:ssä, ja sitä on käytetty useiden potilaskategorioiden tutkimiseen aiemmin: vastasyntyneet (käynnissä oleva tutkimus), mahalaukku, vanhukset ja hermolihaspotilaat.

Merkkiaineet valmistetaan sairaalan apteekista. Kaikki ihmiskäyttöön sopivat merkkiaineet on hankittu Cambridge Isotope Laboratoriesilta, Andover, MA, USA. Stabiilit isotoopit ovat ei-radioaktiivisia ja niitä esiintyy luonnossa elintarvikkeissa (esim. maississa).

Ruokavalio: Ajankohtana = 0 (120 minuuttia infuusion jälkeen) annetaan nestemäinen sekoitettu ateria painon mukaan säädettynä. Ateria koostuu: luonnostaan ​​leimatusta D5-fenyylialaniinista ja D3-leusiinileimatusta kaseiiniproteiinista, 13C16palmitaatista, 13C6-glukoosista glukoosin, kaseiiniproteiinin ja rapsiöljyn seoksessa liuotettuna veteen energiatiheydellä 50 % CHO, 35 % rasvaa ja 15 % proteiinia. Luontaisesti leimattua kaseinaattia tuotettiin infuusiona [D5]-fenyylialaniinia ja [D3]leusiinia lypsävään lehmään, jotta saatiin rikastettua maitoa Foulumn, Arhusin yliopisto, josta kaseinaattifraktio eristettiin Arla Foodsissa hyvän valmistustavan (GMP) mukaisesti. ja turvallisuus on tarkastanut varaston asianmukaisissa sääntelyolosuhteissa käyttöön asti (Nørre Vium, Tanska) noudattaen aiemmin kuvattua menettelyä.

Verinäytteiden analyysit: Näytteet kerätään ruiskuihin, jotka sisältävät 10 μL EDTA/ml hyytymisen estämiseksi. Veri sentrifugoidaan välittömästi 4 oC:ssa plasman erottamiseksi punasoluista. Näytteet pakastetaan koodatuissa putkissa ja säilytetään -80 C:ssa analyysiin asti.

Rutiiniverinäytteet: Analysoidaan välittömästi Rigshospitaletin kliinisen biokemian laitoksella:

- Verinäytteitä ovat: insuliini, HbA1C, kolesteroli, HDL, LDL, triglyseridit

Glukoosi ja laktaatti: analysoidaan (ABL 700) heti, kun veri otetaan.

Erityiset verinäytteet:

• Vapaat rasvahapot: analysoidaan fluorometriaa käyttäen.
• Hormonit (katekoliamiinit, insuliini, inkretiinit ja glukagoni): analysoidaan käyttämällä RIA- ja Elisa-menetelmiä.
• Stabiilit isotooppirikastukset veressä: analysoidaan käyttämällä nestekromatografia-tandem-massaspektrometriaa (LC-MS/MS) ja kaasukromatografista polttoisotooppisuhdemassaspektrometriaa (GC-C-IRMS) (Thermo Scientific, Palo Alto, CA, USA ja Bremen, Saksa).

Laskelmat: Koko kehon aineenvaihduntatuotteiden kvantitatiivinen kinetiikka lasketaan käyttämällä Steelen epästabiilin tilan yhtälöä, joka on mukautettu stabiilien isotooppien analysointiin imeytymisen jälkeisissä olosuhteissa.